張 靜，周子嬌

1. 唐山市人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河北 唐山063001； 2. 唐山市豐南區(qū)中醫(yī)院內(nèi)一科

替吉奧治療胃癌的臨床療效與外周血內(nèi)DPD mRNA和 TS mRNA表達水平的相關(guān)性

張 靜1，周子嬌2

1. 唐山市人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河北 唐山063001； 2. 唐山市豐南區(qū)中醫(yī)院內(nèi)一科

目的 分析替吉奧(S-1)治療胃癌的臨床療效與外周血內(nèi)二氫嘧啶脫氫酶(Dihydropyrimidine dehydrogenase, DPD)mRNA和胸苷酸合成酶(Thymidine synthetase, TS)mRNA表達水平的相關(guān)性。方法 選取唐山市人民醫(yī)院2013年3月-2014年3月接受含S-1方案治療的75例胃癌患者為研究對象，并進行前瞻性分析?；颊呋熐俺槿】崭轨o脈血7 ml，并檢測其DPD mRNA、TS mRNA表達水平。結(jié)果 Lauren分型為腸型患者的DPD mRNA高表達率高于彌漫型患者；有遠處轉(zhuǎn)移患者的TS mRNA高表達率高于無遠處轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。療效判定為進展(PD)的患者，DPD、TS mRNA表達水平高于部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)患者；PR患者外周血DPD、TS mRNA表達水平低于SD患者(P<0.05)。DPD mRNA、TS mRNA表達與臨床療效均呈負相關(guān)(r=-0.713,r=-0.735,P<0.05)。不同毒副作用分級患者外周血DPD mRNA與TS mRNA表達比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。外周血DPD mRNA及TS mRNA高表達患者OS低于低表達患者(P<0.05)。結(jié)論 根據(jù)患者外周血DPD mRNA和TS mRNA表達水平可早期評估患者預后及治療效果，為胃癌患者生存質(zhì)量的改善奠定基礎。

替吉奧；胃癌；療效；二氫嘧啶脫氫酶；胸苷酸合成酶；相關(guān)性

早期診斷與及時實施根治性切除手術(shù)是保證胃癌患者生存質(zhì)量的關(guān)鍵，但目前60%～80%的胃癌患者確診時已進入進展期或轉(zhuǎn)移期，失去了手術(shù)治療的機會，僅能接受姑息性化療[1]。替吉奧(S-1)是一種新型口服氟尿嘧啶類復方制劑，較傳統(tǒng)胃癌化療藥物5-氟尿嘧啶(5-Fu)而言，該藥療效更佳且毒副作用更小，在胃癌的臨床治療中得到了一定范圍的應用。但多數(shù)研究均發(fā)現(xiàn)，相同病理分型、臨床分期及治療方案的患者，其療效與生存質(zhì)量存在顯著性差異，因此，明確這一差異的根源是指導個體化治療、提高治療效果的關(guān)鍵[2]。二氫嘧啶脫氫酶(Dihydropyrimidine dehydrogenase, DPD)和胸苷酸合成酶(Thymidine synthetase, TS)是5-Fu代謝過程中的關(guān)鍵酶，近年來在胃癌化療治療敏感性分析中得到了廣泛關(guān)注[3]。本研究對75例胃癌患者外周血內(nèi)DPD mRNA和TS mRNA表達水平進行了檢測，分析其對S-1治療效果的影響。

1 資料與方法

1.1 病例資料 收集唐山市人民醫(yī)院2013年3月-2014年3月接受含S-1治療方案的75例胃癌患者為研究對象，進行前瞻性分析。其中男49例，女26例，年齡42～79歲，平均年齡(59.71±8.37)歲。本研究經(jīng)唐山市人民醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準，患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 選取標準及排除標準 選取標準：(1)經(jīng)組織學檢查或細胞學檢查確診復發(fā)或轉(zhuǎn)移性胃癌，無手術(shù)指征[4]。(2)年齡18～80歲，自愿接受S-1方案化療。(3)體力狀況Karnofsky評分(KPS評分)≥70分，預期生存期≥3個月。(4)無抗腫瘤治療史或距離上次化療>6個月、距離上次放療>3個月。(5)腫瘤可測量病灶≥1個。排除標準：(1)入院白細胞(WBC)<4×109/L、中性粒細胞絕對數(shù)(ANC)<1.5×109/L、血紅蛋白<100 g/L或血小板(PLT)<100×109/L。(2)血清膽紅素高于正常上限。(3)若未合并肝轉(zhuǎn)移，血清轉(zhuǎn)氨酶>正常上限2.5倍，若合并肝轉(zhuǎn)移，血清轉(zhuǎn)氨酶>正常上限5倍。(4)尿素氮>正常上限1.25倍。(5)合并其他化療禁忌證。

