周云鵬，李　源，何　暢，宋端正，王　洋

(遼寧大學(xué) 藥學(xué)院，遼寧省新藥研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 沈陽 110036)

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3-氨基-4-氯-1H吲唑衍生物的合成及抗腫瘤活性測(cè)定

周云鵬，李源，何暢，宋端正，王洋*

(遼寧大學(xué) 藥學(xué)院，遼寧省新藥研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 沈陽 110036)

摘要：以2,6-二氯苯腈為起始原料通過5 步反應(yīng)合成了9個(gè)具有抗腫瘤活性的吲唑類化合物并對(duì)其抗腫瘤活性進(jìn)行了初步篩選. 目標(biāo)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)經(jīng)1H-NMR 和IR 確證，體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示化合物2c的抗腫瘤活性最好，對(duì)K-562、SMMC7721腫瘤細(xì)胞有明顯抑制作用.

關(guān)鍵詞：吲唑；合成；抗腫瘤

吲唑衍生物是一類重要的雜環(huán)化合物，因其具有廣泛的生物活性，已成為藥學(xué)領(lǐng)域科研工作者研究的熱點(diǎn)[1-4]. 2004年LIOU等[5]報(bào)道了具有抗腫瘤活性的考布他汀(CA-4)通過抑制微管蛋白聚集，造成腫瘤細(xì)胞的壞死. CA-4對(duì)包括很多耐藥瘤株在內(nèi)的多種腫瘤細(xì)胞都有強(qiáng)大的細(xì)胞毒作用，尤其是其具有腫瘤血管生成抑制作用. 2007年DUAN等人[6]報(bào)道作為考布他汀類似結(jié)構(gòu)的吲唑衍生物具有明顯的抗癌活性，IC50= 13 nmol·L-1(H460，人類大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株)，并明確報(bào)道3-位取代吲唑?yàn)槲⒐艿鞍滓种苿┑乃幚碜饔?，但是沒有進(jìn)行深入的研究該類化合物的構(gòu)效關(guān)系. 在分析文獻(xiàn)報(bào)道的3-位取代吲唑類化合物結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的基礎(chǔ)上[7-9]，結(jié)合考布他汀的骨架結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)了一系列全新結(jié)構(gòu)的3-氨基取代的吲唑類化合物，通過把連接基團(tuán)酮羰基改換成酰胺羰基，一方面增加了原化合物的連接基團(tuán)長度；另一方面所設(shè)計(jì)的酰胺結(jié)構(gòu)通過烯醇互變得到具有抗腫瘤活性的考布他汀類似結(jié)構(gòu)(圖1).

1實(shí)驗(yàn)部分

1.1儀器與試劑

AL 104萬分之一電子天平(瑞士Mettler-Toledo Group公司)； X-4A型顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀(上海精密儀器有限公司)；Spectrum One紅外光譜儀(美國Perkin Elmer公司)；ARX-600核磁共振儀(德國布魯克公司，TMS為內(nèi)標(biāo))； LCQ Advantage MAX 10離子肼質(zhì)譜儀(美國菲尼根公司). 實(shí)驗(yàn)所用試劑購自國藥集團(tuán)藥業(yè)股份有限公司.

1.2合成

吲唑類化合物的合成路線見圖2.

1.2.13-氨基-4-氯-1H-吲唑(1)的合成

稱取2,6-二氯苯腈(13.24 g, 73 mmol)，量取15 mL無水N-甲基吡咯烷酮于500 mL茄形瓶，溶解后升溫至70 ℃，在攪拌下滴入水合肼(98%， 40 mL， 730 mmoL)反應(yīng)23 h，傾入攪拌中的冰水溶液，過濾，析出白色固體11.70 g，產(chǎn)率96.00%，m.p. 138～139 ℃. IR (KBr, cm-1): 3 462, 3 338 (NH2), 3 169 (NH), 1 620, 1 606, 1 540,1 499 (ArC=C).1H NMR (DMSO,δ): 11.8 (s, 1H, NH), 7.18 (dd, 1H, J = 3.7 Hz, Ph-H ), 7.15 (d, 1H, J = 3.7 Hz, Ph-H), 6.8 (d, 1H, J = 3.6 Hz, Ph-H), 5.14 (s,2H, NH).

