余志強(qiáng)，王新華，周勇軍，易　斌

(1.益陽(yáng)市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南益陽(yáng) 413000；2中南大學(xué)湘雅醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南長(zhǎng)沙 410008)

·臨床研究·

膝骨性關(guān)節(jié)炎患者血清相關(guān)標(biāo)志物水平變化及其臨床意義

余志強(qiáng)1，王新華1，周勇軍1，易斌2△

(1.益陽(yáng)市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南益陽(yáng) 413000；2中南大學(xué)湘雅醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南長(zhǎng)沙 410008)

摘要:目的探討血清白細(xì)胞介素-1(IL-1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-α)水平在膝骨性關(guān)節(jié)炎患者中的變化及臨床意義。方法應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)90例膝骨性關(guān)節(jié)炎患者血清IL-1、IL-6和TNF-α水平，并以90例健康體檢者作對(duì)照。結(jié)果膝骨性關(guān)節(jié)炎患者血清中IL-1、IL-6和TNF-α水平均高于對(duì)照組，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；隨著病變程度加重，血清中IL-1、IL-6和TNF-α水平顯著升高(P<0.05)；相關(guān)性分析表明，IL-1、IL-6水平與TNF-α水平呈正相關(guān)(r=0.671，0.625；P<0.05)，IL-1與IL-6呈正相關(guān)(r=0.748，P<0.05)。結(jié)論血清IL-1、IL-6和TNF-α水平與膝骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，反映了膝骨性關(guān)節(jié)炎病情輕重及關(guān)節(jié)損傷程度，對(duì)病情和預(yù)后判斷有重要價(jià)值。

關(guān)鍵詞:膝骨性關(guān)節(jié)炎；白細(xì)胞介素-1；白細(xì)胞介素-6；腫瘤壞死因子

膝骨性關(guān)節(jié)炎(KOA)是一種以慢性進(jìn)行性骨關(guān)節(jié)退行性變?yōu)橹饕±硖卣鞯囊活惣膊?，關(guān)節(jié)軟骨退變是KOA病理變化的關(guān)鍵，其確切病因及發(fā)病機(jī)制目前尚不甚清楚。越來越多的研究表明，炎癥在KOA發(fā)病機(jī)制中可能起重要作用，細(xì)胞因子通過影響軟骨基質(zhì)分解與合成代謝的平衡參與KOA的形成及進(jìn)展，其中白細(xì)胞介素-1(IL-1)及其受體拮抗蛋白(IL-1 Ra)家族成員起著關(guān)鍵性作用，有望成為治療的新靶點(diǎn)[1]。白細(xì)胞介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-α)是關(guān)節(jié)炎病理過程中促進(jìn)軟骨基質(zhì)降解和關(guān)節(jié)軟骨破壞的重要炎癥細(xì)胞因子，可刺激破骨細(xì)胞分化和生長(zhǎng)，也可以提高破骨細(xì)胞活性，其表達(dá)與活性增強(qiáng)和骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制存在著密切的關(guān)系[2]。本研究同時(shí)測(cè)定健康人及KOA患者血清中的IL-1、IL-6和TNF-α的水平，探討其與膝骨關(guān)節(jié)炎的病變嚴(yán)重程度的關(guān)系，以期闡明其在KOA發(fā)生中所起的作用。

1資料與方法

1.1一般資料收集2013年1月至2013年12月本院住院的各期KOA患者90例。其中男35例，女55例，年齡32～76歲，平均(54.9±13.1)歲，臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)參照1986年美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)所制定標(biāo)準(zhǔn)，排除炎癥、腫瘤、結(jié)締組織病、創(chuàng)傷及其他自身免疫性疾病。根據(jù)X線片Altman和Ahlback X線片分級(jí)法[3]及膝關(guān)節(jié)鏡診斷分為早、中、晚期三組：其中KOA早期組25例，膝關(guān)節(jié)X線片分級(jí)為1級(jí)，男10例，女15例，年齡34～72歲，平均(52.3±14.1)歲，病程為0.5～1年；KOA中期組37例，KOA患者膝關(guān)節(jié)X線片分級(jí)為2～3級(jí)，男15例，女22例，年齡36～75歲，平均(53.4±13.6)歲，病程為1～2年；KOA晚期組28例，KOA患者膝關(guān)節(jié)X線片分級(jí)為4級(jí)以上，男10例，女18例，年齡36～75歲，平均(62.1±12.8)歲，病程為2年以上。對(duì)照組90例，均為本院健康體檢者，無膝痛病史，X線片未見有膝關(guān)節(jié)病變，其中男40例，女60例；年齡28～76歲，平均(50.7±13.4)歲。在采集患者血清時(shí)記錄患者同期的臨床、實(shí)驗(yàn)室資料。

1.2方法所有研究對(duì)象均晨起空腹靜脈采血5 mL，3 000 r/min離心15 min，分離血清置-20 ℃保存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清IL-1、IL-6和TNF-α水平，試劑盒由上海森雄科技實(shí)業(yè)公司和深圳晶美公司提供，嚴(yán)格按說明書進(jìn)行測(cè)定。

2結(jié)果

2.1KOA組和對(duì)照組的血清IL-1、IL-6和TNF-α水平的比較與對(duì)照組比較，KOA患者血清中IL-1、IL-6和TNF-α水平均明顯升高，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1　　各組血清IL-1、IL-6和TNF-α水平的比較

*：P<0.05，與對(duì)照組比較。

2.2KOA患者不同嚴(yán)重程度各組血清IL-1、IL-6和TNF-α水平的比較比較不同嚴(yán)重程度的KOA患者血清IL-1、IL-6和TNF-α水平，結(jié)果顯示，隨著病情分期越高，血清IL-1、IL-6和TNF-α水平越高，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2　　KOA患者不同分期各組血清IL-1、IL-6和TNF-α

