李巖峰, 韓奕詩, 任 桓, 陸云龍, 董欣明, 劉 樂, 胡 品, 王 寧(. 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院口腔科 解放軍總醫(yī)院口腔醫(yī)學中心, 北京 00048;. 78086部隊50分隊衛(wèi)生所, 成都 6007; . 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院病理科, 北京 00048)

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山羊上頜竇及額竇黏膜厚度對比觀察

李巖峰1, 韓奕詩1, 任 桓2, 陸云龍3, 董欣明1, 劉 樂1, 胡 品1, 王 寧1
(1. 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院口腔科 解放軍總醫(yī)院口腔醫(yī)學中心, 北京 100048;
2. 78086部隊50分隊衛(wèi)生所, 成都 610017; 3. 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院病理科, 北京 100048)

[摘要]目的 探討山羊鼻竇(上頜竇及額竇)黏膜的厚度差異并分析其原因，為上頜竇提升術中涉及黏膜問題時提供理論依據(jù)和指導。方法 從獲取的每塊鼻竇黏膜(上頜竇頂、上頜竇底及額竇黏膜)上切取適當大小黏膜置于固定液中, 24 h后制成組織切片, 在帶有刻度目鏡的光學顯微鏡下觀察, 鏡下隨機選取三處讀數(shù)并記錄。結果 山羊上頜竇頂黏膜厚度為410.03±65.97 mm, 竇底黏膜為461.33±91.37 mm，額竇黏膜為216.90±46.47 mm，上頜竇頂與額竇、上頜竇底與額竇、竇頂與竇底黏膜厚度均值之間差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論 上頜竇頂、底黏膜較額竇黏膜厚，上頜竇底黏膜較竇頂黏膜稍偏厚。

[關鍵詞]山羊; 上頜竇底提升; 竇黏膜; 黏膜厚度

上頜竇底提升術的提出與發(fā)展，為臨床剩余牙槽骨高度(residual bone height)不足的上頜后牙缺失病例創(chuàng)造了條件。無論側壁開窗式上頜竇提升術或是經(jīng)牙槽嵴頂?shù)纳项M竇提升術，均與上頜竇黏膜息息相關，因此本實驗針對其黏膜厚度進行相關研究和探討。

1 材料與方法

1.1 動物、材料及設備

18月齡山羊5只，由解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院動物實驗中心提供，雌雄不限，體態(tài)身形大小接近，身體健康，口腔、上頜竇無異常。動物實驗于解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院動物實驗中心[SYXK(軍)2012-0013]進行。

骨鋸(宇通，天津)，剪刀、彎止血鉗、無齒鑷、手術刀片(偉榮，上海)、刻度尺(得力，寧波)、CT設備( Philips，荷蘭)、光學顯微鏡(Olympus，日本)、生理鹽水、體積分數(shù)10%中性甲醛溶液、自制黏膜剝離器。

1.2 方法

1.2.1 實驗前期工作 山羊頭頸部備皮后側臥位固定，采用頸動脈空氣栓塞處死，將頭顱離斷，立即行螺旋CT掃描，CT拍攝前在雙側頰面部表面放置牙膠條作為顯影指示，掃描后即刻進行三維重建和分析(圖1)。結合影像在羊頜面部畫截骨線，鋸開上頜骨，每側上頜竇均分為頂、底兩部分(圖2),最終每只山羊鼻竇均可分為左右兩個上頜竇頂、左右兩個上頜竇底、左右兩個額竇。

1.2.2 實驗過程 按文獻[1]剝離鼻竇黏膜(左、右),每只山羊均切取5 mm×10 mm黏膜置于體積分數(shù)10%中性甲醛標本瓶中，固定24 h后制成組織切片。選擇帶有刻度目鏡的光學顯微鏡，鏡下觀測黏膜組織學特征，并選取黏膜層次分明部分作為測量區(qū), 調(diào)整黏膜與目鏡刻度垂直后隨機選取三個位點進行讀數(shù)并記錄，取其平均值作為測量值。