圖1　考布他汀拼合設(shè)計(jì)吲唑類衍生物Fig.1　Combretastatin split design indole derivatives

圖2　吲唑類化合物的合成Fig.2　Synthesis of indazole compounds

1.2.2氮-(4-氯-1H-吲唑-3-基)-2-(4-甲氧芐基)乙酰胺(2a)的合成

取3-氨基-4-嗎啉-1H-吲唑(0.68 g，3.58 mmol)，3,4,5-三甲氧基苯甲酸(0.99 g，4.65 mmol)，EDCI(1.03 g，5.37 mmol)，DMAP(0.44 g，3.58 mmol)，HOBT(0.48 g，3.58 mmol)和干燥的DMF 10 mL溶解于25 mL茄型瓶中，室溫反應(yīng)4 h. 將反應(yīng)液倒入盛有100 mL水的分液漏斗中，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥有機(jī)相. 濃縮至1/3冷卻后有晶體析出. 得白色針狀結(jié)晶 1.31 g，產(chǎn)率89.11%，m.p. 163～164 ℃. IR (KBr, cm-1): 3 434, 3 350 (N-H), 2 961, 2 832 (C-H), 1 689 (C=O), 1 605, 1 548, 1 515 (Ar),1 245, 1 126, 1 178, 1 100 (C-O).1H NMR (CDCl3,δ): 8.31 (d, 1H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 7.40 (t,1H,J= 8.1 Hz, Ph-H), 7.30 (t, 2H,J= 10.4 Hz, Ph-H), 7.22 (t,1H,J= 3.9 Hz, Ph-H), 6.88 (t, 2H,J= 4.4 Hz, Ph-H), 4.93 (s, 2H, N-H), 4.3 (s,2H,-CH2-), 3.79 (s, 3H, -CH3).

化合物2b-2e合成方法同上.

2bIR (KBr, cm-1): 3 468, 3 416 (N-H), 1 700 (C=O), 1 634, 1 565, 1 543, 1 518 (Ar), 1 256, 1 138 (C-O).1H NMR (CDCl3,δ): 8.34 (d, 1H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 7.42 (t, 1H,J= 8.1 Hz, Ph-H), 7.23 (dd, 1H,J= 8.6 Hz, Ph-H), 6.81(d, 1H,J= 1.4 Hz, Ph-H), 4.89 (s, 2H, N-H), 3.86 (d, 6H,J= 2.3 Hz, CH3O ), 3.34 (t, 2H,J= 7.7 Hz, -CH2-), 3.07(t, 2H,J= 7.7 Hz, -CH2-).

2cIR (KBr, cm-1): 3 427, 3 291 (NH), 2 950, 2 816 (C-H),1 667 (C=O), 1 622, 1 585, 1 540, 1 505 (Ar), 1 237, 1 126, 1 114 (C-O).1H NMR (CDCl3,δ): 8.44 (d, 1H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 7.48 (t, 1H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 7.34 (s, 2H, Ph-H), 7.28 (t, 2H,J= 5.1 Hz, Ph-H), 4.97 (s, 2H, N-H), 3.93 (s, 9H, CH3O).

2dIR (KBr, cm-1): 3 480, 3 442, 3 290 (N-H), 1 665(C=O), 1 629, 1 610, 1 588, 1 550 (Ar), 1 263 (P=O), 1 215, 1 190 (C-O).1H NMR (CDCl3,δ): 8.45 (d, 1H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 8.01 (d, 1H,J= 3.9 Hz, Ph-H), 7.45 (m, 3H, Ph-H), 7.28 (d, 1H,J= 3.6 Hz, Ph-H ), 4.94 (s, 2H, N-H), 4.05 (m, 4H,J= 7.7 Hz, -CH2O ), 3.27 (s, 1H, -CH2-), 3.19 (s, 1H, -CH2-), 1.28 (t, 6H,J= 7.5 Hz, -CH3).