*：P<0.05，與KOA早期比較；▲：P<0.05，與KOA中期比較。

2.3KOA患者血清IL-1、IL-6和TNF-α水平相關(guān)性分析相關(guān)性分析結(jié)果表明，IL-1、IL-6水平與血清TNF-α水平呈顯著正相關(guān)(r=0.671，0.625；P<0.05)，IL-1與IL-6呈顯著正相關(guān)(r=0.748，P<0.01)。

3討論

目前已經(jīng)認(rèn)識(shí)到KOA的發(fā)生、發(fā)展與許多細(xì)胞因子密切相關(guān)，它們與脂源性炎癥介質(zhì)(如前列腺素、白三烯類化合物等)協(xié)同作用，共同加強(qiáng)軟骨細(xì)胞的分解代謝，引起軟骨細(xì)胞釋放的蛋白聚糖酶和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)等水解酶增加，從而導(dǎo)致軟骨組織損傷。因此，細(xì)胞因子水平測(cè)定有助于判斷KOA軟骨病變的程度、預(yù)后和療效，可能成為KOA早期診斷的有效輔助方法。但各種因子產(chǎn)生的量、激活的時(shí)間、受體的數(shù)量及各細(xì)胞因子之間的相互作用都有待于進(jìn)一步研究[4]。本研究旨在探討IL-1、IL-6和TNF-α等細(xì)胞因子在KOA患者的變化，以研究其在KOA發(fā)病機(jī)制中的作用，并為其治療提供科學(xué)理論依據(jù)。

本研究結(jié)果表明，KOA患者血清中IL-1、IL-6和TNF-α水平均高于對(duì)照組(P<0.05)；隨著病變程度加重，血清中IL-1、IL-6和TNF-α水平顯著增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示IL-1、IL-6和TNF-α可能參與KOA的炎癥過程，可能與KOA疾病嚴(yán)重程度有關(guān)，是反映病變程度的指標(biāo)，為通過檢測(cè)血清中IL-1、IL-6和TNF-α水平來輔助診斷KOA提供了一定的依據(jù)。武永利等[5]研究結(jié)果顯示，KOA患者血清IL-1和IL-6的水平明顯高于健康對(duì)照組，可以推測(cè)KOA患者的病情程度，說明IL-1和IL-6在KOA發(fā)病機(jī)制中起著一定作用。這與本研究結(jié)果一致。

IL-1被認(rèn)為是導(dǎo)致軟骨功能衰退最具影響力的細(xì)胞因子之一，對(duì)模型兔KOA的研究發(fā)現(xiàn)IL-1在關(guān)節(jié)腔內(nèi)保持高水平，說明IL-1是骨關(guān)節(jié)炎中起主要調(diào)控作用的炎性介質(zhì)，對(duì)KOA的發(fā)生具有促動(dòng)作用，同時(shí)對(duì)骨性關(guān)節(jié)炎引起的繼發(fā)病理過程也有一定的影響[6]。在體外研究證實(shí)動(dòng)物關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射重組的IL-1可以成功地誘發(fā)KOA，再現(xiàn)IL-1對(duì)關(guān)節(jié)軟骨的破壞作用，直接證明了IL-1在KOA致病機(jī)理中的重要作用[7]。由于IL-1在KOA致病機(jī)理中的重要作用，科學(xué)研究中可通過研制藥物抑制IL-1的炎性反應(yīng)，減輕滑膜炎癥，以緩解KOA的潛能，會(huì)是未來研究治療KOA有效藥物的一個(gè)方向。IL-6具有廣泛的生物學(xué)活性，可刺激軟骨和滑膜細(xì)胞產(chǎn)生前列腺素和膠原酶，導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨進(jìn)行性破壞，是介導(dǎo)軟骨破壞的重要因子。有研究表明IL-6主要通過兩方面作用于KOA患者，一方面可促進(jìn)淋巴細(xì)胞分泌免疫球蛋白，加重滑膜與關(guān)節(jié)的炎癥，另一方面還可協(xié)同IL-1抑制軟骨細(xì)胞合成蛋白聚糖，導(dǎo)致軟骨基質(zhì)缺失[8]。TNF-α 能促進(jìn)KOA和正常關(guān)節(jié)軟骨合成MMPS、前列腺素E2、NO，從而抑制膠原和蛋白多糖的合成，并促進(jìn)其降解，最終抑制軟骨細(xì)胞的生成，加速軟骨細(xì)胞凋亡，破壞節(jié)軟骨，從而在骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生過程中對(duì)關(guān)節(jié)軟骨起著重要的破壞作用[9]。相關(guān)性分析結(jié)果表明：IL-1、IL-6水平與TNF-α水平呈正相關(guān)(r=0.675，0.642；P<0.05)，IL-1與IL-6呈正相關(guān)(r=0.712，P<0.05)。TNF-α能誘導(dǎo)IL-1和IL-6等細(xì)胞因子的產(chǎn)生，能夠加重IL-1和IL-6對(duì)關(guān)節(jié)軟骨的破壞，TNF-α既協(xié)同IL-1的作用，又激活I(lǐng)L-6基因，誘導(dǎo)IL-6的生成，三者有著協(xié)同作用，能介導(dǎo)對(duì)關(guān)節(jié)組織的破壞，在KOA的發(fā)生發(fā)展中有可能起著決定性作用[10]。

綜上所述，KOA的炎性反應(yīng)是一個(gè)極為復(fù)雜的過程，IL-1、IL-6和TNF-α參與了KOA的發(fā)病過程，并且與病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.052

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)10-1417-03

(收稿日期：2016-01-07)