海米提?阿布都力木李 艷郭 瓊榮小靈李 甜阿地力江?伊明

1. 新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院組胚教研室（烏魯木齊 830011）；

2. 新疆醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科；3. 新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)研室

·論 著·

OrexinA、OrexinB和 AMH受體在性腺軸的分布及其生殖生物學(xué)意義的研究

海米提?阿布都力木1李 艷1郭 瓊1榮小靈2李 甜1阿地力江?伊明3*

1. 新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院組胚教研室（烏魯木齊 830011）；

2. 新疆醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科；3. 新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)研室

目的研究食欲素受體1（OX1R）、食欲素受體2（OX2R）、抗中腎旁管激素受體Ⅱ（AMHR2）在下丘腦-垂體-睪丸軸中分布與細(xì)胞定位，探討其對(duì)生精功能的調(diào)節(jié)機(jī)制。方法用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)OX1R，OX2R和AMHR2受體在性未成熟和性成熟SD大鼠的下丘腦、垂體、睪丸表達(dá)情況。結(jié)果性未成熟組：OX1R，OX2R和AMHR2受體在下丘腦室周帶、內(nèi)側(cè)帶、外側(cè)帶神經(jīng)元細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜表達(dá)陽(yáng)性，在腺垂體少數(shù)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)陽(yáng)性，在睪丸只有間質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞膜及細(xì)胞質(zhì)表達(dá)陽(yáng)性。性成熟組：OX1R、OX2R和AMHR2受體在下丘腦室周帶、內(nèi)側(cè)帶、外側(cè)帶神經(jīng)元細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜表達(dá)陽(yáng)性，在腺垂體少數(shù)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)陽(yáng)性，在睪丸間質(zhì)細(xì)胞和精原細(xì)胞細(xì)胞膜及細(xì)胞質(zhì)表達(dá)陽(yáng)性。結(jié)論OX1R、OX2R和AMHR2受體在性成熟與未成熟的大鼠下丘腦、腦垂體表述無(wú)差異，在睪丸分布上具有不同，上述3種受體可能參與性腺軸調(diào)節(jié)精原細(xì)胞分化功能。

食欲素受體; 中腎旁管激素受體; 大鼠, Sprague-Dawley; 萊迪希細(xì)胞; 精原細(xì)胞

1998 年美國(guó)德克薩斯大學(xué)Sakurai 等在探索控制進(jìn)食新藥的試驗(yàn)中,在大鼠下丘腦腹外側(cè)核內(nèi)發(fā)現(xiàn)2種與食欲有關(guān)的神經(jīng)肽，分別為食欲素A（Orexin A，OXA ）和食欲素B（Orexin B，OXB）[1]，亦稱為食欲肽和增食欲素。Orexin的主要作用表現(xiàn)在刺激動(dòng)物采食、能量代謝、內(nèi)分泌調(diào)節(jié)和睡眠-覺(jué)醒循環(huán)等方面，近年來(lái)，有研究表明Orexin除上述生理功能外，對(duì)下丘腦-垂體-性腺軸（HPG）可能具有一定的調(diào)節(jié)作用，但具體機(jī)制不詳。故本研究對(duì)OX1R，OX2R和AMHR2受體在下丘腦-垂體-睪丸中分布與細(xì)胞定位進(jìn)行了研究，并就其對(duì)睪丸生精功能可能的調(diào)節(jié)機(jī)制進(jìn)行了探討，現(xiàn)具體報(bào)道如下。

材料與方法

一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組

正常清潔級(jí)雄性（SD）大鼠40只，其中性成熟組（75~90d）20只，性未成熟組（30d）20只，兩組體質(zhì)量分別為230~450g和100~150g，由新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

二、主要儀器與試劑

切片機(jī)（Leica RM2245），一抗訂購(gòu)于Abcom公司多克隆抗體（兔抗OX1R ab68718、兔抗OX2R ab104701、鼠抗Anti-AMHR2 antibody [MIG7] ab64762）；二抗等試劑訂購(gòu)于MaixinBio公司（即用型快速免疫組化MaxVisionTM試劑盒、PBS磷酸鹽緩沖液、檸檬酸抗原修復(fù)液、DAB顯色液），其他基礎(chǔ)試劑購(gòu)自于MaixinBio公司。