2eIR (KBr, cm-1): 3 432, 3 361, 3 332 (N-H), 1 669, 1 645 (C=O), 1 645, 1 606, 1 530(Ar), 1 210, 1 124 (C-O).1H NMR (DMSO,δ): 8.20 (d,1H,J= 3.9 Hz, Ph-H), 7.53 (t, 1H,J= 8.1 Hz, Ph-H), 7.34 (dd, 2H,J= 8.4 Hz, Ph-H), 7.16 (m, 2H,J= 10.5 Hz, Ph-H), 6.62 (d, 2H,J= 5.3 Hz, Ph-H), 6.27 (s, 2H, N-H), 3.71 (s, 3H, -CH3), 3.26 (t, 2H,J= 3.2 Hz, -CH2-), 2.75 (t, 2H,J= 6.6 Hz, -CH2-).1.2.32-(3-氨基-4-氯-1H吲唑)草酸乙酯(3)的合成

取3-氨基-4-氯-1H-吲唑(35.00 g，209 mmol)，干燥三乙胺(53.00 g, 524 mmol)和干燥四氫呋喃溶液250 mL于500 mL茄形瓶中，氮?dú)獗Ｗo(hù)0 ℃條件下攪拌，緩慢滴加草酰氯單乙酯(31.50 g，230 mmol)和100 mL干燥四氫呋喃的混合溶液，反應(yīng)15 min. 將反應(yīng)液減壓旋蒸至干，乙酸乙酯溶解，抽濾，硅膠柱層析，采用V正己烷∶V乙酯為8∶1的洗脫劑洗脫，回收溶劑，得白色固體12.75 g，產(chǎn)率 23.00%，m.p. 136～137 ℃. IR (KBr, cm-1): 3 492, 3 327 (N-H), 2 981, 2 940 (C-H), 1 748, 1 698 (C=O), 1 631, 1 602, 1 550 (Ar), 1 237, 1 126, 1 240, 1 107 (C-O).1H NMR (DMSO-d6,δ): 8.11 (d,1H,J= 3.9 Hz, Ph-H), 7.63 (t, 1H,J= 7.8 Hz, Ph-H), 7.48 (d, 1H,J= 3.9 Hz, Ph-H), 6.57 (s, 2H, N-H), 4.37 (q, 2H,J= 10.8 Hz, -CH2O), 1.32 (t, 3H,J= 7.2 Hz, -CH3).

1.2.42-((4-氯-1-(4-甲氧芐基)-1H-吲唑-3-基)(4-甲氧芐基)氨基) -2-草酸乙酯(4a)的合成

取化合物3 (0.96 g, 3.6 mmol)，無水碳酸鉀(1.00 g, 7.2 mmol)和100 mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺溶液于500 mL茄形瓶中，0 ℃氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下攪拌，緩慢滴加溶于干燥的50 mL N,N-二甲基甲酰胺溶的對(duì)甲氧基芐氯(0.68 g，4.3 mmol)，反應(yīng)5 h，將反應(yīng)液加入400 mL蒸餾水和乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，拌樣，硅膠柱層析，采用V正己烷∶V乙酯為6∶1的洗脫劑洗脫，得白色固體0.32 g，產(chǎn)率 17.00%, m.p. 167～169 ℃. IR (KBr, cm-1): 3 415 (N-H)，2 954, 2 934 (C-H),1 731, 1 681 (C=O)，1 612，1 513, 1 496, 1 442 (Ar)，1 247, 1 128, 1 110 (C-O).1H NMR (DMSO-d6,δ):δ7.70 (d,1H,J= 8.1 Hz, Ph-H ), 7.40 (t, 1H,J= 8.4 Hz, Ph-H), 7.26 (d, 1H,J= 7.2 Hz, Ph-H ), 7.07 (d, 2H,J= 8.7 Hz, Ph-H), 6.96 (d, 2H,J= 8.7 Hz, Ph-H), 6.77 (m, 4H, Ph-H), 5.47(s, 2H, Ph-CH2-), 3.71 (s, 6H, CH3O), 3.35 (m, 2H, -CH2O), 2.49 (s, 2H, Ph-CH2-), 0.57 (t, 3H,J= 14.1 Hz, -CH3).

化合物4b合成方法同上.

4bIR (KBr, cm-1): 2 983, 2 938 (C-H), 1 748, 1 679 (C=O), 1 616, 1 566, 1 504 (Ar), 1 243, 1 213 (C-O).1H NMR (CDCl3,δ): 7.34 (t, 1H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 7.29 (t, 1H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 7.19 (d, 2H,J= 3.9 Hz, Ph-H), 4.02 (q, 2H,J= 2.7 Hz, -CH2-), 4.02 (s, 3H, CH3N), 3.43 (S, 3H, CH3N), 0.94 (s, 3H, -CH3).