1.3 研究方法

1.3.1 治療方案：患者均在常規(guī)止吐、保肝、水化、抑酸、止瀉、預防過敏、營養(yǎng)支持、抗貧血、保護免疫功能等治療的基礎上加用S-1方案化療，化療方案[5]：S-1(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，國藥準字H20113281，規(guī)格20 mg×42 粒)口服治療，2次/d，每日總劑量80 mg/m2，d1～d14，21 d為1個周期；順鉑(齊魯制藥有限公司，國藥準字H37021358，規(guī)格10 mg)靜脈滴注，劑量75 mg/m2，d1，21 d為1個周期。每2個周期實施療效評價1次，根據(jù)療效評定結(jié)果調(diào)整治療方案。

1.3.2 觀察指標：(1)療效評價[6]：參照實體瘤療效評價標準(RECIST v1.1)對患者治療2個周期后的臨床療效進行評價：部分緩解(PR)：病灶長徑之和較治療前減少≥30%；進展(PD)：病灶長徑之和較治療前增加≥20%或出現(xiàn)新病灶；穩(wěn)定(SD)：病灶長徑較治療前減少<30%或增加<20%。(2)毒副作用觀察：依據(jù)抗癌藥物常見毒副作用分級標準對患者治療期間毒副作用進行觀察[7]，包括WBC減少、PLT減少、血紅蛋白下降、惡心嘔吐、腹瀉、口腔黏膜炎等，毒副作用分級0～Ⅲ級，分級越高毒副作用越嚴重。(3)外周血DPD mRNA和TS mRNA表達水平檢測：抽取患者化療前空腹肘靜脈血7 ml，置于二鈉EDTA抗凝管中，抽提mRNA統(tǒng)一保存于-80 ℃冰箱中待測。使用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)檢測mRNA，應用Quantity One軟件(美國Bio-rad公司)對mRNA相對表達量進行分析[8]。以DPD mRNA>2.53、TS mRNA>0.636為高表達[9]，比較不同臨床病理特征、不同臨床療效、不同毒副反應分級患者外周血DPD mRNA和TS mRNA表達水平，并分析其與患者臨床療效的相關(guān)性。(4)生存狀況分析：采用電話隨訪、門診隨診等形式，對患者進行為期2年的隨訪，對其生存情況進行觀察，總生存期(OS)定義為自患者入組時至全因死亡時間，應用Kaplan-Meier法繪制生存曲線，比較不同DPD mRNA、TS mRNA表達水平患者化療后生存曲線的區(qū)別。

2 結(jié)果

2.1 臨床病理特征Lauren分型為腸型患者，DPDmRNA高表達率顯著高于彌漫型，有遠處轉(zhuǎn)移患者，其TSmRNA高表達率顯著高于無遠處轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05，見表1)。

表1 不同臨床病理特征患者外周血DPD mRNA和TS mRNA表達比較[例數(shù)(%)]

Tab 1 Comparison of DPD mRNA and TS mRNA expressions in peripheral blood of patients with different clinical pathological characteristics [n(%)]

病理特征 例數(shù)DPDmRNA高表達χ2值P值TSmRNA高表達χ2值P值性別 男4919(38．78)0．245>0．0526(53．06)0．407>0．05 女269(34．62)15(57．70)年齡(歲) <604215(35．71)0．771>0．0525(59．52)0．359>0．05 ≥603313(39．39)16(48．48)腫瘤直徑(cm) <53413(38．24)0．369>0．0518(52．94)0．441>0．05 ≥54115(36．59)10(24．39)浸潤 T2114(36．36)0．582>0．056(54．55)0．187>0．05 T34011(27．50)19(47．50) T42413(54．17)16(66．67)Lauren分型 腸型3920(51．28)6．970<0．0525(64．10)0．260>0．05 彌漫型368(22．22)16(44．44)遠處轉(zhuǎn)移 無199(47．37)0．532>0．055(26．32)9．417<0．05 有5619(33．93)36(64．29)分化程度 高92(22．22)0．455>0．056(66．67)0．335>0．05 中226(27．27)11(50．00) 低4420(45．45)24(54．55)

