喜 杰，辛 穎*，特日格樂(lè)

（內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000）

蒙醫(yī)“協(xié)日病”動(dòng)物模型與血清ALT、AST相關(guān)性研究

喜 杰，辛 穎*，特日格樂(lè)

（內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000）

目的 初步建立符合蒙醫(yī)協(xié)日病理論的動(dòng)物模型并探討其與血清ALT、AST指標(biāo)的關(guān)系。方法 取SD大鼠72只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組1、模型組2?？瞻讓?duì)照組灌胃蒸餾水、模型組1灌胃白酒、模型組2灌胃葵花油，分3個(gè)不同階段灌胃既分為7天、14天、21天，觀察灌胃不同時(shí)間段實(shí)驗(yàn)大鼠的一般狀況、體重、ALT、AST指標(biāo)的變化。結(jié)果 造模第14天模型組1和模型組2大鼠血清ALT、AST指標(biāo)與空白對(duì)照組大鼠血清ALT、AST指標(biāo)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 給大鼠灌胃白酒和灌胃葵花油均在第14天時(shí)血清ALT、AST指標(biāo)出現(xiàn)明顯升高，說(shuō)明通過(guò)白酒和葵花油造模第14天為模型建立的最佳時(shí)間。

蒙醫(yī)；協(xié)日??；病癥結(jié)合；動(dòng)物模型；ALT；AST

蒙醫(yī)學(xué)作為祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的一種，其防病治病的療效贏得了長(zhǎng)久而廣泛的認(rèn)可。然而，目前蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論的研究相對(duì)于蒙醫(yī)臨床和蒙藥學(xué)的研究滯后，不能完全體現(xiàn)它的主導(dǎo)作用。在基礎(chǔ)研究領(lǐng)域，相對(duì)于其他醫(yī)學(xué)的發(fā)展，蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論研究范圍都沒(méi)能很好的施展，反而漸漸的縮攏，觀點(diǎn)和內(nèi)涵清晰，表達(dá)確切的科學(xué)研究依據(jù)尚未確立。蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論的研究不能主要放在理論層面的探討上，應(yīng)借鑒遵循自然科學(xué)尤其是生命科學(xué)理論發(fā)展的途徑。協(xié)日病是蒙醫(yī)“六基癥”中的一種，也是常見(jiàn)病的一種。協(xié)日病是指當(dāng)人體中協(xié)日受到體內(nèi)外各種因素的不良影響出現(xiàn)偏盛、偏衰或功能紊亂等反常狀態(tài)，從而導(dǎo)致病變。蒙醫(yī)理論認(rèn)為過(guò)量食用熱性、辣、酸、咸味及油膩等不易消化食物會(huì)引起體內(nèi)協(xié)日偏盛失去平衡而發(fā)病，主 要 侵 犯身體 中 血 液 、 肝膽等[1]。血 液 中 丙 氨酸轉(zhuǎn)氨 酶（ALT）和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）的檢測(cè)是臨床常用的肝臟功能檢查，如果肝臟受損或破壞，肝細(xì)胞中的轉(zhuǎn)氨酶便進(jìn)入血液，血液中ALT和AST水平升高。本研究利用蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論中致協(xié)日偏盛熱性食緣既食用白酒、葵花油等，初步建立符合蒙醫(yī)協(xié)日病病癥的動(dòng)物模型，并探討協(xié)日病病癥的動(dòng)物模型與血清ALT、AST指標(biāo)變化的關(guān)系。

1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料

1.1 主要儀器與設(shè)備

生化檢測(cè)儀、體重計(jì)量?jī)x、電子數(shù)字式溫度計(jì)，電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）。

1.2 動(dòng)物

SD大鼠72只（SPF級(jí)，購(gòu)自遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司），雌雄各半，規(guī)格180～220 g。

1.3 試劑與藥品

38℃白酒，葵花籽油，蒸餾水，ALT試劑盒，AST試劑盒。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 造模實(shí)驗(yàn)

（1）動(dòng)物分組：實(shí)驗(yàn)前大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3天，自由飲水，進(jìn)食，于第四天大鼠稱(chēng)重，測(cè)肛溫，之后隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組1、模型組2等，每組24只，雌雄各半。