1.2.5N1-(4-氯-1-(4-甲氧芐基)-1H-吲唑-3-基)-N1-(4-甲氧芐基)-N2-(吡啶-4-基)草酰胺(5a)的合成

取4-氨基吡啶(500 mg, 5.3 mmol)，干燥的甲苯溶劑20 mL于250 mL茄形瓶中. 在氮?dú)獗Ｗo(hù)室溫條件下，滴加三甲基鋁的甲苯溶液(2.7 mL, 2 mol)，反應(yīng)0.5 h，再加入化合物 4a (1.19 g, 4.43 mmol)，110 ℃反應(yīng)6 h，加入3 mL(4 mol/L)的氫氧化鈉水溶液淬滅，反應(yīng)液經(jīng)減壓旋蒸至干，加入20 mL蒸餾水和乙酸乙酯萃取，將有機(jī)相酸堿度調(diào)至中性，再經(jīng)無水硫酸鈉干燥，硅膠柱層析，采用V正己烷∶V乙酯為2∶1的洗脫劑洗脫，回收溶劑，得白色固體1.03 g，產(chǎn)率 35.00%. m.p. 152～153 ℃. IR (KBr, cm-1): 3 413 (N-H), 2 955, 2 927 (C-H),1 705, 1 668 (C=O), 1 613 (C=N), 1 593, 1 513, 1 494 (Ar), 1 248, 1 177 (C-O).1H NMR (CDCl3,δ): 9.21 (s, 1H, -NH), 8.45 (d, 2H,J= 3 Hz, Pyridine-H), 7.35 (dd, 2H,J= 3.2 Hz, Ph-H ), 7.24 (dd, 2H,J= 4.8 Hz, Pyridine-H), 7.18 (d, 2H,J= 4.4 Hz, Ph-H), 7.10 ( m,1H, Ph-H), 6.97 (d, 2H,J= 4.4 Hz, Ph-H), 6.74(m, 4H, Ph-H), 5.37 (s, 2H, Ph-CH2-), 5.40 (s, 2H, Ph-CH2-), 3.76 (s, 6H, CH3O).

化合物5b-5d合成方法同上.

5bIR (KBr, cm-1): 3 414 (N-H), 2 924, 2 852 (C-H), 1 707, 1 669 (C=O), 1 616 (C=N), 1 594, 1 498 (Ar).1H NMR (DMSO-d6,δ): 11.2 (s, 1H, N-H), 8.37 (dd, 2H,J= 3.2 Hz, Pyridine-H), 7.66(d, 1H,J= 4.2 Hz, Ph-H),7.48 (m, 2H, Pyridine-H), 7.44 (d, 1H,J= 4.4 Hz, Ph-H), 7.26 (d, 1H,J= 3.6 Hz, Ph-H), 3.96 (s, 3H, -CH3), 3.3 (s, 3H, -CH3).

5cIR (KBr, cm-1): 3 414 (N-H), 2 928, 2 833 (C-H),1 662, 1 636 (C=O), 1 613, 1 585, 1 512, 1 490 (Ar), 1 247, 1 176 (C-O).1H NMR (CDCl3,δ): 8.30 (d, 2H,J= 2.4 Hz, Pyrimidin-H), 7.40 (s, 1H, N-H), 7.22 (d, 2H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 7.17 (t, 1H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 7.14 (t, 1H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 7.04 (d, 1H,J= 3.9 Hz, Pyrimidin -H), 6.95 (d, 2H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 6.75 (dd, 4H,J= 8.4 Hz, Ph-H), 6.23 (t, 1H,J= 4.8 Hz, Ph-H), 5.34 (s, 2H, -CH2-), 4.72 (s, 2H, -CH2-), 3.77 (s, 6H, -CH3).