三、試驗(yàn)方法

（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物準(zhǔn)備

將性成熟和未成熟兩組SD雄性大鼠各20只，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，飼養(yǎng)環(huán)境溫度為（23±3）℃，濕度為（50+5）%，照明晝夜比12h : 12h ，自由進(jìn)水進(jìn)食。

（二）取材與包埋

1周后，大鼠腹腔注射10%水合氯醛（0.5mL/100g體質(zhì)量）麻醉下實(shí)施心臟4%多聚甲醛固定，并取出腦、垂體和睪丸組織，進(jìn)行固定與石蠟包埋。

（三）觀察指標(biāo)與方法

腦、垂體與睪丸用石蠟切片機(jī)連續(xù)切片，切片厚度腦為10μm，垂體與睪丸為4μm。行HE常規(guī)染色，MaxVision免疫組織化學(xué)法檢測(cè)OX1R，OX2R和AMHR2等指標(biāo)，光鏡下觀察并攝片，其中棕黃色為陽(yáng)性染色。

結(jié) 果

一、各組大鼠下丘腦、垂體和睪丸HE切片觀察結(jié)果

通過(guò)石蠟包埋組織切片HE染色，觀察發(fā)現(xiàn)性未成熟和性成熟大鼠下丘腦室周帶，穹窿內(nèi)側(cè)為內(nèi)側(cè)帶，穹窿外側(cè)是外側(cè)帶均有神經(jīng)元分布，兩組腺垂體內(nèi)分布有嗜酸性、嗜堿性及嫌色細(xì)胞，但是性未成熟組睪丸里有間質(zhì)細(xì)胞、生精小管里僅有支持細(xì)胞和精原細(xì)胞，性成熟組睪丸里有間質(zhì)細(xì)胞、生精小管里除有支持細(xì)胞外，還有精原細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞、精子細(xì)胞、精子等，見(jiàn)圖1、圖2。

圖1 性未成熟SD大鼠下丘腦、腺垂體、睪丸正常組織H-E染色

圖2 性成熟SD大鼠下丘腦、腺垂體、睪丸正常組織H-E染色

二、各組大鼠免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果

用MaxVision法在下丘腦、腦垂體和睪丸檢測(cè)了OX1R，OX2R和AMHR2；光鏡觀察結(jié)果發(fā)現(xiàn)OX1R, OX2R和AMHR2等3個(gè)受體在兩組大鼠下丘腦、腺垂體、睪丸中陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞、細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜呈棕黃色，這3種受體兩組中表達(dá)主要不同之處是在性成熟組睪丸間質(zhì)細(xì)胞和精原細(xì)胞均表達(dá)陽(yáng)性，而在性未成熟組僅僅在睪丸間質(zhì)細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)（圖3至圖8）。

1. 性未成熟SD大鼠下丘腦、垂體、睪丸中OX1R，OX2R和AMHR2的表達(dá)（圖3至圖5）。

2. 性成熟SD大鼠下丘腦、垂體、睪丸中OX1R，OX2R和AMHR2的表達(dá)（圖6至圖8）。

圖3 性未成熟大鼠下丘腦中OX1R, OX2R, AMHR2的表達(dá)

圖4 性未成熟大鼠垂體中OX1R, OX2R, AMHR2的表達(dá)

圖5 性未成熟大鼠睪丸組織中OX1R, OX2R, AMHR2的表達(dá)

圖6 性成熟大鼠下丘腦中OX1R, OX2R, AMHR2的表達(dá)

圖7 性成熟大鼠垂體中OX1R, OX2R, AMHR2的表達(dá)

圖8 性成熟大鼠睪丸組織中OX1R, OX2R, AMHR2的表達(dá)

