閆振宇　買春陽　高　鵬　蘇　博　王世宣

(河南省南陽市中心醫(yī)院，南陽473009)

Her2在乳腺癌和胃癌中表達的臨床意義①

閆振宇買春陽②高鵬蘇博王世宣③

(河南省南陽市中心醫(yī)院，南陽473009)

[摘要]目的：探討Her2在乳腺癌和胃癌中表達的臨床情況與相關意義，為腫瘤防治提供參考。方法：收集2009年3月到2014年5月在我院行外科手術切除的60例確診的進展期胃癌標本與60例確診的晚期乳腺癌標本，都進行Her2病理表達免疫組化分析，并調(diào)查了相關臨床病理資料進行相關性分析。結果：Her2的乳腺癌和胃癌標本中陽性表達率分別為40.0%和36.7%，對比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。Her2表達與惡性腫瘤患者的年齡、病理類型無關，與TNM分期與淋巴結轉移有明顯相關性(P<0.05)。Spearman相關分析顯示乳腺癌與胃癌中的Her2表達都與Survivin、Bcl-2表達存在明顯正向相關性(P<0.05)。結論：乳腺癌和胃癌患者Her2都呈現(xiàn)高病理表達狀況，與TNM分期與淋巴結轉移有明顯相關性，能通過調(diào)節(jié)部分凋亡抑制蛋白，參與腫瘤的發(fā)病與轉移過程。

[關鍵詞]乳腺癌；胃癌；Her2；病理特點

乳腺癌和胃癌都是常見的惡性腫瘤之一，由于各種因素的影響，兩者在我國其發(fā)病率呈明顯上升趨勢，且發(fā)病年齡也有年齡化的趨勢，是我國腫瘤防治的重點之一[1,2]?，F(xiàn)代研究表明惡性腫瘤的病因是多方面的，其發(fā)展也呈現(xiàn)階段性，目前臨床對腫瘤病程以及預后的判斷依據(jù)主要包括病理學分級、腫瘤轉移狀況、腫瘤體積和組織學分級等[3,4]。手術切除是目前乳腺癌和胃癌的主要治療方法，然而受制于癌癥診斷的局限性，諸多胃癌和乳腺癌患者在就診時，病情已經(jīng)發(fā)展至癌癥中晚期，錯過了手術切除最佳時期，使得手術切除效果顯著下降，甚至有些患者已經(jīng)無法接受手術切除治療，切除手術后胃癌和乳腺癌患者的成活率只有50%左右，患者死亡率比較高[5，6]。隨著基礎醫(yī)學的發(fā)展，細胞內(nèi)的信號傳導通路在胃癌和乳腺癌的發(fā)生發(fā)展、診斷和治療方面的意義得到了廣泛關注[7]。其中表皮生長因子受體(Epithelial growth factor receptor，EGFR)通路是影響腫瘤的重要通路，EGFR屬于酪氨酸激酶受體家族，主要在上皮組織細胞表面，包括Her1、Her2、Her3和Her4等成員[8]。其中Her2是原癌基因Her2/neu編碼的一種分子量為185 kD跨膜糖蛋白p185，HER2基因擴增與增加細胞分化、局部及遠處轉移、遷移、減少細胞凋亡、加快血管發(fā)生、腫瘤侵襲、局部及遠處轉移密切相關[9]?；A研究表明Her2的過量表達可促進腫瘤細胞的轉移，一方面通過調(diào)節(jié)上皮細胞鈣黏蛋白等黏附因子的表達來促進遷移，另一方面可啟動多種轉移機制來加快腫瘤細胞轉移[10]。研究表明，大約25%～30%的浸潤性乳腺癌和80%胃癌患者有Her2基因擴增或蛋白過表達，但是具體的表達對比情況還不明確[11]。因此準確地檢測Her2狀態(tài)不僅能為乳腺癌和胃癌患者的預后提供依據(jù)，而且是有效治療乳腺癌和胃癌的前提。本文為此具體探討了乳腺癌和胃癌患者Her2病理表達情況，分析其臨床病理意義，可以為乳腺癌和胃癌的靶向治療提供進一步依據(jù)?，F(xiàn)報告如下。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1研究對象收集2009年3月到2014年5月在我院行外科手術切除的60例確診的進展期胃癌標本與60例確診的晚期乳腺癌標本，所有病例進行切除手術前都沒有接受過化療、放療或其他抗癌藥物治療，所有患者都進行腫瘤全切或次全切手術，并將淋巴結根治性切除；所有研究得到了患者的知情同意與倫理委員會的批準。為了保持樣本的同一性，胃癌患者我們也都選擇了女性。胃癌患者中年齡最小34歲，最大78歲，平均年齡(56.33±4.22)歲；病理類型：鱗癌10例，腺癌42例，腺鱗癌8例；TNM國際分期：Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期，分別為34例、20例和6例；無淋巴結轉移40例，淋巴結轉移20例。乳腺癌患者中年齡最小33歲，最大79歲，平均年齡(56.02±5.11)歲；病理類型：浸潤性導管癌54例，浸潤性小葉癌2例，浸潤性小葉導管混合癌8例；TNM國際分期：Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期，分別為33例、21例和6例；無淋巴結轉移40例,淋巴結轉移20例。不同患者的年齡、TNM分期與淋巴結轉移情況對比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.1.2主要試劑兔抗Her2單克隆抗體、即用型快捷免疫組化試劑盒購自福州邁新生物技術開發(fā)有限公司，其余生化試劑都購自北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.2方法

