劉暢

摘 要：本文根據(jù)作者自身的工作經(jīng)驗，對蘆薈罐頭中的蘆薈苷含量測定方法的各項實驗參數(shù)進行了不確定度評估與計算。

關(guān)鍵詞：蘆薈苷含量；標準不確定度；擴展不確定度

1 概述

1.1 環(huán)境條件

溫度22℃；相對濕度24%。

1.2 設(shè)備和材料

1）安捷倫液相色譜儀LC-1260；

2）分析天平島津AUW220D，測量范圍0～82g，最小分度值0.01mg，

0～5g示值誤差為±0.01mg；

3）分析天平梅特勒托力多MS204S，測量范圍0～220g，最小分度值0.0001g，0～50g示值誤差為±0.2mg；

4）A級容量瓶：25mL，允差為±0.03mL；

5）蘆薈苷標準品：購自中國食品藥品檢定研究院，ID：20UH-THKR，批號：110787-201206，含量：95.0%；

6）檢驗依據(jù)：QB/T 2489-2007/附錄A。

2 實驗過程

2.1 標準曲線工作液的配制

準確稱取蘆薈苷0.53mg，1.05mg，2.11mg，3.16mg，5.26mg分別置于25mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，分別得到濃度為20μg/ml，40μg/ml，80μg/ml，120μg/ml，200μg/ml溶液用于繪制標準曲線。

2.2 試樣測定

稱取一定量的待測樣品（精確至0.0001g），置于25mL容量瓶中，再加入甲醇15mL，混勻。置于超聲波振蕩器內(nèi)超聲萃取30min，再用水定容，靜置沉淀，取上清液以0.45μm濾膜過濾。

2.3 數(shù)學模型

試樣中蘆薈苷的含量X（g/kg）=C1×25/m

式中：C1，從濃度-峰面積標準曲線上查得樣品溶液的蘆薈苷濃度，單位為μg/ml；m，樣品質(zhì)量，單位為g。

2.4 不確定度傳播律

采用相對標準不確定度合成公式計算：

2.5 不確定度分量的量化

2.5.1稱取樣品質(zhì)量的過程中產(chǎn)生的相對標準不確定度Umr

用MS204S天平稱取樣品，依據(jù)校準證書得到天平的重復性誤差0.1mg，在50g量程范圍內(nèi)，天平的示值誤差為±0.2mg，則

2.5.2樣品定容引起的相對標準不確定度

25mL A級容量瓶定容，允許差為±0.03mL，則標準偏差為0.03/

=0.017mL；樣品溶液至容量瓶刻度的估讀誤差為0.005×25=0.125mL，則標準偏差為0.125/=0.072mL；以上兩項合成得出：

UV=0.017mL，UVr=0.072/25=0.0028

2.5.3 標準曲線的相對標準不確定度分量Uc1r

1）對標準曲線工作液進行2次重復測定，結(jié)果如表1所示，其中Xi為標準曲線工作液的濃度，Yi（A）為色譜峰面積。根據(jù)測量數(shù)據(jù)及線性回歸法求出標準工作曲線a=2.96，b=16.48，r=0.99998。根據(jù)所求得r值，可以看出x和y成線性關(guān)系，其回歸函數(shù)為y=16.48x+2.96。

2）計算回歸直線的標準偏差Sy/x：

式中：yt，回歸直線的計算值；yij，儀器的各點響應值；n，測量點數(shù)；m，測量點重復數(shù)目；nm-2，自由度。

將各個yt值計算，如表2所示，計算得到Sy/x=6.96，自由度nm=8。

3）計算斜率b的標準偏差Sb：

4）計算截距a的標準偏差Sa：

5）計算U（y ）：

a.稱取蘆薈苷標準物質(zhì)的過程中引起的相對標準不確定度U1mr。

用AUW220D天平稱量樣品，依據(jù)校準證書得到天平的重復性誤差0.02mg，在5g量程范圍內(nèi)，天平的示值誤差為±0.01mg，則

b.標準曲線工作液定容的過程中引起的相對標準不確定度U1vr

此相對標準不確定度的計算同2.5.2，則

c.對配制好的120μg/ml的蘆薈苷標準溶液進行了六次重復測量，其測量結(jié)果及標準偏差如表3，則

6）計算U2

其中，

2.5.4 精密度引起的相對不確定度U0r

在同一條件下，對樣品進行六次檢測，加標量為20μg/g，六次測量數(shù)據(jù)如表4所示，可知，在蘆薈罐頭中，六次測量的標準偏差為0.63mg/kg，蘆薈苷含量測定的平均值為19mg/kg，則其測量標準不確定度為：

相對標準不確定度為：UC2r=0.26/19=0.014

2.5.5安捷倫液相色譜儀產(chǎn)生的相對標準不確定度U0r

依據(jù)檢定證書得到液相色譜儀的定量重復性為0.3%，則其相對標準不確定度為：

2.6 相對不確定度分量一覽表

2.7 合成標準不確定度

綜上所述，合成標準不確定度為：

2.8 擴展不確定度分析

取包含因子k=2（近似95%置信概率），則

2.9 結(jié)果表征