1.2.3 數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析 應用SPSS17.0軟件包軟件，數(shù)據(jù)以x-± s表示, 選擇配對t檢驗, 所有P值均為雙邊, P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

圖1 山羊顱骨三維重建

圖2 山羊上頜竇的頂、底

2 結果

2.1 鼻竇黏膜厚度

山羊上頜竇頂、上頜竇底、額竇黏膜厚度間均有顯著差異(P<0.01, P<0.05)(表1)。

2.2 鼻竇黏膜組織學觀察

鏡下可見(圖3、圖4)，鼻竇黏膜分為假復層柱狀纖毛上皮層、固有層、粘膜下層。假復層纖

圖3 山羊上頜竇黏膜(HE×100)

圖4 山羊額竇黏膜(HE×100)

3 討論

根據(jù)實驗動物的選擇原則和動物生物學特性，山羊上頜竇位置、大小形態(tài)和骨結構與人類相似，外側壁骨板較薄，外科鉆鉆孔開窗以及黏膜的剝離和提升都較容易[2,3]; 尤其山羊竇腔黏膜厚度、組織毛柱狀上皮由纖毛細胞、杯狀細胞以及少量基細胞組成; 固有層由位于上皮深處的基底細胞組成，具有一定的增值和分化能力; 黏膜下層為疏松結締組織，包含有血管、淋巴管、神經(jīng)以及部分腺體?？梢娚项M竇黏膜較額竇黏膜偏厚。

表1 山羊黏膜厚度測定 mm

結構也近似于人類[4,5]。因此，本實驗選擇山羊作為動物模型。

臨床上側壁開窗式上頜竇底提升術與沖頂式上頜竇底提升術均需剝離和抬高上頜竇底黏膜，故本實驗首先考慮將上頜竇底黏膜納入實驗對象中; 側壁開窗術式需對上頜竇前外側壁黏膜進行剝離，為將上頜竇其它位置黏膜與竇底黏膜進行比對，本實驗亦將距離竇底相對較遠而易區(qū)分清楚的竇頂黏膜納入。選擇額竇黏膜與上頜竇黏膜進行對比研究，探討上頜竇黏膜生物學特性并分析其差異形成的可能因素，為上頜竇提升術提供直接參考。

為保證實驗不受其他因素的干擾，山羊頭部離斷后立即進行頭顱CT掃描和后續(xù)實驗，頜骨鋸開后竇腔暴露于空氣中，為防止黏膜干燥引起性狀改變，立即開始剝離黏膜，并將暫未開始行黏膜剝離的竇腔浸泡于室溫生理鹽水中，黏膜剝離過程中使用生理鹽水不斷潤濕黏膜及竇腔。為降低實驗結果的偶然誤差、保證實驗結果和最終數(shù)據(jù)的準確性，竇黏膜的剝離由1人完成。制作黏膜組織切片時切片機垂直于黏膜，制作完成后未達標準者(本實驗出現(xiàn)5例)重新制作。

在剝離和切取上頜竇黏膜時，不同位置黏膜之間的顏色、質(zhì)地、通透性以及剝離者操作感受等均有不同: 黏膜透明、纖薄，剝離時易發(fā)生卷曲、破裂，黏膜發(fā)白、厚重時剝離相對容易且完整。額竇黏膜厚度較上頜竇偏薄已在本實驗中得到證實，但越薄的黏膜是否在壓迫和撕拉時越容易破裂，具體將在后續(xù)實驗中進行測量分析和討論。

組織固定導致細胞收縮, 在黏膜厚度測量時造成誤差。為使固定組織的收縮率盡量降低，本實驗參考文獻[6,7]，選用體積分數(shù)10%中性甲醛溶液(即含磷酸鹽的緩沖液)作為黏膜固定液。最終測得山羊上頜竇黏膜平均厚度，與以往文獻數(shù)據(jù)差異不大[4]。相對黏膜本身厚度而言，黏膜厚度值受標本制作過程中切片方向垂直與否的影響更值得考慮。固定液的選擇對竇黏膜厚度的影響程度還有待進一步探討。

