李文瑞，葉敏南，彭　琪，鐘瑞芬，馬　強，陸小梅，黎四平△

(1.東莞市兒科研究所，廣東東莞 523320；2.東莞市第八人民醫(yī)院檢驗科，廣東東莞 523320)

?

·論著·

461例高膽紅素血癥新生兒尿液及母乳人巨細胞病毒DNA結(jié)果的回顧性分析*

李文瑞1，葉敏南2，彭琪1，鐘瑞芬2，馬強1，陸小梅1，黎四平2△

(1.東莞市兒科研究所，廣東東莞 523320；2.東莞市第八人民醫(yī)院檢驗科，廣東東莞 523320)

摘要:目的回顧性分析高膽紅素血癥新生兒尿液及母乳中人巨細胞病毒(HCMV)DNA結(jié)果，并探討HCMV-DNA檢測在新生兒高膽紅素血癥中的篩查意義。方法收集2014年1月至2014年12月在東莞市第八人民醫(yī)院住院的461例母乳喂養(yǎng)的高膽紅素血癥新生兒作為觀察組，另收集東莞市第八人民醫(yī)院同期的450例健康新生兒作為對照組。采用FQ-PCR檢測其母乳及新生兒HCMV-DNA水平，記錄其檢測結(jié)果。結(jié)果觀察組尿液HCMV-DNA陽性239例，占51.8%，對照組尿液HCMV-DNA陽性為89例，占19.8%，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。觀察組母乳HCMV-DNA陽性367例，占79.6%，對照組母乳HCMV-DNA陽性137例，占30.4%，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論HCMV母乳感染是新生兒HCMV感染的重要途徑，母乳及尿液HCMV-DNA檢測對高膽紅素血癥的診斷具有重要意義。

關(guān)鍵詞:高膽紅素血癥；人巨細胞病毒；嬰兒

人類巨細胞病毒(HCMV)是一種屬于具有雙鏈DNA的皰疹類病毒，該病毒在人類的感染非常普遍，尤其是嬰幼兒、孕婦等免疫力低下的人群更常見[1]，有文獻報道發(fā)達國家的感染率為30%～70%，我國人群的感染率在80%以上[2]。HCMV感染大多數(shù)表現(xiàn)為無癥狀的隱形或者潛伏感染，該病毒是孕婦圍生期感染的重要病原微生物之一，它可通過胎盤、血液或者母乳等途徑直接傳播給嬰兒，導(dǎo)致胎兒畸形、流產(chǎn)、早產(chǎn)等，嚴重感染者可致死亡[3]。因此，HCMV感染的早期診斷及預(yù)防變得尤其重要。本研究采用熒光定量PCR檢測高膽紅素血癥新生兒尿液及母乳HCMV水平，為HCMV感染的診斷及治療提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料收集2014年1月至2014年12月在東莞市第八人民醫(yī)院住院的461例母乳喂養(yǎng)的高膽紅素血癥新生兒作為觀察組，其中男287例、女174例，日齡1～30 d，平均16.5 d。另收集東莞市第八人民醫(yī)院同期的450例健康新生兒作為對照組，其中男267例、女183例，日齡1～28 d，平均15.7 d。觀察組患兒均符合高膽紅素血癥診斷標準，觀察組及對照組均進行尿及母乳HCMV-DNA檢查。

1.2方法

1.2.1標本采集入院第2天留患兒取新鮮尿液約2 mL于無菌干燥管中。清潔乳頭，采集用自我擠壓法，擠出約3 mL乳汁入無菌管中，立即送檢。

1.2.2標本檢測采用熒光定量PCR法檢測尿及母乳HCMV-DNA，PCR儀采用羅氏cobas z 480PCR儀；采用中山大學(xué)達安基因股份有限公司生產(chǎn)的試劑進行檢測，所有操作均嚴格按照儀器及試劑操作說明書進行。

