鄒劍鋒，沈其孝

(1. 湖北省陽(yáng)新縣第三人民醫(yī)院，湖北 陽(yáng)新 435200；2. 湖北省陽(yáng)新縣人民醫(yī)院，湖北 陽(yáng)新 435200)

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胃癌組織中CD147、S100P表達(dá)水平及臨床意義研究

鄒劍鋒1，沈其孝2

(1. 湖北省陽(yáng)新縣第三人民醫(yī)院，湖北 陽(yáng)新 435200；2. 湖北省陽(yáng)新縣人民醫(yī)院，湖北 陽(yáng)新 435200)

[摘要]目的探討胃癌組織中CD147、S100P的表達(dá)水平及臨床意義。方法通過(guò)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)40例胃癌組織、40例慢性胃炎組織和40例正常胃組織的CD147、S100P表達(dá)情況，并比較胃癌組織中不同臨床病理特征患者間CD147、S100P的表達(dá)水平。結(jié)果胃癌組織中S100P、CD147陽(yáng)性表達(dá)率分別為52%和85%，與正常胃組織、慢性胃炎組織比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)；胃癌組織中S100P、CD147陽(yáng)性表達(dá)均與TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、侵及漿膜密切相關(guān)(P均<0.05)；胃癌組織中CD147表達(dá)與S100P的表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)性(r=-0.713，P<0.05)。結(jié)論胃癌患者胃癌組織中S100P表達(dá)顯著降低，CD147表達(dá)顯著升高，其與胃癌TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有密切關(guān)系，且CD147表達(dá)與S100P的表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)，二者可能共同參與了胃癌的轉(zhuǎn)移與侵襲。

[關(guān)鍵詞]胃癌；CD147，S100P；表達(dá)水平

胃癌是對(duì)人群身心健康和生命威脅最大的一種惡性腫瘤，病死率及發(fā)病率呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢(shì)。迄今為止胃癌根治術(shù)是治療胃癌的有效手段，可顯著延長(zhǎng)患者的生存期，尤其是早期胃癌患者，可取得滿(mǎn)意的效果[1]。不過(guò)，由于胃癌起病隱匿，早期并無(wú)典型臨床癥狀，在臨床就診時(shí)僅有約10%患者處于早期，90%的患者為進(jìn)展期胃癌，導(dǎo)致大部分胃癌患者預(yù)后較差。因此，及早發(fā)現(xiàn)、及早治療胃癌有助于改善患者預(yù)后。臨床研究顯示，CD147、S100P均參與了癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、侵潤(rùn)等過(guò)程[2-4]。本研究分析了不同TNM分期胃癌組織中CD147、S100P的陽(yáng)性表達(dá)情況，旨在為臨床治療和診斷提供參考依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1臨床資料

1.1一般資料抽取陽(yáng)新縣第三人民醫(yī)院病理科2013年1月—2014年12月經(jīng)術(shù)后病理確診并存檔的胃癌組織標(biāo)本40例，排除取組織前進(jìn)行放療、化療或者激素治療以及病例資料不完整者。40例患者中男28例，女12例；年齡31～76(56.1±8.4)歲；TNM分期：Ⅰ期8例，Ⅱ期16例，Ⅲ期9例，Ⅴ期7例；低分化21例，中分化11例，高分化8例；發(fā)病部位：胃部胃癌14例，胃食管連接部胃癌26例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移19例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移21例。抽取同時(shí)期慢性胃炎組織標(biāo)本40例和正常胃組織標(biāo)本40例作為對(duì)照。其中胃炎患者中男26例，女14例；年齡29～69(54.1±10.4)歲。正?；颊吣?5例，女15例；年齡32～66(53.4±12.3)歲。3組性別、年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。

