羅　槑,徐園紅,吳桂輝,楊　銘,岳　冀

(成都市公共衛(wèi)生臨床醫(yī)療中心，四川成都 610066)

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·論著·

結(jié)核感染T細(xì)胞檢測在菌陰性肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價(jià)值*

羅槑,徐園紅,吳桂輝,楊銘,岳冀△

(成都市公共衛(wèi)生臨床醫(yī)療中心，四川成都 610066)

摘要:目的評(píng)估結(jié)核感染T細(xì)胞檢測在菌陰性肺結(jié)核的診斷價(jià)值。方法納入包括菌陰性肺結(jié)核病患者145例、非結(jié)核肺部疾病患者45例共190例。所有研究對(duì)象進(jìn)行結(jié)核感染T細(xì)胞檢測，計(jì)算靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值等指標(biāo)。結(jié)果結(jié)核感染T細(xì)胞檢測對(duì)菌陰性肺結(jié)核診斷的靈敏度為85.5%，特異度為84.4%，陽性預(yù)測值為94.7%，陰性預(yù)測值為64.4%。不同年齡段間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論結(jié)核感染T細(xì)胞檢測有較高的陽性預(yù)測值，適用于菌陰性肺結(jié)核病的臨床輔助診斷。

關(guān)鍵詞:結(jié)核感染T細(xì)胞檢測；菌陰性肺結(jié)核；靈敏度；特異度

結(jié)核病是引起全球關(guān)注的重大共公衛(wèi)生問題，結(jié)核病在我國也被列為重大傳染病之一。雖然目前已有很多技術(shù)運(yùn)用于結(jié)核病診斷，但各方法都有一定的局限性如抗酸染色鏡檢靈敏度太低、分枝桿菌培養(yǎng)時(shí)間長、PCR容易產(chǎn)生假陽等。最常見的結(jié)核菌素皮試試驗(yàn)(TST)由于其與包括卡介苗在內(nèi)的其他分枝桿菌有交叉反應(yīng)，特異性較差[1]。因此，以上這些方法仍不能滿足臨床早期診斷的需要，尤其是菌陰性結(jié)核病的診斷。由于缺乏有效的病原學(xué)診斷依據(jù)和手段，結(jié)核桿菌涂片陰性和培養(yǎng)陰性的結(jié)核病診斷常常依靠臨床癥狀、影像學(xué)表現(xiàn)及對(duì)診斷性抗結(jié)核治療的反應(yīng)來進(jìn)行判斷，可能會(huì)造成診斷不明確，導(dǎo)致疾病的發(fā)展和傳播[2]。因此，亟需快速、準(zhǔn)確的早期診斷方法為臨床提供早期診斷依據(jù)。本研究運(yùn)用了結(jié)核感染T細(xì)胞試驗(yàn)來評(píng)價(jià)該方法對(duì)菌陰性肺結(jié)核診斷的應(yīng)用價(jià)值。

1資料與方法

1.1一般資料選取2014年1月至2014年8月就診于成都市公共衛(wèi)生臨床醫(yī)療中心被診斷為菌陰性肺結(jié)核的患者共145例?；颊叩脑\斷根據(jù)臨床表現(xiàn)、影像學(xué)實(shí)驗(yàn)室等檢查，按《結(jié)核病診斷標(biāo)準(zhǔn)和分類》進(jìn)行。所有患者均接受了痰涂片查抗酸桿菌、痰結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)、胸片等結(jié)核相關(guān)檢查。同時(shí)，納入了同期本院的非結(jié)核肺部疾病患者45例作為對(duì)照。

1.2結(jié)核感染T細(xì)胞檢測檢測試劑盒為結(jié)核感染T細(xì)胞檢測試劑盒(體外釋放酶聯(lián)免疫法)，購自萬泰生物技術(shù)有限公司。采集納入研究者全血并用肝素抗凝，于2 h內(nèi)分別分裝1 mL至“N”“T”“P”3個(gè)培養(yǎng)管中。37 ℃培養(yǎng)(22±2)h之后，離心取血漿進(jìn)行ELISA檢測，得出3個(gè)培養(yǎng)管中γ干擾素的水平。根據(jù)說明書將結(jié)果表示為陽性、陰性和不確定3種。分別計(jì)算結(jié)核感染T細(xì)胞檢測對(duì)菌陰性肺結(jié)核診斷的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、陽性似然比、陰性似然比、診斷準(zhǔn)確度。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1患者基本資料共納入患者190例，基本信息見表1。其中菌陰性肺結(jié)核組共145例，初治結(jié)核126例(86.9%)，復(fù)治結(jié)核19例(13.1%)；非結(jié)核肺部疾病組45例，其中肺炎21例、肺癌16例、支氣管擴(kuò)張4例，慢性阻塞性肺疾病(COPD)和肺吸蟲病各2例。

表1　　納入研究的患者基本信息

2.2結(jié)核感染T細(xì)胞檢測結(jié)果在菌陰性肺結(jié)核組中，結(jié)核感染T細(xì)胞陽性有142例(85.8%)，非結(jié)核肺部疾病組陽性有7例(15.6%)，兩組陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

