梁培日　龍登毅　張應(yīng)魏　朱福連　胡鴻煒　陳元椿　張　勇

(海南省干部療養(yǎng)院，海南　?？凇?71100)

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膽固醇酯逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因TaqI多態(tài)性對海南省漢族老年腦梗死患者分子預(yù)警的價(jià)值

梁培日龍登毅張應(yīng)魏朱福連胡鴻煒陳元椿張勇

(海南省干部療養(yǎng)院，海南?？?71100)

〔摘要〕目的探討膽固醇酯逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(CETP)基因TaqIB遺傳多態(tài)性與海南省漢族腦梗死的關(guān)聯(lián)性及對分子預(yù)警的價(jià)值。方法納入317例海南省漢族腦梗死患者及305例海南省漢族健康對照，利用Snapshot方法檢測CETP基因位點(diǎn)TaqIB多態(tài)性，利用SPSS21.0軟件分析基因型頻率及等位基因在組間的分布情況。結(jié)果TaqIB的B1B1、B1B2、B2B2三種基因型分布頻率在實(shí)驗(yàn)組中為55.21%、34.07%及10.73%，在對照組中為45.25%、39.67%及15.08%，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。等位基因A和G在實(shí)驗(yàn)組中的分布頻率為72.24%和27.76%， 對照組中的檢出率為65.08%和34.92%，組間差異亦具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論CETP基因TaqI多態(tài)性與海南省漢族腦梗死關(guān)聯(lián)性密切，有望成為腦梗死分子預(yù)警指標(biāo)。

〔關(guān)鍵詞〕膽固醇酯逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白；腦梗死；分子預(yù)警；單核苷酸多態(tài)性

膽固醇代謝對人體生理功能和病理變化尤其是疾病的發(fā)生及發(fā)展具有十分重要的理論和臨床意義〔1～3〕。膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)能力是機(jī)體維持膽固醇代謝平衡及血脂代謝正常的重要途徑。其轉(zhuǎn)運(yùn)過程主要通過肝臟合成并釋放高密度脂蛋白進(jìn)入血液，收集組織末端的膽固醇并與肝臟細(xì)胞上的受體結(jié)合進(jìn)入肝臟進(jìn)行轉(zhuǎn)化。膽固醇酯逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(CETP)是介導(dǎo)膽固醇酯和甘油三酯交換的重要蛋白分子，是疏水性糖蛋白，其編碼基因?yàn)閱慰截?，包?6個(gè)外顯子和15個(gè)內(nèi)含子〔4〕?；虻淖儺惪赡軐?dǎo)致蛋白質(zhì)的表達(dá)水平或者活性改變，單核苷酸多態(tài)性(SNP)是廣泛存在的基因突變現(xiàn)象，可導(dǎo)致蛋白表達(dá)或者結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，成為個(gè)體差異及疾病發(fā)生的分子基礎(chǔ)。關(guān)于CETP基因多態(tài)性與心血管疾病的關(guān)聯(lián)性研究在不同人群中有諸多報(bào)道〔5～7〕。本研究對TaqIB位點(diǎn)多態(tài)性與海南省中老年人群腦梗死的關(guān)聯(lián)性進(jìn)行研究，以評(píng)估該位點(diǎn)多態(tài)性對海南省腦梗死人群的分子預(yù)警價(jià)值。

1資料與方法

1.1一般資料實(shí)驗(yàn)組：317例均為2014年1月至2015年3月在我院治療的腦梗死患者，經(jīng)頭顱CT或者M(jìn)R確診為腦梗死，年齡57～78歲，患病前無高血壓、糖尿病等慢性疾病。對照組：本院體檢科體檢的305例健康人群，年齡55～80歲，排除高血壓、糖尿病等慢性疾病及其他器質(zhì)性疾病。

1.2基因分型方法利用北京天根生物科技有限公司的全血基因組DNA提取試劑盒提取基因組DNA并進(jìn)行質(zhì)量鑒定，鑒定合格的DNA標(biāo)本稀釋至1 μg/μl的濃度后寄送50 μl至武漢華大基因檢測公司，利用Snapshot法進(jìn)行基因分型，設(shè)置5%的重復(fù)樣本進(jìn)行質(zhì)量控制。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS11.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