1.2.1標本處理所有手術切除的標本離體后立即用10%中性福爾馬林固定，8～24 h后按常規(guī)行系列脫水、透明和石蠟包埋，選擇4 μm切片，然后進行病理的免疫組化分析。

1.2.2檢測方法腫瘤切片免疫組化染色后，置于光學顯微鏡下觀察，并分析和處理。本實驗通過雙盲法來分析陽性，同時每張切片由兩位資深病理科醫(yī)師分別做出各自的判斷。

Her2陽性細胞染色結果顯示棕黃色均勻細顆粒主要分布在胞漿和細胞膜上，根據(jù)病變細胞中陽性細胞所占百分比以及著色深淺來判斷和進行分級：(-)：腫瘤組織 中無細胞核/膜染色或者已染色的細胞膜/核染色的比例只有10%；(+)：已染色的細胞膜/核染色的比例大于10%；(++)：超過10%的腫瘤細胞膜/核全部染色，染色程度由弱至中度；(+++)：超過30%的腫瘤細胞被完全染色，染色程度較深。上述分級中，Her2蛋白(-)或(+)列入陰性范疇；(++)及其以上列入陽性范疇。用已知Her2陽性的腫瘤標本作陽性對照，用PBS液代替探針混合液作陰性對照。

1.3統(tǒng)計學方法采用SPSS18.0軟件來分析研究數(shù)據(jù)，采用χ2檢驗來比較表達陽性情況同配對計數(shù)資料之間的差異性，采用Spearman來進行相關性分析，P<0.05表示差異顯著，具備統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1乳腺癌和胃癌的Her2陽性表達情況對比經(jīng)過觀察，Her2的乳腺癌和胃癌標本中陽性表達率分別為40.0%和36.7%，對比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1、圖1～4。

2.2Her2表達與乳腺癌和腫瘤患者臨床各病理特征間的關系檢測和觀察結果顯示，Her2表達不受惡性腫瘤患者病理類型和年齡的影響，與TNM分期與淋巴結轉移有明顯相關性(P<0.05)。見表2與表3。

2.3相關性分析我們選擇了惡性腫瘤的常規(guī)檢測指標Survivin、Bcl-2進行了相關性分析，結果顯示乳腺癌與胃癌中的HER2表達都與Survivin、Bcl-2表達存在明顯正向相關性(P<0.05)。見表4。

表1乳腺癌和胃癌的Her2陽性表達情況對比(n)

Tab.1Her2 positive expression comparison in breast cancer and gastric cancer(n)

TissuesnPositiveexpressionPositiveexpressionrateBreastcancer602440.0%Gastriccancer602236.7%χ20.293P>0.05

圖1　乳腺導管原位癌HER2表達強陽性于胞膜(×400)Fig.1　DCIS HER2 strong expression in membrane(×400)

圖2　乳腺浸潤性導管癌HER2表達強陽性于胞膜(×400)Fig.2　Invasive ductal carcinoma HER2 strong expression in membrane (× 400)

圖3　胃鱗癌HER2表達強陽性于胞漿(×400)Fig.3　HER2 expression in squamous cell carcinoma of stomach strongly positive in cytoplasm (× 400)

圖4　胃腺癌HER2表達強陽性于胞漿(×400)Fig.4　Gastric adenocarcinoma strong positive HER2 expression in cytoplasm (× 400)

表2乳腺癌HER2表達的臨床病理特點分析(n)

Tab.2Clinical and pathological features of HER2 protein expression in breast cancer (n)