討 論

OXA 和OXB來(lái)源于同一前體，人類 Orexins 前體（PPO）基因有1432個(gè)堿基對(duì)，有2個(gè)外顯子和1個(gè)內(nèi)含子[2]。人類PPO基因位于染色體17q21 位點(diǎn)，其氨基酸序列與大鼠的有83%的同源性，大鼠和小鼠則有95%的同源性[1]。已分離出的OXA為含有33個(gè)氨基酸的神經(jīng)肽，N端是焦谷氨酰殘基，C端酰氨化，4個(gè)半胱氨酸殘基形成兩套鏈內(nèi)的雙硫鍵。OXB為含有28個(gè)氨基酸的小肽，其中46 %（13/28）的氨基酸與OXA一致。人和小鼠、大鼠、豬、牛的OXA氨基酸序列完全相同，而人類OXB序列中僅有兩個(gè)氨基酸不同于嚙齒類，這提示了Orexins在生物進(jìn)化中的保守性[1]。

Orexins的受體分為OX1R、OX2R兩型，其基因定位于OX1R-1p33；OX2R-6cen（p11-Q11）。OX1R、OX2R均為具有7個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)區(qū)的G蛋白耦聯(lián)受體，均可被OXA、OXB所激活，其中OX2R與OXA、OXB兩種食欲素具有較強(qiáng)的親合力，屬OXA、OXB 的非選擇性受體，但OX1R則具有選擇性，其與OXA的親合力較OXB大100~1000倍[1]。其他相關(guān)研究顯示[3]，OX1R與OX2R的氨基酸序列同源性達(dá)64%明顯高于其他G蛋白耦聯(lián)受體，人類的OX1R、OX2R與大鼠的一致性分別達(dá)到94%和95%。提示OX1R 、OX2R與Orexins，在種系發(fā)育中具有高度保守性。

下丘腦75%~85%的促性腺激素釋放激素（Gonadotropin -Releasing Hormone，GnRH）神經(jīng)元與Orexin神經(jīng)元纖維接觸，OX可能直接作用于腦垂體性腺激素的釋放和OXR的表達(dá)；提示OX參與垂體調(diào)控性腺功能的過(guò)程[6]。進(jìn)一步的深入研究表明，OX1R、OX2R在GnRH神經(jīng)元有，其中OX1R與Orexin神經(jīng)纖維末端亦發(fā)生接觸[4]，且OXA能直接通過(guò)OX1R刺激GnRH神經(jīng)元GnRH轉(zhuǎn)錄并釋放神經(jīng)肽，提示OXA對(duì)GnRH的轉(zhuǎn)錄并釋放相關(guān)激素的調(diào)控作用可能發(fā)生于GnRH神經(jīng)元水平上[5]。

免疫組化方法研究顯示人睪丸組織中，間質(zhì)細(xì)胞、支持細(xì)胞OX1R和OX2R陽(yáng)性[7]。在羊駝睪丸間質(zhì)細(xì)胞上OX1R陽(yáng)性表達(dá)，體外培養(yǎng)睪丸組織檢測(cè)睪酮濃度發(fā)現(xiàn)，OXA可提高間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌水平，同時(shí)，支持細(xì)胞亦可產(chǎn)生OXA和AMH[8]，而體外培養(yǎng)大鼠睪丸組織研究中發(fā)現(xiàn)OX1R抑制劑可阻止OXA提高睪酮水平的作用，并由此推測(cè)OXA通過(guò)拮抗AMH，競(jìng)爭(zhēng)性的與OX1R結(jié)合，并通過(guò)激活該通路來(lái)調(diào)控哺乳動(dòng)物睪丸睪酮的水平[9]。

抗中腎旁管激素（AMH）又稱中腎旁管抑制物（MIS），是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子家族的成員，是男性性別分化的重要因子，相關(guān)研究表明[8]，OXA增加間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌，AMH抑制間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌，但OXA和MIS同時(shí)加在培養(yǎng)液里，AMH某種程度上抑制OXA增加睪酮作用，另外支持細(xì)胞產(chǎn)生OXA和AMH。研究離體培養(yǎng)性成熟的成年AMH缺陷鼠發(fā)現(xiàn)，間質(zhì)細(xì)胞欠分化，從而導(dǎo)致雄激素水平質(zhì)變，這有助于不育癥的發(fā)生[10]。