1.2.3結(jié)果判讀PCR反應(yīng)結(jié)束后，電腦自動分析計算檢測結(jié)果。HCMV-DNA載量以基因copy/mL表示，HCMV-DNA>500 copy/mL為陽性。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS17.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

觀察組461例新生兒高膽紅素血癥尿液HCMV-DNA陽性239例，占51.8%；對照組尿液HCMV-DNA陽性為89例，占19.8%，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表1。觀察組450例高膽紅素血癥母乳HCMV-DNA陽性367例，占79.6%，對照組母乳HCMV-DNA陽性137例，占30.4%，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表2。

表1　　兩組新生兒尿液HCMV-DNA檢測結(jié)果的比較

-:該項無數(shù)據(jù)。

表2　　兩組新生兒母乳HCMV-DNA檢測結(jié)果的比較

-:該項無數(shù)據(jù)。

3討論

HCMV是一類在自然界廣泛存在的皰疹病毒，它具有嚴格種屬特異性。由于人是HCMV的唯一宿主[4]，因此人類感染HCMV非常普通，有文獻報道西方發(fā)達國家的感染率為30%～70% ，一些發(fā)展中國家感染率更高，中國人群的感染率約在80%以上。HCMV感染一般表現(xiàn)為潛伏感染且無癥狀。它是引起先天性及圍生期感染的重要病原微生物之一[5]，它可通過胎盤、血液或母乳直接傳播給嬰兒，導(dǎo)致流產(chǎn)、胎兒畸形、早產(chǎn)、注意力不集中及生長發(fā)育遲緩等癥狀[6]。大部分新生兒高膽紅素血癥也是由于HCMV引起，它是指足月新生兒血清總膽紅素超過220.6 μmol/L(12.9 mg/L)，早產(chǎn)兒血清總膽紅素超過255 μmol/L(15.0 mg/L)，足月兒發(fā)病率大概為60%，早產(chǎn)兒的發(fā)病率大概為80%。大部分黃疸患兒通過處理會自行消退，但是由于膽紅素具有毒性，少數(shù)患兒出現(xiàn)嚴重的高膽紅素血病，甚至膽紅素腦病。研究表明足月新生兒總膽紅素值超過428 μmol/L(25 mg/L)，就可能會發(fā)生膽紅素腦病，輕者引起神經(jīng)損害導(dǎo)致腦癱，重者導(dǎo)致死亡。如果血清總膽紅素值未達到高膽紅素血癥，但是合并窒息、高碳酸血癥、低蛋白血癥也可能導(dǎo)致膽紅素腦病，而且由于中樞聽覺神經(jīng)對膽紅素的毒性反應(yīng)敏感，因此高膽紅素血癥也可能會引起感音神經(jīng)性聽力損傷等[7]，從而嚴重影響胎兒的健康。

近年來分子生物學(xué)技術(shù)越來越廣泛地應(yīng)用于臨床檢測，它具有快速、靈敏、特異等特點，PCR技術(shù)是目前診斷HCMV感染的最敏感方法。本研究采用的熒光定量PCR技術(shù)檢測461例母乳喂養(yǎng)的新生兒高膽紅素血癥患兒，其中尿液HCMV-DNA 陽性239例，占51.8%，高膽紅素血癥新生兒母乳HCMV-DNA陽性367例，占79.6%，與國內(nèi)文獻報道相同[8]。本研究中，觀察組450例健康新生兒，尿液HCMV-DNA陽性為89例，占19.8%，其母乳HCMV-DNA陽性137例，占30.4%，高膽紅素血癥患兒尿液及母乳HCMV-DNA感染率與健康新生兒比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。研究表明，母乳HCMV感染率較高，因此攝入帶病毒的母乳是新生兒感染HCMV的重要途徑。

綜上所述，熒光定量PCR技術(shù)能快速、靈敏及特異地檢出HCMV感染， HCMV母乳感染是新生兒HCMV感染的重要途徑，母乳及尿液HCMV-DNA檢測對高膽紅素血癥的診斷具有重要意義。