5dIR (KBr, cm-1): 3 414 (N-H), 2 926, 2 851 (C-H); 1 701,1 667 (C=O); 1 615, 1 576, 1 498 (Ar).1H NMR (DMSO-d6,δ): 10.9 (s, 1H, N-H), 8.33 (m, 1H, Pyridine-H), 7.67(d, 1H,J= 1.8 Hz, Pyridine-H), 7.65 (t, 1H,J= 4.1 Hz, Ph-H), 7.6 (d, 1H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 7.43 (t, 1H,J= 4.2 Hz, Ph-H), 7.12 (m, 1H, Pyridine-H), 3.96 (s, 3H, -CH3), 3.45 (s, 3H, -CH3).

2結(jié)果與討論

以2,6-二氯苯腈為原料，與水合肼(98%)在N-甲基吡咯烷酮存在下通過環(huán)合反應(yīng)制得3-氨基-4-氯-1H-吲唑(1)，并與含有羧基的系列化合物，通過縮合反應(yīng)合成5個(gè)結(jié)構(gòu)新穎的化合物2a-2e，(1)經(jīng)草酰氯單乙酯縮合、鹵代烴加成、酰胺化反應(yīng)后得到4個(gè)目標(biāo)產(chǎn)物(5a-5d)，產(chǎn)物通過IR、1H NMR進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確證(圖2).

制備3-氨基-6-氯-1H-吲唑時(shí)，原文獻(xiàn)以2,6-二氯苯腈為原料，醋酸鈉作為縛酸劑，以吡啶作溶劑在105 ℃條件下滴入水合肼反應(yīng)16 h；在后處理方面，在30 ℃溫度條件通過加水析出、過濾， 在0 ℃的水中重結(jié)晶得產(chǎn)物，收率74%. 而我們?cè)?0 ℃反應(yīng)條件下以無水N-甲基吡咯烷酮作溶劑，滴入高濃度水合肼反應(yīng)23 h；在后處理方面，反應(yīng)液直接傾入攪拌中的冰水溶液析出白色固體，過濾，產(chǎn)率96%. 對(duì)比原文獻(xiàn)的制備方法，本方法反應(yīng)條件溫和、收率更高.

測(cè)定3-氨基-4-氯-1H吲唑衍生物對(duì)不同腫瘤細(xì)胞的IC50值.

收集對(duì)數(shù)期細(xì)胞用含10%胎小牛血清的培養(yǎng)液配成單個(gè)細(xì)胞懸液，用RPMI-1640稀釋到每毫升1×105個(gè)，96孔板中每孔加入細(xì)胞懸液100 μL，5% CO237 ℃下孵育，8 h后貼壁或懸浮，加入梯度稀釋的藥物，濃度分別為1，1×10-1，1×10-2，1×10-3，1×10-4，1×10-5和1×10-6μmol·L-1. 孵育24 h后在倒置顯微鏡下觀察查看細(xì)胞狀態(tài)，每孔加MTT溶液(5 g·L-1)20 μL，繼續(xù)孵育4 h，終止培養(yǎng)反應(yīng)，小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液. 對(duì)于K562等懸浮細(xì)胞需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液，小心用PBS沖洗2～3遍再加入MTT孵育4 h，每孔析出紫色結(jié)晶后，加150 μL DMSO，振蕩10 min，使結(jié)晶物充分溶解，在酶聯(lián)免疫監(jiān)測(cè)儀490 nm處測(cè)定各孔光吸收值. 采用MTT法對(duì)K562、SMMC7721、A549、T-47D細(xì)胞進(jìn)行抗腫瘤活性測(cè)試，陽性對(duì)照藥為紫杉醇(Taxol)，結(jié)果見表1.

表1　吲唑類化合物體外抗腫瘤活性測(cè)定結(jié)果(IC50， μmol·L-1)

由體外活性測(cè)試結(jié)果可以簡(jiǎn)單推導(dǎo)出如下構(gòu)效關(guān)系：(1)活性順序?yàn)?c>2d>5b>2a>5d> 5c>5a> 2b>2e，當(dāng)R1上苯環(huán)與酰胺鍵間距延長時(shí)，化合物活性有所降低. 且苯環(huán)取代基為供電子基團(tuán)時(shí)，活性較好. (2)R2用甲基取代時(shí)，活性要優(yōu)于對(duì)甲氧芐基，說明位阻小有利于活性增強(qiáng). (3)R3含氮雜環(huán)取代基活性順序?yàn)猷奏せ?4-吡啶基>2-吡啶基.