Pathologicalfeaturesn=60Positiveexpression(n=24)χ2PAge≥604518(40.0%)0.000>0.05<60156(40.0%)Pathologicaltype-invasiveductalcarcinoma5418(33.3%)0.293>0.05Invasivelobularcarcinoma21(50.0%)Invasivelobularcarcinomamixingduct85(62.5%)TNMinternationalstaging-Ⅰstage3312(36.4%)0.311>0.05Ⅱstage219(42.9%)Ⅲstage63(50.0%)Lymphnodemetastasis-Yes208(40.0%)0.000>0.05No4016(40.0%)

表3胃癌HER2表達的臨床病理特點分析(n)

Tab.3Clinical and pathological features of HER2 protein expression in gastric cancer (n)

Pathologicalfeaturesn=60Positiveexpression(n=22)χ2PAge≥604416(36.4%)0.078>0.05<60166(37.5%)Pathologicaltype-invasiveductalcarcinoma104(40.0%)0.293>0.05Invasivelobularcarcinoma4216(38.1%)Invasivelobularcarcinomamixingduct82(25.0%)TNMinternationalstaging-Ⅰstage3412(35.3%)0.331>0.05Ⅱstage207(35.0%)Ⅲstage62(33.3%)Lymphnodemetastasis-Yes208(40.0%)0.236>0.05No4014(35.0%)

表4乳腺癌與胃癌中的HER2表達與傳統(tǒng)指標的相關性分析

Tab.4Correlation analysis between HER2 expression and traditional indicators in breast cancer and gastric cancer

IndicatorsBreastcancerrPGastriccancerrPSurvivin0.522<0.050.500<0.05Bcl-20.467<0.050.387<0.05

3討論

乳腺癌與胃癌都是最常見的惡性腫瘤之一，其中胃癌居消化系統(tǒng)惡性腫瘤首位，乳腺癌居婦科腫瘤的首位。我國是世界上乳腺癌與胃癌都高發(fā)的國家，目前乳腺癌與胃癌手術切除及放化療治療效果仍不盡人意，中晚期患者總體5年生存率仍然不高[12]。惡性腫瘤最根本的特征為轉移與分期增加，該特征是將惡性腫瘤患者引向死亡的重要因素，是影響手術切除效果及術后預后效果的關鍵因素[13]。現(xiàn)代腫瘤學認為，惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展不僅與腫瘤細胞增殖有關，還與信號傳導通路的變化有關。表皮生長因子受體(EGFR)家族是癌癥發(fā)生和發(fā)展相關的重要信號調(diào)節(jié)因子，EGFR是一種細胞表面受體，主要表達于上皮組織細胞組織?；A研究顯示Her2的表達觸發(fā)信號下游的蛋白磷酸化，進而調(diào)節(jié)血管生成和細胞增殖[14]。一些乳腺癌患者體內(nèi)Her2蛋白表達顯著上調(diào)，從而促發(fā)下游信號通路，引起下游蛋白磷酸化，從而加快腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。比如惡性腫瘤中普遍存在凋亡信號途徑的缺陷，提示凋亡的抑制可能促進了腫瘤的形成、進展和癌細胞轉移的出現(xiàn)[15]。而常規(guī)的腫瘤檢測指標Survivin、Bcl-2是細胞生長、分化和存活的重要調(diào)節(jié)因子，Survivin、Bcl-2均具有抑制細胞凋亡的作用，且目前對其抗凋亡作用機制的研究已較成熟[16]。

Her2編碼一種跨膜酪氨酸激酶受體，該受體蛋白與EGFR家族成員及其配體之間相互作用，通過細胞間的信號傳導，調(diào)節(jié)細胞生長、分化和增殖。不過Her2的過表達除了常規(guī)肺癌外，但乳腺癌與胃癌中的表達狀況存在爭議。相關研究表明，Her2的過度表達可加快腫瘤新生血管生成、抑制細胞凋亡、上調(diào)血管通透性因子(VPF)/血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達，提高腫瘤細胞遷移和侵襲能力，延長腫瘤細胞存活周期，破壞機體組織抗侵襲屏障等。可見，科學準確地分析Her2表達狀態(tài)不僅能為乳腺癌與胃癌患者的預后提供依據(jù)，同時有助于乳腺癌和胃癌的有效診治[17]。目前，HER2受體蛋白表達主要通過免疫組化法來檢測，采用抗HER2的特異性抗體來分析腫瘤細胞表面HER2表達狀況。本文Her2的乳腺癌和胃癌標本中陽性表達率分別為40.0%和36.7%，對比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。表明HER2的過表達存在于乳腺癌，也在胃癌中過度表達。同時當前也有研究表明30%以上的人類惡性腫瘤的上皮源性腫瘤都普遍過量表達HER2，可見，Her2基因的過表達可能同腫瘤的發(fā)生發(fā)展直接相關。

