李佃場(chǎng)，褚艷麗

（1.即墨市畜牧獸醫(yī)局，山東 青島 266200；2.萊蕪市畜牧獸醫(yī)局，山東 萊蕪 271100）

新城疫不同弱毒株疫苗對(duì)吉山黑雞免疫效果比較試驗(yàn)

李佃場(chǎng)1，褚艷麗2

（1.即墨市畜牧獸醫(yī)局，山東 青島 266200；2.萊蕪市畜牧獸醫(yī)局，山東 萊蕪 271100）

新城疫是由新城疫病毒引起的一種急性、敗血性和具有高度毀滅性的傳染病，可發(fā)生于任何季節(jié)，但以春、秋兩季發(fā)生較多。在家禽中以雞及火雞最易感，新城疫的防治目前還沒(méi)有可臨床應(yīng)用的藥物，主要依靠免疫接種預(yù)防。目前常用雞的新城疫弱毒疫苗La Sota系、Clone30株等弱毒苗。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)常用的 La Sota、Clone30株兩種新城疫弱毒疫苗的免疫效果進(jìn)行比較，為雞新城疫進(jìn)行免疫接種選用弱毒疫苗時(shí)提供依據(jù)。

1 時(shí)間地點(diǎn)

1.1 時(shí)間 本次試驗(yàn)從2015年6月10日開(kāi)始，到7月25日全部完成，試驗(yàn)期45d。

1.2 試驗(yàn)地點(diǎn) 試驗(yàn)在萊蕪市萊城工業(yè)園棗園吉山黑雞種雞場(chǎng)進(jìn)行。供試用的雞舍外周，先用清水沖洗干凈，再撒上生石灰。雞舍用具用2%燒堿浸泡消毒，清水沖洗干凈后使用。雞舍地面、墻裙用清水沖洗2次，自然干燥，然后用1%農(nóng)家福噴灑，自然干燥后用2%燒堿噴灑沖洗，最后舍內(nèi)用福爾馬林熏蒸消毒48～72h?？贵w檢測(cè)在萊蕪市疫控中心實(shí)驗(yàn)樓進(jìn)行。

2 材料與方法

2.1 材料

2.1.1 試驗(yàn)雞 萊蕪吉山黑雞150羽，由萊蕪市萊城工業(yè)園棗園吉山黑雞種雞場(chǎng)提供。

2.1.2 試驗(yàn)疫苗 選用兩家疫苗廠家疫苗，分別是新城疫活疫苗（La Sota株），哈爾濱維科生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn)；新城疫活疫苗（Clone30株），哈爾濱維科生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn)。

2.1.3 檢測(cè)試劑 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所提供的（批號(hào)為：2012M001）新城疫HI抗原、新城疫HI陽(yáng)性血清。自制1%雞紅細(xì)胞懸液。

2.2 方法 挑選 150羽萊蕪吉山黑雞，分成 A組、B組、C組三個(gè)試驗(yàn)組，每組 50只，隔離飼養(yǎng)。其中A 組使用新城疫活疫苗（La Sota株）免疫劑量為0.5ml；B組新城疫活疫苗（Clone30株），免疫劑量0.5ml；C組為空白對(duì)照。

3 采樣方法

3.1 不同新城疫疫苗的免疫血清抗體水平比較A組、B組分別經(jīng)飲水免疫接種La Sota和clone30弱毒疫苗；第三組作為空白對(duì)照。在免疫新城疫疫苗后7、14、21、28、35、45d分別采血，用HA-HI試驗(yàn)測(cè)定免疫雞群的血凝抑制抗體效價(jià)。

3.2 攻毒試驗(yàn) 保護(hù)效果比較在45日齡，所有的供試雛雞每只肌肉注射接種5LD50NDV標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒F48E9。每天觀察供試雞的發(fā)病、死亡狀況。

3.3 檢測(cè)方法 采用血凝（HA）和血凝抑制（HI）試驗(yàn)技術(shù)，按照國(guó)標(biāo) 《高致病性禽流感診斷技術(shù)（GB/T 18933-2003）》所規(guī)定的方法操作。

4 結(jié)果與分析

4.1 免疫抗體的測(cè)定結(jié)果 接種La Sota弱毒苗的免疫組雞產(chǎn)生抗體較快并能長(zhǎng)期維持在較高的水平。接種Clone30弱毒苗的免疫組雞產(chǎn)生抗體較慢，在免疫接種后21d時(shí)才達(dá)到具有免疫保護(hù)作用的抗體水平，且整體抗體水平也比接種La Sota弱毒苗組所產(chǎn)生的抗體水平要低。不僅如此，從HI抗體效價(jià)的離散度來(lái)看，La Sota弱毒疫苗免疫后，雞群產(chǎn)生的HI抗體水平較整齊，而且，隨著免疫時(shí)間，抗體水平在增高的同時(shí)，離散度越來(lái)越小。Clone30弱毒疫苗的免疫雞群的HI抗體水平波動(dòng)性較大。由此可看出La Sota系弱毒的免疫效果優(yōu)于Clone30株弱毒疫苗，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 免疫雞群HI抗體效價(jià)（log2）

4.2 攻毒試驗(yàn)發(fā)病和死亡率測(cè)定結(jié)果 在攻毒試驗(yàn)中，對(duì)照組雞有的突然死亡，有的在臨死亡前出現(xiàn)典型新城疫的神經(jīng)癥狀，在死亡后經(jīng)剖檢都可觀察到腺胃乳頭和粘膜出血、腸道出血以及氣管環(huán)出血等新城疫的特征病變。因此，La Sota株出現(xiàn)發(fā)病和死亡數(shù)量少于Clone30株的數(shù)量，因此La Sota株的免疫保護(hù)效果優(yōu)于Clone30株。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 攻毒后供試雞發(fā)病和死亡情況

5 結(jié)論

通過(guò)上述2個(gè)試驗(yàn)可得到這樣的結(jié)論:即目前許多地區(qū)新城疫的發(fā)生與使用與接種弱毒疫苗種類無(wú)關(guān)，在實(shí)際生產(chǎn)中我們也注意到某些廠家疫苗免疫雞群后常常出現(xiàn)新城疫免疫效果差，雞群中該病經(jīng)常出現(xiàn)，而使用其他廠家疫苗后該病的流行逐漸平息的現(xiàn)象。其中的原因主要是一方面新城疫的預(yù)防不能完全依靠疫苗免疫，我們還應(yīng)加強(qiáng)動(dòng)物傳染病綜合性防治措施的宣傳和實(shí)施。在本試驗(yàn)中,不同弱毒苗免疫的雛雞由于抗體滴度不高，人工強(qiáng)毒攻擊的保護(hù)率為80%～92%。如果雞場(chǎng)的防疫、消毒制度不健全，在目前飼養(yǎng)大環(huán)境病原體污染嚴(yán)重的情況下,新城疫的發(fā)病可能不會(huì)避免；另一方面，選用弱毒苗時(shí)也要注意疫苗的質(zhì)量，我們?cè)?jīng)測(cè)定過(guò)不同廠家的新城疫弱毒苗，確實(shí)存在質(zhì)量較差、效價(jià)很低的現(xiàn)象。因此選用國(guó)產(chǎn)疫苗時(shí)應(yīng)尋找規(guī)模較大而且正規(guī)的生物藥品廠,保證免疫后的效果，決不能貪圖低廉的價(jià)位。

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