覃彬

165 例新生兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果分析

覃彬

目的：了解我院新生兒溶血病（HDN）的嬰兒血型抗體分布頻率，探討HDN血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果與新生兒出生時(shí)間的關(guān)系。方法：對(duì)我院2015年165例臨床懷疑ABO血型不合引起的HDN標(biāo)本進(jìn)行溶血三項(xiàng)試驗(yàn)。結(jié)果：血清學(xué)診斷為新生兒溶血病標(biāo)本67例，占送檢標(biāo)本的40.6%（67/165），67例在檢出的HDN中抗體分布頻率分別為：抗-A抗體為46.3%（31/67），抗-B抗體為53.7%（36/67），出生后0-2d組檢出率為45.9%（62/135），出生后3-4d組檢出率為1.5%（2/135），出生后5-6d組檢出率為2.2%（3/135），出生后大于6d組檢出率為0.0%（0/135）。結(jié)論：我院ABO-HDN抗體分布特征為抗A抗體﹤抗B抗體。HDN在出生后0-2d檢出率最高，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)檢出率逐漸降低，6d以上患兒檢出率為0。

新生兒；溶血三項(xiàng)試驗(yàn)；分析

新生兒溶血?。╤emolytic disease newborn,HDN）是由于母嬰血型不合，母體產(chǎn)生與胎兒紅細(xì)胞血型抗原相應(yīng)的抗體，經(jīng)胎盤進(jìn)入胎兒血循環(huán)作用于胎兒（新生兒），引起的同種免疫性溶血，臨床表現(xiàn)為不同程度黃疸、貧血、水腫、肝脾腫大，嚴(yán)重者可有核黃疸，甚至死亡[1]?，F(xiàn)將我院2015年165例新生兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果分析如下:

1 資料與方法

1.1 資料

2015年在我院出生的母親血型為O型疑似為ABO-HDN的新生兒血樣165例,其中男93例,女72例,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)；A型血患兒76例，B型血患兒89例,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)；所有患兒均在出生后)2h-14d內(nèi)出現(xiàn)黃疸,所有患兒均有肉眼黃疸。血標(biāo)本用乙二胺四乙酸2鉀抗凝管采集，每管血量2-5毫升。

1.2 儀器和試劑

血型血清學(xué)專用離心機(jī)；博研TD-A離心機(jī)；奧森多半自動(dòng)孵育器，數(shù)顯電熱恒溫水浴箱；抗球蛋白卡，購(gòu)自長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限公司；ABO標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞，購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限公司。

1.3 方法

取患兒血標(biāo)本以3500r/min離心3min分離其血漿后進(jìn)行直抗試驗(yàn)、游離試驗(yàn)和放散試驗(yàn)。直抗試驗(yàn)：在1個(gè)抗球蛋白卡反應(yīng)孔中加入患兒1%紅細(xì)胞懸液50μl,后用博研TD-A離心機(jī)5分鐘后判定結(jié)果。游離試驗(yàn)：在3個(gè)抗球蛋白卡反應(yīng)孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)A,B,O紅細(xì)胞各50μl，再加入患兒血清50μl，置孵育器37℃孵育15min,后用博研TD-A離心機(jī)5分鐘后判定結(jié)果。放散試驗(yàn)：將四洗后的患兒壓積紅細(xì)胞1ml加入等量生理鹽水后置于試管中，放入56℃水浴震搖1min,加熱9min，取出后在3000r/min的離心機(jī)上離心1min取上清液；在抗球蛋白卡中分別加入標(biāo)準(zhǔn)A,B,O紅細(xì)胞各50μl+放散液50μl，置于孵育器中在37℃孵育15min，后用博研TD-A離心機(jī)5分鐘后判定結(jié)果，結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)如表Ⅰ。所有試驗(yàn)均依照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》操作進(jìn)行。

表1 新生兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果判定

2 結(jié)果

血清學(xué)診斷為新生兒溶血病標(biāo)本67例，67例在檢出的HDN中抗體分布頻率分別為：抗-A抗體為46.3%（31/67），抗-B抗體為53.7%（36/67），出生后0-2d組檢出率為45.9%（62/135），出生后3-4d組檢出率為13.3%（2/15），出生后5-6d組檢出率為50.0%（3/6），出生后大于6d組檢出率為0.0%（0/9），見表Ⅱ。

