孫廣范，欒峰，顏友良，黃湘，尚雪中山市博愛(ài)醫(yī)院婦科，廣東中山　528400

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miR-34a在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床意義

孫廣范，欒峰，顏友良，黃湘，尚雪
中山市博愛(ài)醫(yī)院婦科，廣東中山528400

［摘要］目的分析miR-34a在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床意義，為臨床診斷及治療提供參考。方法隨機(jī)選取該院2010年3月—2014年12月期間診治的子宮內(nèi)膜癌患者50例進(jìn)行研究，分析miR-34a與子宮內(nèi)膜癌患者臨床分期及預(yù)后的相關(guān)性。以醫(yī)院同期子宮肌瘤切除子宮患者50例為對(duì)照組。結(jié)果正常子宮內(nèi)膜組織中miR-34a的陽(yáng)性率為92.0%，子宮內(nèi)膜癌組織miR-34a的陽(yáng)性率為26.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；隨著患者臨床分期的增加，miR-34a的表達(dá)逐步降低（P＜0.05），且miR-34a的表達(dá)與患者的預(yù)后呈明顯的正相關(guān)性。結(jié)論miR-34a對(duì)子宮內(nèi)膜癌臨床診斷具有重要的參考價(jià)值，且與患者臨床分期和預(yù)后呈明顯負(fù)相關(guān)性。

［關(guān)鍵詞］子宮內(nèi)膜癌；微小RNA；臨床分期；預(yù)后；相關(guān)性

［課題資助］中山市科技局項(xiàng)目（20132A010）。

子宮內(nèi)膜癌是目前臨床上最常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤，且其發(fā)病率和死亡率有逐年升高的趨勢(shì)［1-2］。子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生與多種因素密切相關(guān)，但是其確切的發(fā)病機(jī)制尚不明確，臨床上也無(wú)特效的治療方法。MicroRMA （miRNA）是長(zhǎng)度為19～25個(gè)核苷酸的內(nèi)源性非編碼小分子RNA，主要與靶基因的3'非翻譯區(qū)結(jié)合，調(diào)控基因的表達(dá)。miR-34a是細(xì)胞內(nèi)中最重要的miRNA之一，參與了細(xì)胞的增殖、分化、發(fā)育和凋亡過(guò)程，且與多種腫瘤的病理過(guò)程相關(guān)［3］。該研究隨機(jī)選取該院2010 年3月—2014年12月期間診治的50例子宮內(nèi)膜癌患者進(jìn)行研究，分析miR-34a在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床意義，為臨床診斷及治療提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取該院診治的子宮內(nèi)膜癌患者50例進(jìn)行研究。患者年齡31～49歲，平均（38.6±7.7）歲，病程6個(gè)月～1.5年。所有住院子宮內(nèi)膜癌患者均經(jīng)過(guò)病理學(xué)確認(rèn)。以醫(yī)院同期子宮肌瘤切除子宮患者50例為對(duì)照組。兩組患者在年齡平均（38.7±7.9）歲，一般臨床資料方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。研究經(jīng)過(guò)所有患者同意，并經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 miRNA的分離及擴(kuò)增

采用Trizol試劑提取樣本總RNA，并分離miRNA。采用熒光定量PCR法（mir Vana#8482，ABI）分析miR-34a在子宮內(nèi)膜癌及正常子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)。所有操作過(guò)程均按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 qRT-PCR及miR-34a表達(dá)水平計(jì)算

qRT-PCR的反應(yīng)體系為20 μL，程序?yàn)?5℃-3 min，62℃35 s，共38個(gè)循環(huán)。以U6為內(nèi)參，計(jì)算miR-34a的表達(dá)：DCt=Ct-miR34a—Ct-U6。以正常子宮內(nèi)膜組織miR-34a表達(dá)量為1，子宮內(nèi)膜癌組織表達(dá)量為2-△△Ct子宮內(nèi)膜癌組織/2-△△Ct正常子宮內(nèi)膜組織。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件完成，計(jì)量資料用單因素方差分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差±s）表示，計(jì)數(shù)資料進(jìn)行X2檢驗(yàn)，采用百分比表示。