乳腺癌與胃癌患者在臨床上都表現(xiàn)出組織學與TNM分期的相關差異，比如乳腺上皮細胞的可塑性產(chǎn)生了各種各樣的細胞亞型，同時在為癌組織的侵襲處，Survivin、Bcl-2在細胞核高表達，而在中央癌巢區(qū)域Survivin、Bcl-2的核表達降低。這種表達模式使得癌組織中新克隆細胞的形態(tài)與那些原位癌巢中未發(fā)生轉移的癌細胞有相似的組織學特性[18,19]。本文Her2表達與乳腺癌與胃癌患者的年齡、病理類型無關，與TNM分期與淋巴結轉移有明顯相關性(P<0.05)。TNM分歧越晚，Her2表達水平越高(P<0.05)。癌組織中Her2表達同腫瘤淋巴結轉移正相關，具備統(tǒng)計學意義(P<0.05)，可見，Her2同腫瘤細胞增殖或轉移直接相關，表明乳腺癌與胃癌中Her2的高表達可增強腫瘤的細胞的遷移能力。有研究通過分析認為過表達Her2可觸發(fā)多種轉移機制，進而提高腫瘤細胞轉移能力，過表達HER2可調(diào)節(jié)上皮細胞鈣黏蛋白等黏附因子的表達，進而提高腫瘤細胞轉移能力[20]。本文相關性研究顯示乳腺癌與胃癌中的HER2表達都與Survivin、Bcl-2表達存在明顯正向相關(P<0.05)，提示其可能通過調(diào)控Survivin及Bcl-2的表達，進而參與乳腺癌與胃癌凋亡通路的調(diào)控，影響乳腺癌與胃癌的發(fā)生進展及轉移等過程。

總之，乳腺癌和胃癌患者Her2都呈現(xiàn)高病理表達狀況，與TNM分期與淋巴結轉移有明顯相關性，能通過調(diào)節(jié)部分凋亡抑制蛋白，參與腫瘤的發(fā)病與轉移過程。

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[收稿2015-09-20修回2015-12-25]

(編輯許四平)

Clinical significance of Her2 pathological expression in breast and gastric cancer patients

YAN Zhen-Yu，MAI Chun-Yang,GAO Peng,SU Bo,WANG Shi-Xuan.

Nanyang Central Hospital of He′nan Province,Nanyang 473009,China

[Abstract]Objective:To investigate the clinical significance of Her2 pathological expression in the breast and gastric cancer patients for providing a reference for cancer prevention.Methods: Selected surgical resection specimens of 60 diagnosed in advanced gastric cancer and 60 diagnosed with advanced breast cancer from March 2009 to May 2014 in our hospital,all specimens were given the Her2 pathological expression of immunohistochemical analysis and investigation the clinical and pathological data.Results: The Her2 positive expression rates in the breast cancer and gastric cancer specimens were 40.0% and 36.7%,respectively that compared to no significant difference (P> 0.05).The Her2 expression was not related to the cancer patient′s age,histological type,and there were significantly correlated to the TNM stage and lymph node metastasis (P<0.05).Spearman correlation analysis showed that Her2 expression in the breast cancer and gastric cancer were significant positive correlation to the Survivin,Bcl-2 expression (P<0.05).Conclusion: Breast cancer and gastric cancer patients have shown high pathological expression of Her2,and are related to the TNM stage and lymph node metastasis,it may be through inhibited the apoptosis regulating proteins involved in the pathogenesis and metastasis of tumors.

[Key words]Breast cancer；Stomach cancer;Her2;Pathological features

doi:10.3969/j.issn.1000-484X.2016.06.019

通訊作者②,E-mail：maicy0418@163.com。

作者簡介：閆振宇(1971年-)，男，主治醫(yī)師，主要從事臨床病理診斷研究，E-mail：yanzy0418@163.com。

中圖分類號R737.9R735.2

文獻標志碼A

文章編號1000-484X(2016)06-0858-05

①本文為湖北省衛(wèi)生廳科研基金重點項目(No：JX3A10)--乳腺癌淋巴管特異性分子標志物篩選及淋巴道轉移早期診斷。

③華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院，武漢430030。