最近一些資料顯示，食欲素在下丘腦-腦垂體-睪丸軸不同層面對(duì)性腺有直接作用，食欲素在睪丸內(nèi)通過(guò)自分泌/旁分泌方式調(diào)節(jié)睪丸功能；食欲素這些新作用即調(diào)控雄性生殖腺軸作用，提示食欲素直接連接能量平衡和生殖功能[11]。

OX1R、OX2R在下丘腦表達(dá)主要作用表現(xiàn)在刺激動(dòng)物采食、能量代謝和內(nèi)分泌調(diào)節(jié)等作用，食欲素兩類受體mRNA在大鼠腦內(nèi)的分布不盡相同。OX1R的mRNA在丘腦服內(nèi)側(cè)核含量較高，而OX2R的mRNA在丘腦室旁核、小腦皮質(zhì)、斜方體核、頂蓋前核前端等處含量較高[12]。用免疫組化方法可觀察到OX1R、OX2R在大鼠下丘腦、丘腦、中腦和網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的多種核團(tuán)內(nèi)出現(xiàn)，尤其在下丘腦、丘腦等處[13,14]。本實(shí)驗(yàn)性未成熟、性成熟組SD雄鼠OX1R、OX2R在下丘腦外側(cè)帶神經(jīng)元細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜表達(dá)陽(yáng)性并含量較高。兩組SD雄鼠OX1R、OX2R在腺垂體少數(shù)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)陽(yáng)性， Blanco等研究人垂體OXR發(fā)現(xiàn)，OX1R分布于腺垂體嗜酸性細(xì)胞內(nèi)，其同時(shí)表達(dá)OX1R和GH。OX2R分布于垂體中間部和垂體前葉的嗜堿性細(xì)胞中，同時(shí)表達(dá)OX2R和ACTH[15]。但是本實(shí)驗(yàn)所使用的MaxVision染色法沒(méi)有能夠區(qū)分嗜酸性和嗜堿性細(xì)胞。兩組SD雄鼠OX1R、OX2R在睪丸的表達(dá)卻不同，性未成熟組OX1R、OX2R在睪丸只有間質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞膜及細(xì)胞質(zhì)表達(dá)陽(yáng)性；而性成熟組OX1R、OX2R在睪丸間質(zhì)細(xì)胞及精原細(xì)胞細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)均表達(dá)陽(yáng)性，這與Karteris等[7,8]結(jié)果顯示的睪丸組織中間質(zhì)細(xì)胞、支持細(xì)胞OX1R和OX2R陽(yáng)性有所不同，本實(shí)驗(yàn)性成熟組睪丸組織里除間質(zhì)細(xì)胞OX1R、OX2R均陽(yáng)性表達(dá)之外，精原細(xì)胞也表達(dá)陽(yáng)性。

AMH有兩個(gè)受體，分別為AMHR1和AMHR2[16]。AMH通過(guò)AMHR2調(diào)節(jié)間質(zhì)細(xì)胞分化[17]，出生后，AMH抑制未成熟大鼠的間質(zhì)細(xì)胞增殖和分化，且抑制成年大鼠間質(zhì)細(xì) 胞睪酮分泌[18]。AMHR2在未分化間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)，支持了出生后AMH直接調(diào)節(jié)大鼠睪丸的發(fā)育假說(shuō)[19]。