對5%的重復(fù)樣本的吻合度進(jìn)行分析后確認(rèn)本次基因分型結(jié)果可靠性良好。如表1所示，TaqIB位點(diǎn)三種基因型B1B1、B1B2、B2B2在實(shí)驗(yàn)組中的檢出率與對照組比較差異顯著(P<0.05)。等位基因B1和B2在實(shí)驗(yàn)組中的檢出率與對照組比較差異亦具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

表1　TaqIB基因型及等位基因分布頻率的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析〔n(%)〕

3討論

腦梗死是一種致殘致死率較高的心血管疾病，疾病的發(fā)生使患者的生存質(zhì)量下降，給患者家庭帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。在防大于治的醫(yī)學(xué)理念下，對患者進(jìn)行評(píng)估并合理安排生活及工作，是有效預(yù)防腦梗死發(fā)生的前提。然而，由于腦梗死的發(fā)生機(jī)制復(fù)雜，評(píng)估的指標(biāo)很難確立。CETP基因在膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)中起著關(guān)鍵作用，我們試圖對該基因在海南人群中比較常見的位點(diǎn)與腦梗死的關(guān)聯(lián)性進(jìn)行研究，以期了解其在腦梗死預(yù)警體系中的價(jià)值。

本次研究結(jié)果表明，等位基因B1對腦梗死可能存在促進(jìn)作用,而B2則可能是保護(hù)性基因，該結(jié)論與江毅卿〔8〕對浙江腦梗死人群的研究結(jié)果相似。對海南省百歲老人的研究結(jié)果也表明，B2等位基因的存在更有利于人類逃避心血管疾病，進(jìn)而進(jìn)入長壽的生存狀態(tài)〔7〕。然而，F(xiàn)idani等〔9〕針對希臘人群進(jìn)行的研究中發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)的多態(tài)性在腦梗死人群和正常人群中的分布頻率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，李華翔〔10〕對湖南省漢族人群進(jìn)行的研究結(jié)果也表明CETP基因TaqIB位點(diǎn)多態(tài)性與腦梗死無關(guān)。以上不同人群研究結(jié)果的矛盾性，更進(jìn)一步說明不同人群中基因突變的復(fù)雜性。由于不同人群長期的生活習(xí)性及環(huán)境的不同，導(dǎo)致基因突變的方向存在差異。對于任何一個(gè)基因而言，都存在眾多的SNP位點(diǎn)；對于某一特定的人群，要進(jìn)行基因的檢測及對疾病預(yù)警體系的構(gòu)建，前提是要對該人群進(jìn)行基因組掃描研究，獲得該群體中大多數(shù)SNP位點(diǎn)的信息。

我們針對海南省人群的研究結(jié)果說明TaqIB位點(diǎn)的多態(tài)性與海南省腦梗死的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。而一個(gè)預(yù)警體系的構(gòu)建，還需要對該人群中該基因其他突變位點(diǎn)進(jìn)行深入的研究。

4參考文獻(xiàn)

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3張克蘭，張思仲，鄭克勤，等．卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶基因單核苷酸多態(tài)性與冠心病脂代謝易感性的關(guān)聯(lián)研究〔J〕.中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，2003;20(2)：135-7．

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9Fidani L,Hatzitolios AI,Goulas A,etal.Cholesterylester transfer protein TaqI B and lipoprotein lipase Ser447Ter gene polymorphisms are not associated with ischaemic stroke in Greek patients〔J〕.Nerosci Lett,2005;384(1-2):102-5.

10李華翔.CETP基因多態(tài)性與湖南漢族人腦梗死的相關(guān)性研究〔D〕.長沙：中南大學(xué)碩士論文，2011.

〔2015-12-03修回〕

(編輯徐杰)

基金項(xiàng)目：海南省自然科學(xué)基金(20158331)；海南省社會(huì)發(fā)展專項(xiàng)(201401)

〔中圖分類號(hào)〕R743

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)09-2134-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.09.038

第一作者：梁培日(1972-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事腦血管疾病及帕金森病等的臨床與科研工作。