張　露，楊曉藝，李新霞，李建光

(新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，烏魯木齊　830011)

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光纖傳感過程分析溫度對苯妥英鈉片溶出度測定的影響

張露，楊曉藝，李新霞，李建光*

(新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，烏魯木齊830011)

摘要：目的建立以光纖傳感過程分析方法測定苯妥英鈉片的溶出度，考察溫度對溶出結(jié)果的影響。方法采用光纖藥物溶出度實(shí)時(shí)測定儀分別在25和37 ℃條件下繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并測定苯妥英鈉片的溶出度，測定波長和參比波長分別為258和300 nm，探頭規(guī)格選擇0.5 mm。結(jié)果25 和37 ℃條件下建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線平均偏差為18.6%。結(jié)論溫度對苯妥英鈉的吸光度有影響，應(yīng)在37 ℃條件下繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線以測定溶出度。

關(guān)鍵詞：苯妥英鈉片；光纖傳感；溶出度；溫度

苯妥英鈉作為抗癲癇藥已有40多年的歷史，是治療癲痢病發(fā)作和精神運(yùn)動(dòng)性發(fā)作的首選藥[1]?！吨袊幍洹芬?guī)定溶出度測定是苯妥英鈉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的必檢項(xiàng)目。一般溶出度實(shí)驗(yàn)是在37 ℃條件下進(jìn)行的，傳統(tǒng)的溶出度測定是經(jīng)取樣、過濾和稀釋等前處理后采用UV或HPLC法在室溫條件下測定 (標(biāo)準(zhǔn)曲線也是在25 ℃下繪制)。光纖藥物溶出度實(shí)時(shí)測定儀(Fiber-Optic Dissolution Test System，F(xiàn)ODT)為原位在線測定，溶出和檢測均在37 ℃條件下進(jìn)行，所以當(dāng)溫度對測定影響較大時(shí)，也應(yīng)在同一溫度下繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和測定溶出度[2-4]。

紫外可見光譜為分子光譜，對溫度的變化比較敏感，溫度的高低會影響水樣的分子運(yùn)動(dòng)和化學(xué)反應(yīng)，特別是原子外層電子更易受溫度的影響而發(fā)生吸收光譜的轉(zhuǎn)移，造成吸光度的改變[5-8]。一般情況下,溫度對大部分藥物的吸光度測定無影響，但溫度對鹽酸二甲雙胍片的吸光度影響較大[9]，預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)苯妥英鈉的吸光度對溫度敏感。

本實(shí)驗(yàn)通過在25和37 ℃條件下分別建立苯妥英鈉的標(biāo)準(zhǔn)曲線，考察不同溫度對苯妥英鈉吸光度測定的差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，溫度對苯妥英鈉吸光度的影響將引入18.6%(25與37 ℃)的誤差，因此在苯妥英鈉片溶出度過程分析時(shí)，對照品的標(biāo)準(zhǔn)曲線制作需與測定時(shí)的溫度一致，即37 ℃。

1儀器與試藥

1.1儀器電子天平(AGl35，梅特勒-托利多儀器有限公司)；光纖藥物溶出度過程監(jiān)測儀(FODT-601，新疆富科思生物技術(shù)有限公司)；真空脫氣儀(ZKT-18，天大天發(fā)科技有限公司)；超純水機(jī)(Ultra Pure UPF，上海禾泰儀器有限公司)。

1.2試藥苯妥英鈉對照品(中國食品藥品檢定研究院，100210-201303，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.0%)；苯妥英鈉片(山西云鵬制藥有限公司，A131101，規(guī)格為50 mg)；水為脫氣水，臨用前脫氣處理。

2方法與結(jié)果

2.1溶液的配制儲備液的配制：精密稱取苯妥英鈉對照品13.66 mg，置于10 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，得到質(zhì)量濃度為1 352 mg·L-1的儲備液。

對照品溶液：分別精密量取儲備液0.5，1.0，1.5，2.0和2.5 mL，置于25 mL量瓶中，用脫氣水定容至刻度，得到質(zhì)量濃度分別為27.05，54.08，81.12，108.16和135.20 mg·L-1的苯妥英鈉系列溶液，對應(yīng)于規(guī)格為50 mg的苯妥英鈉片，其相對溶出率分別為27.05%，54.08%，81.12%，108.16%和135.20%。

供試品溶液：精密稱取10片苯妥英鈉片，平均每片質(zhì)量為76.71 mg。將10片苯妥英鈉片置于研缽中，研磨成細(xì)粉，精密稱取10.81 mg藥品粉末，置于50 mL量瓶中，制成質(zhì)量濃度為216.20 mg·L-1的溶液。

2.2輔料干擾的考察取供試品溶液及供試品溶液過濾后的續(xù)濾液，分別在FODT 系統(tǒng)進(jìn)行紫外掃描后作吸收光譜差譜圖，以波長為橫坐標(biāo)，在同一波長處用未過濾溶液的吸光度值減去過濾后溶液的吸光度值，以此差值為縱坐標(biāo)回歸，得輔料的吸收曲線，見圖1。吸收光譜差譜圖顯示，有輔料的供試品溶液在300～600 nm范圍內(nèi)，吸光度在0.035左右，供試品溶液未過濾時(shí)溶液中有輔料的干擾，故選擇300 nm為參比波長，以消除輔料干擾。

