葛陽春

（阿克蘇地區(qū)庫車縣獸醫(yī)站，新疆阿克蘇 842000）

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庫車縣雞禽流感抗體水平調(diào)查報告

葛陽春

（阿克蘇地區(qū)庫車縣獸醫(yī)站，新疆阿克蘇 842000）

［摘 要］為落實庫車縣雞禽流感疫病防控工作，評價雞禽流感免疫效果，對庫車縣13個鄉(xiāng)鎮(zhèn)、3個農(nóng)牧場的雞進行了隨機取樣，并分離血清，采用血凝抑制的方法對489份血清樣品進行檢測。結(jié)果顯示塔里木鄉(xiāng)和草湖農(nóng)場的抗體水平高，而二八臺抗體水平較低，此外阿拉哈格鎮(zhèn)、哈尼喀塔木鄉(xiāng)、阿克吾斯塘抗體合格率均低于70%，此結(jié)果為加強雞禽流感的預(yù)防和進一步補免提供了依據(jù)。

［關(guān)鍵詞］雞禽流感血清血凝抑制

禽流感病毒可通過消化道和呼吸道進入人體傳染給人，人類直接接觸受禽流感病毒感染的家禽及其糞便或直接接觸禽流感病毒也可以被感染。通過飛沫及接觸呼吸道分泌物也是傳播途徑。如果直接接觸帶有相當(dāng)數(shù)量病毒的物品，如家禽的糞便、羽毛、呼吸道分泌物、血液等，也可經(jīng)過眼結(jié)膜和破損皮膚引起感染［1］。

1　臨床癥狀

患雞精神沉郁，飼料消耗量減少，消瘦；雞的就巢性增強，產(chǎn)蛋量下降；輕度直至嚴(yán)重的呼吸道癥狀包括咳嗽、打噴嚏和大量流淚；頭部和臉部水腫，神經(jīng)紊亂和腹瀉。上述癥狀可能單獨或組合形式出現(xiàn)，有時疾病暴發(fā)很迅速，在沒有明顯癥狀出現(xiàn)患雞死亡。

2　病理變化

禽流感的病理變化因感染毒株毒力的強弱、病程長短和禽種的不同而變化不一［2］。主要表現(xiàn)為頭腫，肉髯、冠出血，小腿和趾部皮下出血，腺胃乳頭出血及輸卵管炎等。

3　調(diào)查方法

本實驗通過對庫車縣13個鄉(xiāng)鎮(zhèn)、3個農(nóng)牧場的雞進行采血并分離血清進行抗體檢測，進而判斷在不同的鄉(xiāng)鎮(zhèn)雞禽流感抗體水平的高低，為進一步推進禽流感防控工作提供了一定的科學(xué)依據(jù)。

3.1儀器設(shè)備

微量振蕩器、移液槍（多道）、移液槍（單道）、槍頭、血凝版。

3.2試劑

禽流感病毒H5亞型HI試驗抗原（獸用）、1×PBS、阿氏液。

4　實驗室檢驗方法

4.11%紅細胞懸液的制備

采集至少3只SPF健康公雞的血液與等體積阿氏液混合，用1×PBS液洗滌3次，每次均以1800r/min離心10min，洗滌后用1×PBS液配成體積分?jǐn)?shù)為1%紅細胞懸液，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

4.2HI實驗步驟

（1）血凝板中第1～11孔加入25μLPBS，第十二孔加入50μLPBS；

（2）第1孔加入25μL待檢血清，在血凝板上將血清做橫向25μL的倍比稀釋至第10孔；

（3）第1～1 1孔均加入2 5 μ L的稀釋抗原，室溫下（20～25℃）靜置30min或2～8℃45～60min；

（4）每孔中加入25μL1%紅細胞懸液，使用微量振蕩器混勻后，室溫下（20～25℃）靜置30min或2～8℃45～60min，當(dāng)對照孔紅細胞呈顯著淚滴狀時判定結(jié)果。

5　結(jié)果

各鄉(xiāng)鎮(zhèn)血清經(jīng)過HI試驗檢測后，血清抗體合格率和免疫密度比較結(jié)果如下表所示。

由圖1可以看出塔里木鄉(xiāng)和草湖農(nóng)場的抗體水平高，抗體合格率和免疫密度均達到了100%，而二八臺抗體合格率為42.86%，免疫密度57.14%，抗體水平較低，此外阿拉哈格鎮(zhèn)、哈尼喀塔木鄉(xiāng)、阿克吾斯塘抗體合格率均低于70%，此結(jié)果為加強雞禽流感的預(yù)防和進一步補免提供了依據(jù)。

圖1　各鄉(xiāng)鎮(zhèn)血清抗體合格率和免疫密度比較

6　討論

6.1禽流感疫苗的選擇

在選擇禽流感疫苗時，最好要了解當(dāng)?shù)鼗虮緢鍪芮萘鞲型{的是哪一種亞型，然后選擇相同亞型的疫苗進行免疫接種［3］。在環(huán)境較復(fù)雜或不了解的情況下，可選擇H5+H9或其他必要亞型的二價或多價滅活疫苗，但是在實際應(yīng)用中，為了減少免疫接種的次數(shù)，適當(dāng)?shù)厥褂靡恍┒嗦?lián)疫苗還是可取的。但也不能太多聯(lián)，應(yīng)保證重點。原則上，禽流感疫苗最好單獨接種，因為它本身可能已是多價的疫苗，如再與其他疫苗組聯(lián)，可能會影響免疫效果。但對雛禽免疫接種，因接種量較小，可以考慮使用新城疫與禽流感H5+H9疫苗的聯(lián)苗；對較大日齡以后的其他時間的免疫接種，禽流感疫苗還是單獨接種為妥。

6.2禽流感接種時間和接種量

禽流感疫苗接種時間的安排與家禽飼養(yǎng)期長短有一定的關(guān)系。飼養(yǎng)期不超過7周的，由于接種疫苗后需要14～20d才能產(chǎn)生較好的保護作用，而雛禽由于免疫系統(tǒng)發(fā)育尚未成熟，接種疫苗誘導(dǎo)形成的保護作用較弱。因此，這些飼養(yǎng)期很短的家禽，接種疫苗的作用是有限的，如通過環(huán)境衛(wèi)生的控制可以不接種的則不一定要接種。但如確實需要，可在10日齡左右接種一次。對于飼養(yǎng)期較長的家禽，為使禽群內(nèi)的抗體水平較高和較均勻，在第一次免疫接種后，每隔2～3個月再接種一次較為合適。接種量方面，20日齡以內(nèi)雛雞接種量為成雞的50%左右，一般為0.25～0.3ml，往后每次接種0.5ml（指非濃縮抗原），成鵝接種量一般為雞的2～3倍，成鴨接種量一般為雞的2倍。

參考文獻

［1］ 林曦.家畜病理學(xué)［M］.中國農(nóng)業(yè)出版社，1979.

［2］ 陳伯倫.禽流感的研究—雞A型禽流感病毒的分離與血清學(xué)初步診斷［J］.中國獸醫(yī)雜志，1994，20（10）：3-5.

［3］ 何維明，高玉鵬，蔣艷芬等.禽流感流行病學(xué)調(diào)查及病原分離鑒定初報［J］.西北農(nóng)業(yè)學(xué)報，2001，10（3）：16-19.