（2）造模方法：分組后于每天下午6點(diǎn)灌胃，劑量1 ml/100（g·d），空白對(duì)照組灌胃蒸餾水、模型組1灌胃白酒、模型組2灌胃葵花籽油，每組于造模第7天、第14天、第21天分別觀測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。

1.4.2 觀察與檢測(cè)

每天中午11點(diǎn)至12點(diǎn)之間，觀察并記錄大鼠睡眠狀況，饑渴狀態(tài)，食欲，大便和小便情況。每3天記錄大鼠體重及肛溫（中午測(cè)肛溫），尿是否黃，屎尿是否味重。各組大鼠施加因素的第7天、第14天、第21天分別取8只大鼠，雌雄各半，腹主動(dòng)脈取血，放入電熱恒溫水浴箱中，離心機(jī)離心后取上層透明血清，采用肝功能檢測(cè)分析儀測(cè)定。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以“±s”表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用x2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 一般狀態(tài)

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有出現(xiàn)死亡大鼠，在造模后的第1～5天，各組大鼠一般狀態(tài)無(wú)明顯變化，造模第7天開(kāi)始白酒組和葵花油組大鼠飲水量增多，不給飲水時(shí)小便顏色與正常組比較偏黃。造模第14天開(kāi)始白酒組和葵花油組大鼠飲食、飲水和大便、小便與空白對(duì)照組比較都有明顯差異（見(jiàn)表1）。而造模第21天時(shí)，白酒組和葵花油組大鼠食量和飲水量均無(wú)變化（見(jiàn)表1）。

2.2 各組不同時(shí)間段體重與體溫檢測(cè)結(jié)果

通過(guò)對(duì)各組大鼠體溫檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，不同時(shí)間段各組大鼠體溫均為正常37～39℃，而體重雖然隨著時(shí)間增長(zhǎng)，但是各組之間沒(méi)有顯著差異，而且發(fā)現(xiàn)第14天后體重增長(zhǎng)緩慢或降低。（見(jiàn)圖1）

2.3 各組不同時(shí)間段血清ALT和AST值檢測(cè)結(jié)果

造模第7天，葵花油組ALT和AST值與空白對(duì)照組比較有顯著差異，而白酒組無(wú)顯著差異；造模第14天時(shí)，葵花油組和白酒組AST值與空白對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）葵花油組和白酒組ALT值與空白對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而造模第21天時(shí)，葵花油組和白酒組ALT和AST值與空白對(duì)照組比較無(wú)顯著差異。（見(jiàn)表2～4，圖2）

表1 各組大鼠一般狀態(tài)

圖1 各組大鼠不同時(shí)間段體重變化

表2 造模第7天各組大鼠ALT和AST值（±s）

表2 造模第7天各組大鼠ALT和AST值（±s）

注：與空白對(duì)照組比較*P＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù) AST ALT空白對(duì)照組 8 102.84±9.98 31.81±5.48白酒組 8 112.39±21.36 38.60±11.01葵花油組 8 128.27±13.94* 39.29±5.45*

表3 造模第14天各組大鼠ALT和AST值（±s）

表3 造模第14天各組大鼠ALT和AST值（±s）

注：與空白對(duì)照組比較**P＜0.05，△與正常組比較P＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù) AST ALT空白對(duì)照組 8 108.78±10.75 29.01±4.39白酒組 8 152.88±27.32** 36.47±8.56△葵花油組 8 153.78±27.53** 36.22±8.36△

表4 造模第21天各組大鼠ALT和AST值（±s）

表4 造模第21天各組大鼠ALT和AST值（±s）

注：與空白對(duì)照組比較△P＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù) AST ALT空白對(duì)照組 8 155.67±21.19 38.42±3.79白酒組 8 180.00±11.44△ 35.09±9.93葵花油組 8 168.64±22.13 44.55±7.19