2.2 臨床療效 PD患者的DPD mRNA和TS mRNA表達水平顯著高于PR、SD患者，PR患者外周血DPD mRNA和TS mRNA表達水平顯著低于SD患者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05，見表2)。DPD mRNA及TS mRNA表達與臨床療效均呈顯著負相關(guān)(r=-0.713,r=-0.735,P<0.05)。

2.3 毒副作用 不同毒副作用分級患者外周血DPD mRNA和TS mRNA表達比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05，見表3)。

分組例數(shù)DPDmRNATSmRNAPR組281．17±0．250．34±0．09SD組251．97±0．46?0．63±0．15?PD組224．39±0．74?#0．96±0．20?#F值6．9535．874P值>0．05>0．05

注：與PR比較，*P<0.05；與SD比較，#P<0.05。

毒副作用DPDmRNAP值TSmRNAP值WBC減少 0級2．13±0．84>0．050．69±0．11>0．05 Ⅰ級2．15±0．710．68±0．15 Ⅱ級2．19±0．650．71±0．23 Ⅲ級2．16±0．530．70±0．21PLT減少 0級2．20±0．47>0．050．68±0．14>0．05 Ⅰ級2．18±0．390．73±0．12 Ⅱ級2．19±0．480．70±0．13 Ⅲ級2．16±0．440．71±0．10

續(xù)表3

毒副作用DPDmRNAP值TSmRNAP值血紅蛋白下降 0級2．25±0．63>0．050．69±0．15>0．05 Ⅰ級2．22±0．430．65±0．17 Ⅱ級2．17±0．910．71±0．23 Ⅲ級2．16±0．580．68±0．11惡心嘔吐 0級2．09±0．94>0．050．70±0．14>0．05 Ⅰ級2．21±0．540．65±0．23 Ⅱ級2．13±0．650．68±0．15腹瀉 0級2．14±0．71>0．050．68±0．13>0．05 Ⅰ級2．15±0．820．69±0．14 Ⅱ級2．19±0．950．69±0．15口腔黏膜炎 0級2．30±0．85>0．050．70±0．12>0．05 Ⅰ級2．26±0．410．66±0．17 Ⅱ級2．17±0．340．64±0．18

2.4 隨訪結(jié)果 外周血DPD mRNA和TS mRNA高表達患者平均OS分別為(5.67±0.72)個月、(7.86±0.80)個月，低于低表達患者的(8.07±0.88)個月、(13.33±0.73)個月，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05，見圖1)。

圖1 不同TS mRNA與DPD mRNA表達患者生存曲線

3 討論

早期胃癌患者臨床表現(xiàn)以惡心、嘔吐為主，就診率偏低，誤診、漏診率較高，患者出現(xiàn)體質(zhì)量減輕、疼痛癥狀時，病情往往已進展至中晚期，單純手術(shù)治療無法取得滿意的療效，選擇合適的化療方案控制腫瘤進展是為根治性手術(shù)奠定基礎、改善患者生存質(zhì)量的關(guān)鍵[10]。

5-Fu是胃癌化療的首選基礎藥物，但近年來多數(shù)研究均表明5-Fu的遠期安全性值得商榷，其對神經(jīng)系統(tǒng)的副作用可導致小腦萎縮，關(guān)于5-Fu引發(fā)致死性消化道反應、血液系統(tǒng)毒性反應的報道屢見不鮮[11]。作為一種復方制劑，S-1的組分包括替加氟、吉美嘧啶與奧替拉西鉀，其中替加氟是5-Fu的前體物質(zhì)，具有較高的生物利用度，可在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為5-Fu，其代謝產(chǎn)物5-Fu脫氧核苷酸(5-FuMP)具有較強的抗腫瘤作用；吉美嘧啶具有DPD拮抗功能，可抑制DPD對5-Fu的分解代謝作用，保證血漿及腫瘤組織中較高的5-Fu有效濃度，避免藥效受影響[12]；奧替拉西鉀可拮抗乳清酸磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶(ORPT)，降低消化道中5-Fu向5-FuMP的轉(zhuǎn)化功能，故可在一定程度上減輕S-1的消化道毒副反應風險。因此，較傳統(tǒng)化療藥物而言，S-1具有給藥方便、抗腫瘤作用強、消化道毒副作用小等優(yōu)勢，已有大量研究證實S-1在惡性腫瘤治療中發(fā)揮的可靠療效[13]。