3結(jié)論

合成了9個(gè)新型吲唑類化合物2a-2e、5a-5d，體外抗腫瘤活性研究表明，吲唑系列化合物對(duì)慢粒白血病細(xì)胞K562、肝癌細(xì)胞SMMC7721均有效且體外活性測(cè)試優(yōu)于陽性對(duì)照藥紫杉醇，具有一定抗腫瘤活性；其中化合物2c活性最好，同時(shí)對(duì)2c的安全性測(cè)試得知，其小鼠LD50為254.32 mg·kg-1，95%的可信限為214.35～294.49 mg·kg-1. 本研究對(duì)吲唑類抗腫瘤藥物研發(fā)具有一定參考價(jià)值.

參考文獻(xiàn)：

[1] 黃兆琦. DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶與細(xì)胞凋亡[J]. 醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào), 2002, 15(6): 539-541.

[2] JAKUPEC M A， REISNER E， EICHINGER A， et al. Redox-active antineoplastic ruthenium complexes with indazole: Correlation of in vitro potency and reduction potential [J]. J Med Chem, 2005, 48(8): 2831-2837．

[3] 張菊, 朱孝峰, 劉宗潮. 酪氨酸激酶小分子抑制劑在腫瘤治療中的研究[J]. 國際腫瘤學(xué)雜志, 2003, 30(3): 199-201.

[4] WONG T W， LEE F Y， YU C， et al. Preclinical antitumor activity of BMS-599626, a pan-HER Kinase inhibitor that inhibits HER1/HER2 homodimer and heterodimer signaling [J]. Clin Cancer Res, 2006, 12(20): 6186-6193．

[5] LIOU J P， CHANG Y L， KUO F M， ET AL. Concise synthesis and structure-activity relationships of combre-tastatin A-4 analogues, 1-aroylin doles and 3-aroylindoles, as novel classes of potent antitubulin agents [J]. J Med Chem, 2004, 47(17): 4247-4257．

[6] DUAN J X， CAI X， MENG F， et al. Potent antitubulin tumor cell cytotoxins based on 3-aroyl indazoles [J]. J Med Chem, 2007, 50(5): 1001-1006．

[7] TUNG Y S， COUMAR M S， WU Y S， et al. Scaffold-hopping strategy: synthesis and biological evaluation of 5, 6-fused bicyclic heteroaromatics to identify orally bioavailable anticancer agents [J]. J Med Chem, 2011, 54(8): 3076-3080.

[8] ATTA-UR-R， MALIK S， HASAN S S， et al. Nigellidine—A new indazole alkaloid from the seeds of Nigella sativa [J]. Tetrahedron Lett, 1995, 36(12): 1993-1996．

[9] SCHMIDT A. Biologically active mesomeric betaines and alkaloids, derived from 3-hydroxypyridine, pyridin-N-oxide, nicotinic acid and picolinic acid: three types of conjugation and their consequences curr [J]. J Org Chem, 2004, 8(8): 653-670．

[責(zé)任編輯：任鐵鋼]

收稿日期：2016-01-17.

作者簡(jiǎn)介：周云鵬(1974-),男，實(shí)驗(yàn)師，研究方向?yàn)橛袡C(jī)合成. E-mail: 13940355775@163.com. *通訊作者, E-mail：Ldwangyang@163.com.

中圖分類號(hào)：O621.25

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1008-1011(2016)03-0340-05

Synthesis and antitumor activities of 3-amino-4-chlor-1H-indazole derivatives

ZHOU Yunpeng, LI Yuan, HE Chang, SONG Duanzheng, WANG Yang*

(Collegeofpharmacy,LiaoningUninversity,NewDrugResearchandDevelopmentKeyLaboratoryofLiaoningProvince,Shenyang110036,Liaoning,China)

Abstract:Starting from 2-fluoro-6-morpholinobenzonitrile, 9 compounds were synthesized through five-steps reaction. The structure were verified by1H-NMR and IR． Its antitumor activity was preliminarily screened． In vitro experiments compound 2c exhibited obvious antitumor activities on K-562 and SMMC7721 tumor cells.

Keywords:indazoles； synthesis； anti-tumor