許明媛

摘 要：外標(biāo)法又稱標(biāo)準(zhǔn)工作曲線法或已知樣校正法。這種實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)便，不需用校正因子，不論樣品中其他組分是否出峰，均可對(duì)待測(cè)組分定量。因此，在對(duì)高職藥學(xué)專(zhuān)業(yè)的有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，設(shè)計(jì)一個(gè)“外標(biāo)法測(cè)定氨基甲酸銨中水的含量”的實(shí)驗(yàn)教學(xué)。本實(shí)驗(yàn)用外標(biāo)法測(cè)得氨基甲酸銨中水的含量為1.444%，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，將此實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)用于高職藥學(xué)專(zhuān)業(yè)有機(jī)化學(xué)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)是可行的。

關(guān)鍵詞：外標(biāo)法；氨基甲酸銨是一種重要的工業(yè)原料，用途很廣，呈白色正方晶系。氨基甲酸銨可溶于醇，有吸濕性，在室溫下略有揮發(fā)，59℃時(shí)分解為氨及二氧化碳。在密封管中加熱至120～140℃時(shí)，則失去水變?yōu)槟蛩亍１緦?shí)驗(yàn)教學(xué)中，主要是探討外標(biāo)法測(cè)定氨基甲酸銨中水的含量。

1 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器

甲醇（色譜純 99.5%）、乙醚（分析純 99.9%）、氨基甲酸銨（工業(yè)用品）、去離子水、 氣質(zhì)聯(lián)用儀，PolarisQ氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。

2 外標(biāo)法測(cè)定氨基甲酸銨中水的含量

2.1 實(shí)驗(yàn)條件

色譜條件 HP-5石英毛細(xì)管柱（30m×0.25mm×0.25um）；升溫條件為恒溫120℃；高純載氣（He）采用恒流方式，流速為1.5ml/min；分流比1.2，進(jìn)樣量2ul；進(jìn)樣口溫度150℃。

質(zhì)譜條件 電子轟擊（EI）離子源；傳輸線溫度250℃；離子源溫度200℃；選擇離子（SIM）監(jiān)測(cè)方式；化合物保留時(shí)間2min。

2.2 實(shí)驗(yàn)步驟

①配制溶液 取用容量瓶配制濃度為1.00ul/ml的水的甲醇溶液，將溶液用甲醇分別稀釋至0.75ul/ml，0.50ul/ml，0.25ul/ml，及純的甲醇溶液，裝入中，濃度從小到大編號(hào)為1、2、3、4、5，對(duì)照品溶液配置完成備用。準(zhǔn)確稱取少量氨基甲酸銨固體，用加樣槍準(zhǔn)確加入甲醇液體，配制成0.5mg/ml的未知品溶液。

②氣質(zhì)測(cè)定 打開(kāi)氦氣管瓶的氣閥，打開(kāi)氣相色譜和質(zhì)譜的開(kāi)關(guān)，啟動(dòng)電腦。點(diǎn)擊聯(lián)機(jī)圖標(biāo)，設(shè)置接口溫度為250℃，離子源溫度為200℃。點(diǎn)擊tune下的pump，使質(zhì)譜抽真空，真空度Anulp在2.0以下即質(zhì)譜儀上的Vacuum指示燈不再閃動(dòng)，真空度便達(dá)到要求了。