2.3結(jié)核感染T細(xì)胞檢測對(duì)菌陰性肺結(jié)核的診斷價(jià)值結(jié)核感染T細(xì)胞在不同年齡段的陽性率分別為：<18歲87.5%，18～60歲86.8%，>60歲73.5%，陽性率隨年齡增加而下降。結(jié)核感染性T細(xì)胞對(duì)診斷菌陰性肺結(jié)核的靈敏度為85.5%，特異度為84.4%，陽性預(yù)測值為94.7%，陰性預(yù)測值為64.4%，陽性似然比為5.5，陰性似然比為0.17，診斷準(zhǔn)確度為85.3%。上述診斷效能指標(biāo)在不同年齡段人群間進(jìn)行比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表2　　結(jié)核感染T細(xì)胞檢測結(jié)果[n(%)]

表3　　結(jié)核感染T細(xì)胞檢測對(duì)不同年齡組菌陰性肺結(jié)核的診斷價(jià)值

-:該項(xiàng)無數(shù)據(jù)。

3討論

菌陰性結(jié)核病因?yàn)槿狈硐氲脑\斷和鑒別診斷手段，一直是結(jié)核病診斷的難點(diǎn)。雖然菌陰性結(jié)核較活動(dòng)性肺結(jié)核傳染性小，但對(duì)于密切接觸者來講依然有較大的感染風(fēng)險(xiǎn)。

結(jié)核感染T細(xì)胞檢測是以檢測結(jié)核分枝桿菌特異性T細(xì)胞反應(yīng)為基礎(chǔ)的γ干擾素釋放試驗(yàn)為原理，作為一種新的檢測方法已在歐洲、美國等地區(qū)廣泛應(yīng)用[3]。結(jié)核感染T細(xì)胞檢測是基于在體外培養(yǎng)條件下結(jié)核特異性抗原結(jié)核早期分泌抗原靶分子(ESAT)和培養(yǎng)濾液蛋白10(CFP-10)刺激感染者的全血標(biāo)本的感染性T淋巴細(xì)胞，檢測釋放的γ干擾素。這些抗原不存在于卡介苗及其他致病性非結(jié)核分枝桿菌的中，因此具有很高的特異性[4]。由于其較高的靈敏度和特異度，越來越多地成為結(jié)核病輔助診斷的常規(guī)手段。

本次研究結(jié)果顯示結(jié)核感染T細(xì)胞對(duì)菌陰性肺結(jié)核總靈敏度為85.5%，Wlodarczyk等[5]報(bào)道的靈敏度為55.6%，盧峰岳等[6]報(bào)道為86.6%。總特異度為84.4%同Wlodarczyk等[5]報(bào)道的87.0%相近。靈敏度隨年齡增長有下降的趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。Kobashi等[7]報(bào)道日本青年和老年結(jié)核病患者的靈敏度無明顯差異。該方法的特異度在小于18歲和大于60歲的年齡段中均為100.0%，陽性集中在18～60歲的年齡段，可能與我國屬于結(jié)核高發(fā)國家之一，患者是未知的感染暴露人群，有待進(jìn)一步追蹤調(diào)查。

本次報(bào)道的菌陰性肺結(jié)核組有3例HIV陽性，HIV感染合并結(jié)核時(shí)，由于病情表現(xiàn)的復(fù)雜性，因此診斷更有難度。在這3例患者中，2例檢測結(jié)果為陽性，分別是年齡31和34歲的成年男性；另1例檢測結(jié)果陰性的為4歲男性兒童，由于同時(shí)有免疫系統(tǒng)損害和細(xì)胞免疫未成熟的表現(xiàn)，1型T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)低下，所以出現(xiàn)假陰性，因此免疫低下人群的對(duì)結(jié)核感染T細(xì)胞檢測反應(yīng)還需要通過增加樣本量來加強(qiáng)研究。

早期診斷和早期治療是結(jié)核防控最重要的策略之一。結(jié)核感染T細(xì)胞檢測對(duì)菌陰性肺結(jié)核有較高的靈敏度、特異度和陽性預(yù)測值，標(biāo)本容易獲取，實(shí)驗(yàn)室結(jié)果快速、穩(wěn)定。該方法適合于臨床輔助診斷和鑒別診斷。

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Performance of T cell infected with Mycobacterium tuberculosis assay in diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis*

LuoMei，XuYuanhong，WuGuihui，YangMing，YueJi△

(ChengduPublicHealthClinicalCenter,Chengdu，Sichuan610066,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the application value of T cell infected with Mybacterium tuberculosis assay in diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis.MethodsIn total,145 patients with smear and culture negative pulmonary tuberculosis and 45 patients with non-tuberculosis lung disease were enrolled in the study.All patients received T cell infected with Mybacterium tuberculosis test and sensitivity,specificity,positive predicted value,negative predicted value of testing for the diagnosis of smear and culture-negative TB patients were calculated.ResultsThe sensitivity of specificity T cell infected with Mybacterium tuberculosis assay in diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis was 85.5%,the specificity was 84.4%,positive predicted value was 94.7%,negative predicted value was 64.4%.No statistical significance in age-dependent groups(P>0.05).ConclusionT cell infected with Mybacterium tuberculosis assay has high positive predicted value in diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis and is suitable for clinical auxiliary diagnosis.

Key words:T cell infected with Mybacterium tuberculosis assay;smear and culture negative pulmonary tuberculosis;sensitivity；sensitivity；specificity

(收稿日期：2015-12-20)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.008

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)08-1035-03

基金項(xiàng)目：成都市科技局資助項(xiàng)目(2014-HM01-00371-SF)；四川省醫(yī)學(xué)會(huì)青年創(chuàng)新課題資助項(xiàng)目(Q14021)。

作者簡介：羅槑，女，主治醫(yī)師，主要從事傳染流行病學(xué)的相關(guān)研究。△通訊作者，E-mail:yj133881@126.com。