參考文獻

[1]朱建康，李耀軍．住院患兒血清巨細胞病毒核酸與IgM抗體檢測比較研究[J]．國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2014，9(24)：3437-3438．

[2]翁玉英，倪琛，林秀鳳，等．不同標本巨細胞病毒檢測在診斷小兒人巨細胞病毒感染中的應(yīng)用[J]．分子診斷與治療雜志，2014，6(6)：410-414．

[3]王淑貞，王靜，張琳．尿、乳汁HCMV定量檢測在嬰幼兒HCMV感染診治中的意義[J]．放射免疫學(xué)雜志，2013，26(3)：361-362．

[4]李嬌，馬洪剛，單風平．實驗室2種檢測小兒巨細胞病毒方法的比較[J]．微生物學(xué)雜志，2013，33(1)：100-103．

[5]張鈺雯，徐天勇．熒光定量PCR技術(shù)在孕婦和新生兒巨細胞病毒感染檢測中的應(yīng)用[J]．中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2013，7(15)：34-35．

[6]徐學(xué)勤，楊潔．母親巨細胞病毒DNA檢測與新生兒感染的相關(guān)性研究[J]．中國婦幼健康研究，2014，25(4)：569-571．

[7] 張紫香.新生兒高膽紅素血癥對聽力的影響[D].廣州:廣州醫(yī)科大學(xué),2010.

[8]趙巍松，劉伶，楊飛．母乳及嬰兒血液、尿液人巨細胞病毒DNA檢測在嬰兒HCMV感染中的應(yīng)用[J]．中國實驗診斷學(xué)，2013，17(6)：1059-1061．

Retrospectively analyzed the result of HCMV-DNA of breast milk and urine of neonatal hyperbilirubinemia in 461 cases*

LiWenrui1,YeMinnan2,PengQi1,ZhongRuifen1,MaQiang1,LuXiaomei1,LiSiping2△

(1.DongguanInstituteofPediatrics,Dongguan,Guangdong523320,China;2DepartmentofLaboratory,TheEighthPeople′sHospitalofDongguan,Dongguan,Guangdong523320,China)

Abstract:ObjectiveTo retrospectively analyze the result of HCMV-DNA of breast milk and urine of neonatal hyperbilirubinemia and evaluate the effect on screening neonatal hyperbilirubinemia.MethodsCollected 461 cases of neonatal hyperbilirubinemia from January 2014 to December 2014 in our hospital,which fed with breast milk as observation group,at the same period collected 450 cases of healthy newborn in our hospital as control group.Tested the their level of HCMV- DNA in breast milk and urine with Fluorescent Quantitative PCR,recorded the testing results.Results239 cases with positive HCMV-DNA urine were detected in observation group,accounting for 51.8%.There were 89 cases of positive HCMV-DNA urine in control group,which accounted for 19.8%,the comparative difference was statistically significant(P<0.01).There were 367 cases of positive HCMV-DNA breast milk in observation group,accounting for 79.6%.The positive HCMV-DNA breast milk were detected in 137 cases in control group,which accounted for 30.4%,the comparative difference was statistically significant (P<0.01).ConclusionThe breast milk of HCMV infection was an important way of neonatal HCMV infection,the HCMV-DNA detection of breast milk and urine was of great significance to the diagnosis of neonatal hyperbilirubinemia.

Key words:hyperbilirubinemia;human cytomegalo virus；infants

(收稿日期：2016-01-18)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.009

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)08-1037-02

基金項目：廣東省東莞市科技計劃醫(yī)療衛(wèi)生類科研重點項目( 2013108101016)。

作者簡介：李文瑞，男，主管檢驗師，主要從事醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)方面的研究?！魍ㄓ嵶髡?，E-mail:lsp020@163.com。