圖2 各組不同時(shí)間段血清AST和ALT值比較

3 結(jié) 論

從各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果得出結(jié)論，灌胃白酒和葵花油對(duì)大鼠體重和體溫的影響不太明顯，與空白對(duì)照組比較無(wú)顯著差異。而隨著時(shí)間變化模型組大鼠血清AST和ALT指標(biāo)會(huì)有明顯變化，特別是在造模第14天時(shí)均有顯著差異。這說(shuō)明，造模第14天是本方法造模的最佳時(shí)間。而到第21天時(shí)，各項(xiàng)指標(biāo)又無(wú)顯著差異，說(shuō)明大鼠本身具有適應(yīng)性，因而本方法造模第14天是模型成功的最佳時(shí)間點(diǎn)。

采用白酒和葵花油灌胃建立的蒙醫(yī)協(xié)日病動(dòng)物模型，其造模方法符合協(xié)日病病因、病機(jī)理論，造模方法可靠[2]。協(xié)日病是指當(dāng)人體中協(xié)日受到體內(nèi)外各種因素的不良影響出現(xiàn)偏盛、偏衰或功能紊亂等反常狀態(tài)，從而導(dǎo)致病變。蒙醫(yī)理論認(rèn)為過(guò)量食用熱性、酸、咸味及油膩等不易消化食物會(huì)引起體內(nèi)協(xié)日偏盛失去平衡而發(fā)病，主要侵犯身體中血液、肝膽等[3]。而白酒和葵花油是引起協(xié)日偏盛的典型食物，所以選擇這兩種食物是合理可靠的。而選擇測(cè)量指標(biāo)也以血液中的AST和ALT指標(biāo)和一般癥狀為標(biāo)準(zhǔn)是符合協(xié)日病病理變化的[4]。

蒙醫(yī)學(xué)病癥結(jié)合動(dòng)物模型是蒙醫(yī)藥現(xiàn)代研究中特色所在，也是難點(diǎn)所在。建立符合蒙醫(yī)學(xué)病因病機(jī)理論，利用特定的致病的因素，在動(dòng)物身上復(fù)制出與人體疾病癥狀和病理改變相同或相似的癥狀，為進(jìn)一步藥理研究以及其它科研的開(kāi)展均會(huì)起到?jīng)Q定性作用[5]。然而，目前蒙醫(yī)動(dòng)物模型研究還剛剛萌芽階段，因此，我們?cè)诿舍t(yī)基礎(chǔ)理論研究方面應(yīng)該根據(jù)蒙醫(yī)學(xué)的發(fā)展規(guī)律及特點(diǎn)，適應(yīng)現(xiàn)代社會(huì)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展的需求，進(jìn)行現(xiàn)代化研究是勢(shì)在必行的[6]。

[1] 巴 ·吉 格 木 德 .蒙 醫(yī) 基 礎(chǔ) 理 論 [M].內(nèi) 蒙 古 教 育 出 版 社 ,赤峰:1988,7:79.

[2] 蒙醫(yī)學(xué)編輯委員會(huì).中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書(shū)(蒙醫(yī)學(xué))[M].上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,上海,1992，12:16.

[3] 蘇榮扎布.蒙醫(yī)內(nèi)科學(xué)[M].內(nèi)蒙古教育出版社,赤峰:1988,7:62.

[4] 王秀蘭.蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論實(shí)驗(yàn)研究必要性和方法學(xué)探討[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志,2005,9(5):5-6.

[5] 巴圖德力根,高玉峰,韓志強(qiáng),等.腹腔感染法復(fù)制蒙醫(yī)“粘疫”病熱證動(dòng)物模型及其應(yīng)用的研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2009,36(2):305-306.

[6] 孫 健,鄭瀟瀟,張 浩,等.中醫(yī)動(dòng)物模型研制方法研究進(jìn)展[J].中獸醫(yī)學(xué)雜志,2010,04:54-55.

本文編輯：李 豆

R281.4

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ISSN.2095-6681.2016.33.134.02

內(nèi)蒙古民族大學(xué)科學(xué)研究項(xiàng)目《基于蒙醫(yī)理論的協(xié)日病動(dòng)物模型的建立與評(píng)價(jià)》（NMD1333）

辛穎，博士