1.2方法

1.2.1試劑及檢測(cè)所有標(biāo)本經(jīng)10%中性緩沖福爾馬林固定24 h，經(jīng)石蠟包埋后行連續(xù)切片，厚度為3 μm，行免疫組化分析及HE染色。40例胃癌組織、40例慢性胃炎組織和40例正常胃組織均行常規(guī)HE染色和免疫組化分析。CD147蛋白一抗為鼠抗人CD147單抗S100P蛋白一抗為兔抗人S100P單抗，單抗及SP免疫組化試劑盒均購(gòu)自北京百晶生物技術(shù)有限公司。操作步驟嚴(yán)格按SP免疫組織化學(xué)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.2.2陽(yáng)性判斷將已知陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照，用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。每張切片隨機(jī)選取5個(gè)不同視野計(jì)數(shù)，并計(jì)算平均值，所得結(jié)果為染色結(jié)果。染色結(jié)果評(píng)分采取陽(yáng)性細(xì)胞百分比和染色強(qiáng)度評(píng)分計(jì)算。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞占切片內(nèi)正常細(xì)胞或者全部腫瘤細(xì)胞的比例，其中陽(yáng)性著色細(xì)胞數(shù)小于5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，大于50%為3分；細(xì)胞著色強(qiáng)度未著色為0分，中度著色為1分，高度著色為2分。染色結(jié)果評(píng)分分值為陽(yáng)性細(xì)胞百分比和染色強(qiáng)度評(píng)分的乘積，分值為0～6分，其中0～1分為陰性(-)，2～3分為弱陽(yáng)性(+)，3～4分為中等陽(yáng)性()，5～6分為強(qiáng)陽(yáng)性()。

1.3觀察指標(biāo)比較各組組織中CD147、S100P陽(yáng)性表達(dá)情況，并分析胃癌組織中不同病理特征的CD147、S100P陽(yáng)性表達(dá)情況。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以百分率(%)表示，組間比較采用方差分析；相關(guān)性分析采用Pearson等級(jí)相關(guān)分析。P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.13組CD147、S100P陽(yáng)性表達(dá)情況CD147主要集中在癌細(xì)胞胞質(zhì)及胞膜，呈區(qū)域性聚集分布，且有明顯異質(zhì)性，腫瘤浸潤(rùn)邊緣部位陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)相對(duì)較多，在間質(zhì)細(xì)胞、癌旁正常腺體中表達(dá)較少，見(jiàn)圖1；S100P主要集中在癌細(xì)胞胞漿中，在胞核、胞膜中表達(dá)較少，見(jiàn)圖2。其中，胃癌組織中S100P、CD147陽(yáng)性表達(dá)率分別為52%(21/40)和85%(34/40)，與正常胃組織、慢性胃炎組織比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)；正常胃組織、慢性胃炎組織S100P、CD147陽(yáng)性表達(dá)率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見(jiàn)表1。

2.2胃癌組織不同臨床病理特征CD147、S100P陽(yáng)性表達(dá)情況胃癌組織中S100P、CD147陽(yáng)性表達(dá)均與TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、侵及漿膜密切相關(guān)(P均<0.05)；均與性別、年齡、部位、組織學(xué)類(lèi)型無(wú)關(guān)(P均>0.05)。見(jiàn)表2。2.3胃癌組織中CD147、S100P表達(dá)相關(guān)性分析40例胃癌患者中34例CD147表達(dá)陽(yáng)性，其中15例S100P表達(dá)陽(yáng)性，19例表達(dá)陰性，Pearson等級(jí)相關(guān)性分析結(jié)果顯示，胃癌組織中CD147表達(dá)與S100P的表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)性(r=-0.713，P<0.05)。見(jiàn)表3。

圖1　CD147在胃癌中的陽(yáng)性表達(dá)(×400)

圖2　S100P在胃癌中的陽(yáng)性表達(dá)(×400)

組別nS100P-+CD147-+正常胃組織403①6161536①400慢性胃炎組織407①8141129①1010胃癌組織40191362651217

注：①與胃癌組織比較，P<0.05。

3討論

目前，以化療聯(lián)合根治性胃切除術(shù)的綜合治療方案治療胃癌取得了顯著效果，尤其是一些早期患者的預(yù)后得到明顯改善。但有臨床調(diào)查顯示，17%～51%的胃癌會(huì)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，6%～21%出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)[5]。復(fù)發(fā)患者大多出現(xiàn)在術(shù)后3年內(nèi)，少數(shù)患者術(shù)后復(fù)發(fā)會(huì)在5年之后。而且轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)患者的治療難度也增大，復(fù)發(fā)后患者1年內(nèi)生存率非常低。因此，探尋有效的分子生物學(xué)標(biāo)志物對(duì)胃癌的臨床治療及患者預(yù)后評(píng)估可提供有效參照，從而改善患者預(yù)后。