據(jù)文獻(xiàn)[20]腦組織里含有AMH、AMHR2，本實(shí)驗(yàn)兩組AMHR2在下丘腦外側(cè)帶神經(jīng)元細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜陽(yáng)性表達(dá)比較高，兩組AMHR2在腺垂體少數(shù)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)表達(dá)陽(yáng)性，尚未見(jiàn)報(bào)道。兩組SD雄鼠AMHR2在睪丸的表達(dá)卻不同，性未成熟組AMHR2在睪丸只有間質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞膜及細(xì)胞質(zhì)表達(dá)陽(yáng)性；而性成熟組AMHR2在睪丸間質(zhì)細(xì)胞及精原細(xì)胞均表達(dá)陽(yáng)性，這兩組中間質(zhì)細(xì)胞均陽(yáng)性表達(dá)，此結(jié)果中兩組間質(zhì)細(xì)胞均陽(yáng)性表達(dá)，與性未成熟、性成熟大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞AMHR2的陽(yáng)性表達(dá)報(bào)道相似[21]，性未成熟組與Wu等[17,19]結(jié)果顯示 的AMHR2在未分化間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)并AMH通過(guò)AMHR2調(diào)節(jié)間質(zhì)細(xì)胞分化相似，性成熟組與Ohyama實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似；Ohyama等研究發(fā)現(xiàn)性成熟大鼠睪丸里AMH 、AMHRⅡ在精母細(xì)胞表達(dá)陽(yáng)性[22]。

結(jié)論：兩組SD雄鼠OX1R、OX2R、AMHR2等3種受體確實(shí)分別分布于下丘腦、腦垂體和睪丸中，其中最明顯特點(diǎn)是3種受體在性未成熟組睪丸精原細(xì)胞呈現(xiàn)陰性，而在性成熟組精原細(xì)胞表達(dá)陽(yáng)性，故我們推測(cè)3種受體參與下丘腦-腦垂體-睪丸性腺軸調(diào)節(jié)精原細(xì)胞分化。

1 Sakurai T, Amamiya A, Ishii M, et al. Orexins and orexin receptors: a family of hypothalamic neuroptides and G protein coupled receptors that regulate feeding behavior. Cell 1998; 92(4): 573-585

2 Sakurai T, Moriguchi T, Furuya K, et al. Structure and function of human prepro-orexin gene. J Bio Chem 1991; 274(25): 17771-17776

3 Baringa M. New appetite-boosting peptides found. Science 1998; 279(5354): 1134

4 Campbell RE, Grove KL, Smith MS. Gonadotropinreleasing hormone neurons coexpress orexin 1 receptor immunoreactivity and receive direct contacts by orexin fbers. Endocrinology 144(4): 1542-1548

5 Sasson R, Dearth RK, White RS, et al. Orexin A Induces GnRH Expression and Secretion from GT1-7 Hypothalamic GnRH Neurons. Neuroendocrinology 2006; 84(6): 353-363

6 Cataldi NI, Lux Lantos VA, Libertun C. Orexin A and B in vitro modify orexins receptors expression and Gonadotropins secretion of anterior pituitary cells of proestrous rats. Regul Pept 2014; 188(6): 25-30

7 Karteris E, Chen J, Randeva HS. Expression of human prepro-orexin and signaling characteristics of orexin receptors in the male reproductive system. J Clin Endocrinol Metab 2004; 89(4): 1957-1962

8 Liguori G, Assisi L, Squillacioti C, et al. Presence, distribution and steroidogenic effect of the peptides orexin A and receptor 1 for orexins in the testis of the South American camelid Alpaca(Vicugna pacos). Gen Comp Endocrinol 2012; 179(1): 137-142

9 Assisi L, Tafuri S, Liguori G, et al. Expression and role of receptor 1 for orexins in seminiferous tubules of rat testis. Cell Tissue Res 2012; 348(2): 601-607

10 Wu X, Arumugam R, Baker SP, et al. Pubertal and adult leydig cell function in mullerian inhibiting substancedifcient mice. Endocrinology 2005; 146(2): 589-595

11 Nurmio M, Tena-Sempere M, Toppari J. Orexins and the regulation of the hypothalamic-pituitary-testicular axis. Acta Physiol(Oxf) 2010; 198(3): 349-354

12 Trivedi P, Yu H, MacNeil DJ. Distribution of orexin receptor mRNA in the rat brain. FEBS Lett 1998; 438(1-2): 71-75

13 Cluderay JE, Harrison DC, Hervieu GJ. Protein distribution of orexin-2 receptor in the rat central nervoussystem. Regul Pept 2002; 104(1-3): 131-144.