圖1苯妥英鈉吸收光譜差譜圖

Fig.1 Absorption differential spectrum of phenytoin sodium

2.3檢測波長和探頭規(guī)格的確定取質(zhì)量濃度為108.16 mg·L-1的苯妥英鈉對照品溶液，置于FODT-601對照品模式下，采用規(guī)格為5 mm(10 mm光程)的探頭，在200～600 nm波長范圍內(nèi)掃描吸收光譜，結(jié)果苯妥英鈉紫外吸收光譜為末端吸收，藥典規(guī)定其在258 nm波長處檢測吸光度，吸光度在0.3～0.7范圍內(nèi)，因此選擇規(guī)格為5 mm的探頭，測定波長為258 nm。

2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取2.1項(xiàng)下苯妥英鈉對照品溶液，置于FODT中，分別在25和37 ℃時(shí)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，設(shè)置檢測波長為258 nm，參比波長為300 nm，光纖探頭規(guī)格為0.5 mm，測定系列質(zhì)量濃度苯妥英鈉對照品溶液的吸光度值，與相對溶出率進(jìn)行線性回歸，得到6組線性方程。見表1。

表125與37 ℃條件下標(biāo)準(zhǔn)曲線

Tab.1 Standard curves under the condition of 25 and 37 ℃

通道標(biāo)準(zhǔn)曲線(25℃)r標(biāo)準(zhǔn)曲線(37℃)r1C=350.93A-28.160.9994C=369.47A-24.870.99942C=323.70A-22.790.9992C=332.80A-14.950.99903C=278.54A-8.290.9993C=294.60A-4.030.99944C=251.55A-1.690.9993C=302.50A-7.160.99935C=280.11A-10.360.9994C=342.79A-5.670.99906C=287.58A-13.380.9995C=310.80A-8.950.9992

結(jié)果表明，在同一通道中，37 ℃條件下建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線k值均高于25 ℃條件下所建標(biāo)準(zhǔn)曲線k值，說明溫度對苯妥英鈉吸光度有影響，所以應(yīng)該在同一溫度條件下建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.5溶出度測定苯妥英鈉片溶出度的測定條件：取本品，參考《中國藥典》2010年版二部附錄ⅩC第二法(槳法)，將500 mL水作為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 r·min-1，溫度為37 ℃，測定波長為258 nm，參比波長為300 nm，探頭規(guī)格為0.5 mm，檢測時(shí)間為45 min。45 min后，苯妥英鈉片溶出度均達(dá)到90%以上，符合規(guī)定，見圖2。

圖2苯妥英鈉片25 和 37 ℃平均溶出曲線

Fig.2 Average dissolution curves of Phenytoin Sodium Tablets at 25 and 37 ℃

FODT實(shí)時(shí)測定苯妥英鈉吸光度，計(jì)算機(jī)軟件根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線將吸光度轉(zhuǎn)化計(jì)算為實(shí)時(shí)溶出度，3 min時(shí)，25和37 ℃條件下累計(jì)溶出百分率分別為42.0%和57.6%，相差15.6%。10 min時(shí)，25和37 ℃條件下累計(jì)溶出百分率分別為76.2%和97.8%，相差21.6%。結(jié)果表明，在同一時(shí)間點(diǎn)25和37 ℃條件下，將測定的吸光度值代入不同溫度下所建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出的溶出度值有明顯差異。

3結(jié)論

以供試品續(xù)濾液掃描紫外吸收光譜圖并作差譜，發(fā)現(xiàn)輔料有吸收且吸光度恒定不變，故采用雙波長法實(shí)時(shí)扣除輔料對苯妥英鈉吸光度所產(chǎn)生的影響。

當(dāng)在25和37 ℃條件下繪制苯妥英鈉的標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)曲線k值差異顯著，2個(gè)不同溫度下溶出度的平均偏差為18.6%，由此可知，溫度對苯妥英鈉的吸光度影響較大；應(yīng)在同一溫度條件下繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并測定苯妥英鈉吸光度，以消除溫度對苯妥英鈉吸光度的影響。

FODT在37 ℃條件下實(shí)時(shí)檢測藥物吸光度并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線轉(zhuǎn)化計(jì)算為藥物的實(shí)時(shí)溶出度，因此建議在使用FODT測定藥物溶出度時(shí)應(yīng)該在37 ℃條件下繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，以消除溫度對藥物吸光度的影響，從而得到準(zhǔn)確的溶出度值，更接近藥物的真實(shí)溶出過程。

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Study on the effect of temperature on the dissolution test of Phenytoin Sodium Tablets with fiber-opticin-situdissolution system

ZHANG Lu，YANG Xiaoyi，LI Xinxia，LI Jianguang*

(Department of Pharmacy，Xinjiang Medical University，Urumqi 830011，China)

Abstract:ObjectiveTo establish an in-situ process dissolution test method of Phenytoin Sodium Tablets，and to study the effect of temperature on dissolution. MethodsThe standard curves were plotted at 25 and 37 ℃.The drug dissolution rate was determined at respective temperature by using a fiber-optic dissolution test system(FODT).The test and reference wavelengthes were set at 258 and 300 nm, respectively，and the path-length of probes was 0.5 mm. ResultsThe curves of 25 and 37 ℃ average deviation of standard was 18.6%. ConclusionAs temperature influenced on the absorbance，standard curve should be made at 37 ℃，also at which the drug dissolution rate was determinecl .

Key words:Phenytoin Sodium Tablets；fiber-optic；dissolution；temperature

(收稿日期：2015-10-12)

中圖分類號：R944

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1004-2407(2016)03-0292-03

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.03.021

*通信作者：李建光，男，博士，教授，碩士研究生導(dǎo)師.

作者簡介：張露，女，碩士研究生.

基金項(xiàng)目：新疆維吾爾自治區(qū)科技創(chuàng)新人才項(xiàng)目(編號：2014721011).