但在S-1的臨床實際應用中，多數(shù)學者均發(fā)現(xiàn)，相同腫瘤類型、臨床分期、病理類型患者在接受相同方案化療后，其臨床療效與生存質(zhì)量往往存在較大差異，而部分臨床分期、病理類型存在差異的患者，其臨床療效可能相似[14]。明確這一現(xiàn)狀的發(fā)生機制，是提高化療治療水平、指導個體化化療的關(guān)鍵。本研究結(jié)果示，隨著患者臨床療效的提高，其外周血DPD mRNA和TS mRNA表達水平均呈下降趨勢，說明DPD、TS高表達可能預示著患者預后不良，同時，本研究Lauren分型為腸型患者，其DPD mRNA高表達率顯著高于彌漫型，有遠處轉(zhuǎn)移患者，其TS mRNA高表達率顯著高于無遠處轉(zhuǎn)移者，也印證了上述結(jié)論。TS被認為是5-Fu及其衍生物治療惡性腫瘤的靶目標，故TS表達水平的升高表明患者腫瘤組織侵襲性上升，對5-Fu藥物的敏感性下降，甚至出現(xiàn)繼發(fā)性耐藥[15]。DPD是嘧啶類分解代謝的起始和限速酶，其活性在肝臟中最高，而5-Fu進入體內(nèi)后，約80%在肝臟組織中分解代謝，故DPD表達水平可直接影響5-Fu進入合成代謝和產(chǎn)生5-FuMP的量，過往研究證實，DPD高表達可增加5-Fu分解，在腫瘤耐藥現(xiàn)象的發(fā)生中扮演重要角色[16]。在毒副作用、生存時間的比較中，可以發(fā)現(xiàn)，外周血內(nèi)DPD mRNA和TS mRNA表達水平較高的患者，其OS顯著降低，也說明兩種酶在患者治療效果及預后的改變中發(fā)揮著重要作用，但不會影響患者不良反應發(fā)生風險。

綜上所述，DPD mRNA和TS mRNA表達水平較低的胃癌患者更易從S-1治療中獲益，生存時間更長。但關(guān)于DPD和TS影響患者預后的具體機制仍有待進一步探討，從而為胃癌等惡性腫瘤的個體化治療提供指導，為患者預后的改善奠定基礎。

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(責任編輯：李 健)

The correlation of clinical efficacy of S-1 in treating gastric cancer with the expressions of DPD mRNA and TS mRNA in peripheral blood

ZHANG Jing1, ZHOU Zijiao2

1. Department of Oncology, People’s Hospital of Tangshan City, Tangshan 063001; 2. Department of NO.1 Internal Medicine, Hospital of Traditional Chinese Medicine in Fengnan District of Tangshan City, China

Objective To analyze the correlation of clinical efficacy S-1 in treating gastric cancer with the expressions of Dihydrogen Dihydropyrimidine dehydrogenase (PD) mRNA and Thymidine synthase (TS) mRNA in peripheral blood.Methods Seventy-five patients with gastric cancer who were treated with S-1 in People’s Hospital of Tangshan City from Mar.2013 to Mar.2014 were selected and analyzed prospectively.7 ml of fasting venous blood before chemotherapy was collected and the DPD mRNA and TS mRNA expression levels were detected.Results The high expression rate of DPD mRNA was higher than that of diffuse type, there was a higher expression rate of mRNA TS in the patients with distant metastasis than those without distant metastasis, and the difference was statistically significant (P<0.05). The DPD mRNA and TS mRNA expression levels of patients with progressive disease (PD) were significantly higher than those in partial remission (PR), stable (SD) patients. The serum DPD mRNA and TS mRNA expression levels in PR patients were significantly lower than those in SD patients, the difference was statistically significant (P<0.05). The DPD mRNA and TS mRNA expressions were negatively correlated with clinical efficacy (r=-0.713,r=-0.735,P< 0.05). There was no significant difference in the expressions of DPD mRNA and TS mRNA in peripheral blood of patients with different toxic and side effects (P>0.05). The DPD mRNA and TS mRNA patients with high expression of peripheral blood OS were significantly lower than those with low expression, and the difference was statistically significant (P<0.05).Conclusion According to the peripheral blood DPD mRNA and TS mRNA expression levels of early assessment of prognosis and therapeutic effect, for the improvement of quality of life in patients with gastric cancer lay the foundation.

S-1; Gastric cancer; Curative effect; Two hydrogen-induced dehydrogenase; Thymidine synthase; Correlation

張靜，副主任醫(yī)師，研究方向：腫瘤放化療。E-mail：sdwxm7758@163.com

10.3969/j.issn.1006-5709.2016.11.011

R735.2

A

1006-5709(2016)11-1248-05

2016-04-21