14 Hervieu GJ, Cluderay JE, Harrison DC. Gene expression and protein distribution of distribution of the orexin-1 receptor in the rat brain and spinal cord. Neuroscience 2001; 103(3): 777-797

15 Blanco M, Lopez M, Garcla-Caballero T, et al. Cellular localization of orexin receptors in human pituitary. J Clin Endocrinol Metab 2001; 86(7): 1616-1619

16 Josso N, di Clemente N, Gouédard L. Anti-Müllerian hormone and its receptors. Mol Cell Endocrinol 2001; 179(1-2): 25-32

17 Wu X, Zhang N, Lee MM. Müllerian inhibiting substance recruits ALK3 to regulate leydig cell differentiation. Endocrinology 2012; 153(10): 4929-4937

18 Sriraman V, Niu E, Matlas JR. Müllerian inhibiting substance inhibits testosterone synthesis in adult rats. J Androl 2001; 22(5): 750-758

19 Lee MM, Seah CC, Masiakos PT, et al. Müllerianinhibiting substance type Ⅱ receptor expression and function in purifed rat leydig cells. Endocrinology 2014; 140(6): 2819-2827

20 Lebeurrier N, Launay S, Macrez R, et al. Anti-Mullerianhormone-dependent regulation of the brain serine-protease inhibitor neuroserpin. J Cell Sci 2008; 121(Pt20): 3357-3365

21 Mendis-Handagama SM, Di Clementi N, Ariyaratne HB, et al. Detection of anti-Mullerian hormone receptor II protein in the postnatal rat testis from birth to sexual maturity. Histol Histopathol 2006; 21(5): 125-130

22 Ohyama K, Ohta M, Hosaka YZ, et al. Expression of anti-Müllerian hormone and its type II receptor in germ cells of maturing rat testis. Endocr J 2015; 62(11): 997-1006

（2016-10-08收稿）

Study on the distribution of orexin and anti-mullerian hormone receptors in the hypothalamic-pituitary-testicular axis and their reproductive biological significance

Haimiti.Abudulimu1, Li Yan1, Guo Qiong1, Rong Xiaoling2, Li Tian1, Adilijiang.Yiming3*
1. Department of Histology and Embryology, Urumqi 830011, China;
2. Clinical Laboratory of the Second Affliated Hospital, Xinjiang Medical University;
3. Department of Anatomy, Xinjiang Medical University

Adilijiang.Yiming, E-mail: adljym@163.com

ObjectiveTo study the distribution of orexin receptor 1 (OX1R), orexin receptor2 (OX2R), antimullerian hormone receptor Ⅱ (AMHRⅡ) in hypothalamus, pituitary and testis of immature and mature male SD rats.MethodsImmunohistochemical stain was applied to detect the expressions of OX1R, OX2R, and AMHRⅡReceptors in hypothalamus ,pituitary and testis of the both rats.ResultsOX1R, OX2R, and AMHRⅡ receptors positively expressed at the neuron cell membrane and cytoplasm of periventricular zone, medial zone and lateral zone of hypothalamus in the both rats; there was also some positive cells in adenohypophysis of the both; the distribution of three receptors was obviously differences in the testis ,there were positive expressions of three receptors at cytoplasm and cell membrane of leydig cells in testis of immature rats, but there were positive expression of three receptors at cytoplasm and cell membrane of leydig cells and also spermatogonium in testis of mature rats.ConclusionHigher expression of three receptors were found in the hypothalamus-Pituitary-Testistular axis of the rats, indicating that orexin and anti-mullerian hormones may be associated with spermatogonium differentiation of male reproductive system.

orexin receptor; anti-mullerian hormone receptor; Rats, Sprague-Dawley; leydig cells; Spermatogonia

10.3969/j.issn.1008-0848.2016.11.001

R 321.1

*通訊作者，E-mail: adljym@163.com