2 結(jié)果

2.1 miR-34a在子宮內(nèi)膜癌及正常子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)

結(jié)果顯示50例正常子宮內(nèi)膜組織中miR-34a的陽(yáng)性表達(dá)患者為46例，陽(yáng)性率為92.0%，50例子宮內(nèi)膜癌組織miR-34a的陽(yáng)性表達(dá)患者為13例，陽(yáng)性率為26.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=33.71，P＜0.05）。qPCR結(jié)果顯示正常子宮內(nèi)膜組織中miR-34a的表達(dá)為子宮內(nèi)膜癌組織的7.223倍，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=12.36，P＜0.05）。

2.2 miR-34a表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床分期的相關(guān)性分析

研究顯示子宮內(nèi)膜癌I/II期和III/IV期患者miR-34a的表達(dá)分別為（6.332±1.021）和（2.368±0.774），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=22.34，P＜0.05）；發(fā)生轉(zhuǎn)移和未發(fā)生轉(zhuǎn)移患者miR-34a的表達(dá)分別為（4.234±1.558）和（6.387± 1.236），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=22.34，P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 miR-34a表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床分期分析（±s）

表1 miR-34a表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床分期分析（±s）

臨床分期是否發(fā)生轉(zhuǎn)移組別子宮內(nèi)膜癌I/II期（n=30）子宮內(nèi)膜癌III/IV期（n=20）發(fā)生轉(zhuǎn)移（n=26）未發(fā)生轉(zhuǎn)移（n=24）6.332±1.021 2.368±0.774 4.234±1.558 6.387±1.236 ＜0.05 ＜0.05 miR-34a表達(dá)　P值

2.3 miR-34a表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后分析

研究發(fā)現(xiàn)miR-34a的表達(dá)與患者的預(yù)后呈明顯的正相關(guān)性：隨著miR-34a表達(dá)的升高，患者的死亡率越低，預(yù)后越好，見(jiàn)圖1。

圖1 miR-34a表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后分析

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是臨床上最常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，給患者和家庭帶來(lái)沉重的經(jīng)濟(jì)和心理負(fù)擔(dān)。子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生與多種因素相關(guān)，但是其確切的發(fā)病機(jī)制尚不清楚。miRNA是一類內(nèi)源性非編碼的RNA，參與了多種病理學(xué)過(guò)程，且與多種惡性腫瘤的臨床分期及預(yù)后密切相關(guān)。該研究在分析miR-34a在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床意義時(shí)發(fā)現(xiàn)正常子宮內(nèi)膜組織中miR-34a的陽(yáng)性率為92.0%，子宮內(nèi)膜癌組織miR-34a的陽(yáng)性率為26.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；隨著患者臨床分期的增加，miR-34a的表達(dá)逐步降低，因此，miR-34a對(duì)子宮內(nèi)膜癌臨床診斷具有重要的參考價(jià)值。

以往的研究發(fā)現(xiàn)微小RNA與腫瘤腫瘤的病理及生理性過(guò)程密切相關(guān)［4-5］。以往的研究發(fā)現(xiàn)miR-143和miR-145在宮頸癌組織中異常表達(dá)，且與患者的臨床分期及預(yù)后密切相關(guān)［6］。在分析miRNA-221和miRNA-222在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及臨床意義的研究中也發(fā)現(xiàn)二者與肝癌的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，且與肝癌細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移具有明顯的相關(guān)性［7］。胡小苗等［8］研究也發(fā)現(xiàn)大腸癌組織中miRNA-21表達(dá)水平及患者的預(yù)后密切相關(guān)，miRNA-21表達(dá)越高患者預(yù)后效果越佳，miRNA高表達(dá)與生存期下降密切相關(guān)（HR=2.416，95% Cl：1.314～4.445，P=0.005），而miRNA低表達(dá)的患者其生存期顯著上升（HR=2.100 000，95%Cl：1.157～3.813，P=0.015），且miRNA-21可作為藥物治療的潛在靶點(diǎn)。該研究也顯示子宮內(nèi)膜癌I/II期和III/IV期患者miR-34a的表達(dá)分別為（6.332±1.021）和（2.368±0.774），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；發(fā)生轉(zhuǎn)移和未發(fā)生轉(zhuǎn)移患者miR-34a的表達(dá)分別為（4.234±1.558）和（6.387±1.236），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，同時(shí)，miR-34a的表達(dá)與患者的預(yù)后呈明顯的正相關(guān)性：隨著miR-34a表達(dá)的升高，患者的死亡率越低，預(yù)后越好。