打開(kāi)Xcalibur軟件，點(diǎn)擊Instrument Setup，進(jìn)行對(duì)參數(shù)的設(shè)定，對(duì)于臺(tái)式氣相色譜質(zhì)譜，方法設(shè)置一般包括三個(gè)部分：自動(dòng)進(jìn)樣器；氣相色譜；質(zhì)譜部分。保存設(shè)定的參數(shù)。儀器方法編輯完成后，便可進(jìn)行樣品分析，從主頁(yè)中選擇Sequence Setup 窗口。在類(lèi)似于Excel列表的結(jié)構(gòu)框架中設(shè)置對(duì)應(yīng)參數(shù)。包括Sample Type、File Name（保存樣品數(shù)據(jù)的文件名字）、Inst Meth（用來(lái)采集樣品的儀器方法的文件名和路徑）點(diǎn)擊run sample按鈕，帶儀器準(zhǔn)備完成就可以注入待測(cè)液體進(jìn)行氣質(zhì)測(cè)定。測(cè)定的結(jié)果即氣相色譜圖和質(zhì)譜圖可以在主菜單的qual browser中查看。先注入1號(hào)溶液，第一次進(jìn)樣時(shí)用丙酮清洗8-10次，在用待測(cè)液潤(rùn)洗8-10次，濃度從小到大測(cè)量，測(cè)量下一濃度時(shí)可以省略丙酮潤(rùn)洗。最后測(cè)定未知液前用丙酮清洗8-10次。得到一系列色譜圖和質(zhì)譜圖。

③繪制外表曲線 點(diǎn)擊Xcalibur，點(diǎn)Processing Setup選中工具欄中Option種選擇“Calibration By…”，在對(duì)話框中選擇“External standard”選擇“ok”或“Save as default”。Identification中激活質(zhì)譜圖，在所需的峰的位置上拉一下，相關(guān)的信息就會(huì)出來(lái)。進(jìn)入detection目錄，將smoothing points設(shè)置為7。再進(jìn)入calibration目錄，輸入標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度單位，并在weighting中選擇1/X。最后進(jìn)入level目錄，依次輸入標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度及進(jìn)樣順序，結(jié)束后點(diǎn)OK，并保存此定量方法。

點(diǎn)擊Sequence Setup ，在“Sample type”中選擇標(biāo)樣或是未知樣；“File name”中選樣品的名子，“Proc Meth”中選方法；標(biāo)樣在“Level”下選項(xiàng)對(duì)應(yīng)的水平，在“Path”下選擇保存的路徑。按“Batch Reprocess”進(jìn)行序列處理，后出現(xiàn)一個(gè)對(duì)話框，并選擇“Quan”中參數(shù)后按OK； Save保存起名子，幾分鐘后處理完成。在主菜單圖標(biāo)上點(diǎn)擊Quan Brower選擇剛保存的文件，點(diǎn)Open即可察看標(biāo)準(zhǔn)曲線和未知標(biāo)樣的結(jié)果。

④打印報(bào)告，關(guān)機(jī)。

2.3 結(jié)果分析

表1 外標(biāo)法的測(cè)定結(jié)果

[編號(hào)＼&樣品類(lèi)型＼&峰面積（mm2）＼&進(jìn)樣量（ul）＼&濃度（ul/ml）＼&1

2

3

4

5

6＼&標(biāo)準(zhǔn)

標(biāo)準(zhǔn)

標(biāo)準(zhǔn)

標(biāo)準(zhǔn)

標(biāo)準(zhǔn)

未知＼&734538

900464

1488020

1547258

1708172

1519180＼&2

2

2

2

2

2＼&0.000

0.250

0.500

0.750

1.000

0.724＼&]

室溫下水的密度ρ為0.997mg/ml，待測(cè)物中氨基甲酸銨的濃度c為0.500mg/ml，測(cè)得待測(cè)物中水含量。

根據(jù)未知樣品的A值，于標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的值。即帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，得到= 0.724（ ul/mL）。

所以氨基甲酸銨的含水量m計(jì)算為：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，將此實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)用于高職藥學(xué)專(zhuān)業(yè)有機(jī)化學(xué)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)是可行的。

參考文獻(xiàn)：

[1]楊翠萍，連進(jìn)軍，譚培功，等.環(huán)境污染事故中揮發(fā)性有機(jī)物快速定量方法[J].化學(xué)分析計(jì)量，2006，25（6）：35-37.

[2]張靜，王蕾，王趲.氣相色譜法測(cè)定蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量[J].當(dāng)代化工，2007，26（2）：206-208.氨基甲酸銨；實(shí)驗(yàn)教學(xué)