有報(bào)道稱(chēng)，S100P蛋白能夠與S100P結(jié)合蛋白、糖基化終末產(chǎn)物、埃茲蛋白、鈣周期結(jié)合蛋白等靶蛋白相結(jié)合，然后參與了癌細(xì)胞信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程，在癌細(xì)胞增殖、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等進(jìn)展過(guò)程中起到了重要促進(jìn)作用[6-7]。Joghetaei等[8]通過(guò)cDNA微陣列技術(shù)檢測(cè)胃癌組織中的基因表達(dá)譜，結(jié)果顯示S100P在胃癌中沒(méi)有表達(dá)。本研究顯示，胃癌組織中S100P陽(yáng)性表達(dá)率為52%，表明在胃癌中S100P表達(dá)呈明顯下調(diào)，而CD147表達(dá)呈明顯升高。這與國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究結(jié)果基本一致[9]。

表2　胃癌組織不同臨床病理特征CD147、S100P陽(yáng)性

表3　胃癌組織中CD147、S100P表達(dá)相關(guān)性分析　例

CD147是細(xì)胞表面黏附分子，在健康人群中其水平一般較低，常在甲狀腺癌、乳腺癌、喉鱗癌、肝癌以及子宮頸腺癌等惡性腫瘤中表達(dá)，最初主要對(duì)乳腺癌進(jìn)行鑒別診斷，隨著研究的逐步深入，發(fā)現(xiàn)CD147在胃癌中也可表達(dá)，因此對(duì)胃癌患者的診斷和預(yù)后評(píng)估也具有一定價(jià)值[10]。本研究中，胃癌組織中CD147表達(dá)陽(yáng)性率為85%，顯著高于正常組織和慢性胃炎組織。同時(shí)本研究還發(fā)現(xiàn)，CD147以中、強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)為主，占72%。有研究發(fā)現(xiàn)，CD147能夠增強(qiáng)基質(zhì)金屬蛋白酶的合成與分泌，而基質(zhì)金屬蛋白酶具有破壞細(xì)胞間質(zhì)成分和細(xì)胞外基底膜的作用，促使腫瘤出現(xiàn)轉(zhuǎn)移及侵襲[11]。

進(jìn)一步分析胃癌組織不同病理特征CD147、S100P陽(yáng)性表達(dá)情況發(fā)現(xiàn)，隨著TNM分期增加，分化程度增高，出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及侵及漿膜，S100P陽(yáng)性表達(dá)率顯著降低，CD147陽(yáng)性表達(dá)率顯著升高。提示CD147、S100P表達(dá)情況與TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、侵及漿膜密切相關(guān)，可作為胃癌病變程度以及侵襲能力的一個(gè)重要參考及評(píng)估指標(biāo)。同時(shí)，Pearson等級(jí)相關(guān)性分析結(jié)果顯示，胃癌組織中CD147表達(dá)與S100P的表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)性，提示CD147過(guò)表達(dá)可能會(huì)抑制S100P表達(dá)，從而加劇胃癌轉(zhuǎn)移及侵潤(rùn)。不過(guò)其作用機(jī)制還需要進(jìn)一步研究證實(shí)。

綜上所述，胃癌患者中S100P表達(dá)顯著降低，CD147表達(dá)顯著升高，與胃癌患者TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系，且CD147表達(dá)與S100P的表達(dá)顯著負(fù)相關(guān)，二者可能共同參與了胃癌的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)及侵襲。

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[收稿日期]2015-10-10

[中圖分類(lèi)號(hào)]R735.2

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B

[文章編號(hào)]1008-8849(2016)09-0973-03

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.09.022