綜上所述，miR-34a對(duì)子宮內(nèi)膜癌臨床診斷具有重要的參考價(jià)值，且與患者臨床分期和預(yù)后呈明顯負(fù)相關(guān)性。在以后的研究中我們將采取體外模型進(jìn)一步分析相關(guān)的分子通路的參與機(jī)制，并進(jìn)一步研究miR-34a在其他婦科腫瘤中的臨床價(jià)值，為臨床診斷和治療提供參考。

［參考文獻(xiàn)］

［1］李飄飄，包珊.子宮內(nèi)膜癌中miRNA與自噬的研究進(jìn)展［J］.海南醫(yī)學(xué)，2014，33（21）：3201-3203.

［2］杜曉琴，張勇.子宮內(nèi)膜癌腫瘤標(biāo)記物的進(jìn)展［J］.中國(guó)藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)，2014，6（2）：433-434.

［3］孫默萱，王洪江.血清miRNA的表達(dá)與腫瘤診斷的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)醫(yī)學(xué)前沿雜志：電子版，2012，4（5）：72-75.

［4］單保恩，劉麗華. MicroRNA：癌癥診治新靶點(diǎn)［J］.中國(guó)腫瘤生物治療雜志，2014，11（6）：603-609.

［5］夏海濱，李星. miRNA在腫瘤發(fā)生、診斷及治療中的研究進(jìn)展［J］.陜西師范大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2013，41（5）：63-67.

［6］鄧凱賢，柳曉春，鄭玉華，等. miR-143和miR-145在宮頸癌組織中的異常表達(dá)及臨床意義［J］.婦產(chǎn)與遺傳：電子版，2014，4（4）：12-17.

［7］龐新亞，高峰，權(quán)勝偉. miRNA-221和miRNA-222在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及臨床意義［J］.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2014，15 （12）：2912-2915.

［8］胡小苗，李明忠.大腸癌組織中miRNA-21表達(dá)水平及其與預(yù)后的研究［J］.中國(guó)普通外科雜志，2014，19（12）：1717-1720.

Expression and Clinical Significance of miR-34a in the Endometrial Carcinoma

SUN Guang-fan，LUAN Feng，YAN You-liang，HUANG Xiang
Department of Gynaecology，Zhongshan Bo-Ai Hospital，Zhongshan，Guangdong Province，528400 China

［Abstract］Objective To analyze the expression and clinical significance of miR-34a in the endometrial carcinoma and provide reference for the clinical diagnosis and treatment. Methods50 cases of patients with endometrial carcinoma diagnosed and treated in our hospital from March 2010 to December 2014 were selected for research，the correlation between miR-34a and clinical stages and prognosis of patients with endometrial carcinoma was analyzed，and 50 cases of patients with uterine fibroid whose uteruses were removed in our hospital at the same period were selected as the control group. Results The positive rate of miR-34a was 92.0%in the normal uterus tissue and 26.0%in the endometrium carcinoma，and the difference had statistical significance（P＜0.05），with the increase of the clinical stage of patients，the expression of miR-34a gradually decreased（P＜0.05），and the expression of miR-34a had an obvious correlation with the prognosis of the patients. Conclusion MiR-34a is of important reference value to the clinical diagnosis of endometrial carcinoma，and it has an obvious negative correlation with the clinical stages and prognosis of the patients.

［Key words］Endometrial carcinoma；MicroRNA；Clinical stage；Prognosis；Correlation

［中圖分類號(hào)］R735.3

［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］A

［文章編號(hào)］1674-0742（2016）04（a）-0049-03

［作者簡(jiǎn)介］孫廣范，女，吉林人，本科，副主任醫(yī)師，主要從事婦科方面研究。

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.10.049

收稿日期：（2015-07-05）