實驗前行CT掃描和重建分析，旨在了解上頜竇和額竇的大小、上頜竇外側壁骨板厚度等，確定雙側上頜竇與參照物(牙膠條)間的位置關系指導截骨; 并在出現(xiàn)上頜竇分嵴、黏膜轉折和變移時，在黏膜剝離等操作前給予提示和指導。CT測量黏膜厚度，精確值較光學顯微鏡低。2011年Janner 等[8]曾運用CBCT在上頜竇不同位置測量黏膜厚度，黏膜厚度個體差異較大。故本實驗僅將CT測量結果作為組織學測量黏膜厚度值的輔助參考。

山羊上頜竇頂、上頜竇底、額竇黏膜厚度均值大小不同，從解剖方面分析: ①上頜竇與額竇黏膜厚度差別的可能原因是竇腔開口位置不同[9]或神經(jīng)支配不同。②上頜竇底與上頜竇頂、額竇黏膜厚度差別可能原因: 咀嚼力傳導致不同位置竇黏膜受刺激大小不同。以上問題有待進一步驗證。山羊鼻竇不同位置黏膜厚度均值的兩兩比較之間均有差異。其中上頜竇頂、底間差異雖有統(tǒng)計學意義，但不排除實驗中出現(xiàn)的隨機誤差導致差異的擴大，該問題有待于今后增加樣本量后進一步論證。

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Comparative Study on Mucosal Thickness of Maxillary Sinus and Frontal Sinus in Goats

LI Yan-feng1, HAN Yi-shi1, REN Huan2, LU Yun-long3, DONG Xin-ming1, LIU Le1, HU Pin1, WANG Ning1
(1. Department of Stomatology, The First Hospital Affiliated to the PLA General Hospital, Beijing100048, China; 2. Clinic, Squadron 50 of Unit 78086, Chengdu 610017, China 3. Department of Pathology, The First Hospital Affiliated to The PLA General Hospital, Beijing 100048, China)

[Abstract]Objective To explore the differences of mucosal thickness in goat paranasal sinus, and analyse the underlying reasons. The discussion can provide theoretical basis and guidance for issues related to mucosa in the practice of maxillary sinus floor augmentation. Methods The mucosa was cut into desired size from every sinus mucosa and fixed in formalin to get the tissue specimens, and observed under optical microscope with scaled eyepiece. Randomly selected three fields under the microscope from the samples and then measured and recorded. Paired t-test was used to determine the difference between the parameters, P<0.05 was regarded as statistically significant. Results Goat maxillary sinus mucosal thickness of the top was 410.03±65.97 mm, the bottom was 461.33±91.37 mm, the frontal sinus mucosa was 216.90±46.47 mm. The mean differences of mucosal thickness between the top of the maxillary sinus and the frontal sinus, the bottom and the frontal, the top and the bottom were statistically significant (P<0.05). Conclusions The top and bottom mucosal thickness of maxillary sinus was thicker than the frontal sinus mucosa, and the bottom mucosal thickness was slightly thicker than the top.

[Key words]Goat; Maxillary sinus floor elevation; Sinus mucosa; Mucosal thickness

[中圖分類號]R782.05 Q95-33

[文獻標識碼]A

[文章編號]1674-5817(2016)03-0200-04

doi:10.3969/j.issn.1674-5817.2016.03.008

[收稿日期]2015-08-31

[基金項目]解放軍總醫(yī)院臨床扶植基金(2014FC-SXYY-1003);首都衛(wèi)生發(fā)展科研專項(首發(fā)2014-4-5022)

[作者簡介]李巖峰(1975-), 男, 博士, 副主任醫(yī)師, 副教授。E-mail: m.god@yeah.net共同第一作者: 韓奕詩(1989-), 碩士, 住院醫(yī)師。E-mail: hanyishi@yeah.net

[通訊作者]王 寧, E-mail: 22247490@qq.com共同通訊作者: 任桓, E-mail: 814658302@qq.com