表2 67例新生兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)陽性結(jié)果血型分布情況

表3 67例新生兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)陽性結(jié)果年齡分布情況

3 討論

ABO新生兒溶血病是指由于母嬰血型不合，即母親為O型，嬰兒為A或者B型，母親體內(nèi)IgG類血型抗體通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，胎兒的紅細(xì)胞被母親的同種抗體所包圍，此抗體可以和胎兒紅細(xì)胞上內(nèi)源性的抗原相結(jié)合，最終導(dǎo)致紅細(xì)胞在分娩前后加速破壞造成胎兒發(fā)生溶血。

從表Ⅱ可以看出，本文分對(duì)165例新生兒進(jìn)行血清游離抗體試驗(yàn)、紅細(xì)胞抗體釋放試驗(yàn)、直接抗人球蛋白試驗(yàn)三項(xiàng)試驗(yàn),結(jié)果顯示,新生兒血型A、B兩組不同血型的新生兒血清學(xué)三項(xiàng)試驗(yàn)檢出陽性率比較無顯著差異；其中以紅細(xì)胞抗體釋放試驗(yàn)的陽性檢出率最高,其次是血清游離抗體試驗(yàn),明顯高直接抗人球蛋白試驗(yàn),提示由于母嬰血型不合引起新生兒發(fā)生ABO溶血的不同血型檢測(cè)結(jié)果間并無明顯的分布規(guī)律,以A型的新生兒發(fā)生率稍低于B型[2,3]。

從表Ⅲ可以看出，本次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)HDN的檢出率與患兒出生時(shí)間有很大關(guān)系，即患兒出生時(shí)間越短，檢測(cè)陽性率越高，以出生后0～2d組的檢測(cè)陽性率為最高。這是因?yàn)樵诎l(fā)病24h內(nèi)抽樣檢測(cè)，新生兒血液中還有較多的游離IgG血型抗體及致敏紅細(xì)胞存在。隨著發(fā)病時(shí)間的延長(zhǎng)，新生兒血液中只有少量的游離IgG血型抗體及致敏紅細(xì)胞存在，而大部分IgG血型抗體以抗原抗體復(fù)合物的形式存在，失去了反應(yīng)原性，導(dǎo)致檢出率降低[4]。

放散試驗(yàn)敏感度高、特異性強(qiáng)，是判定HDN的最有力的證據(jù)。本文檢測(cè)結(jié)果顯示，患兒游離試驗(yàn)，放散試驗(yàn)是早期診斷ABO-HDN的最有效方法[5]。直接抗人球蛋白試驗(yàn)可能由于致敏胎兒紅細(xì)胞的IgG抗體數(shù)量較少，特別在出生后較長(zhǎng)時(shí)間，而抗原抗體親和力弱，洗滌過程中抗體被洗脫（主要是ABO血型系統(tǒng)），使得反應(yīng)強(qiáng)度較弱。所以其檢出陽性率低于放散試驗(yàn)和游離試驗(yàn)。

以上分析顯示，溶血三項(xiàng)檢測(cè)在新生兒溶血病診斷中具有重要意義，其中以放散試驗(yàn)難度較大，實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意放散時(shí)的溫度、放散液的量、離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間等[6,7]。母嬰血型不合引起新生兒ABO溶血的血型分布無明顯規(guī)律性,因此,早期對(duì)母親血進(jìn)行ABO溶血的篩查有積極的意義,在血學(xué)清三項(xiàng)試驗(yàn)中,放散試驗(yàn)、直接抗人球蛋白試驗(yàn)應(yīng)用性較廣,出結(jié)果相對(duì)較快,操作簡(jiǎn)便,能夠?yàn)榕R床早期篩查并防治新生兒ABO溶血提供及時(shí)、可靠的依據(jù)。

（作者單位：柳州市工人醫(yī)院輸血科）

[1]張紅刪，李文益.新生兒溶血病的診斷和治療[J].中國(guó)小兒血液與腫瘤雜志，2009，14(6):246-248

[2]李燭,楊曉亞,李振奇,等.母嬰血型不合新生兒溶血病免疫血液學(xué)檢測(cè)進(jìn)展[J].華北國(guó)防醫(yī)藥,2010;22(3):240-243

[3]林蔚,戴偉良,肖平.105例新生兒ABO溶血病血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果分析[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生,2008;46(26):115-116

[4]詹影影.ABO血型系統(tǒng)診斷新生兒溶血病的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010,20(6):1421-1422

[5]黃瑞英.新生兒溶血病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐.2011,24（12）：1411-1414

[6]劉達(dá)莊.免疫血液學(xué)［M］.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社.2002.224-225

[7]安萬新.輸血技術(shù)學(xué)［M］.北京：北京科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社.2006.91-101

覃彬（1982～），男，壯族，2005年在柳州市工人醫(yī)院輸血科工作至今，主管技師，研究生班畢業(yè)，學(xué)士學(xué)位。