柴曉菲，孫亞冬，張　冰，劉　慧，于慶凱

(1.鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科，河南 鄭州 450008；2.鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺科，河南 鄭州 450008)

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乳腺癌組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)與臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系

柴曉菲1，孫亞冬2，張冰1，劉慧1，于慶凱1

(1.鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科，河南 鄭州 450008；2.鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺科，河南 鄭州 450008)

[摘要]目的觀察Wnt5a蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)情況，并分析其與乳腺癌相關(guān)臨床病理參數(shù)的關(guān)系，初步探討Wnt5a蛋白在人乳腺癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用。方法采用免疫組化S-P法檢測80例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織及相應(yīng)癌旁組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)。結(jié)果Wnt5a蛋白在乳腺癌和癌旁組織中的陽性表達(dá)率分別為33.8%(27/80)和63.8%(51/80)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；乳腺癌組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān)(P<0.05)；與ER和PR的表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.294、0.316，P<0.05)。結(jié)論乳腺癌組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)減少，提示其在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用，有可能成為乳腺癌早期診斷和預(yù)后判斷的指標(biāo)及治療的新靶點(diǎn)。

[關(guān)鍵詞]Wnt5a蛋白；乳腺癌；免疫組織化學(xué)

乳腺癌是最常見的女性惡性腫瘤之一，雖然預(yù)后相對較好，但仍然對女性健康造成很大威脅，其發(fā)病機(jī)制與激素水平關(guān)系密切，除此之外，環(huán)境、飲食習(xí)慣、遺傳及免疫等因素也可能與乳腺癌的發(fā)生有關(guān)。Wnt5a是Wnt蛋白家族成員之一，由Clark等[1]首先發(fā)現(xiàn)，該基因存在于3p14.2-p21.1染色體，編碼富含半胱氨酸的生長因子，參與細(xì)胞生長及分化。Wnt5a通過激活非經(jīng)典Wnt信號途徑發(fā)揮生物學(xué)作用[2]。在胰腺癌、胃癌、腸癌、肝癌、肺癌及惡性黑色素瘤等惡性腫瘤中的作用均有研究，本文研究Wnt5a與乳腺癌的關(guān)系，以期為乳腺癌的早期診斷和預(yù)后判斷提供參考意見，為乳腺的靶向治療提供方向。

1材料與方法

1.1材料收集選取河南省腫瘤醫(yī)院病理科2012年1月至2014年1月的80例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌石蠟標(biāo)本及其相應(yīng)的癌旁組織(癌旁組織距離癌組織>5 cm)，術(shù)前均未接受放、化療，術(shù)后病理結(jié)果均經(jīng)2位以上我院病理科醫(yī)生確認(rèn)，且都有完整的臨床病理資料。

1.2試劑Wnt5a兔抗人單克隆抗體購自美國Abcam公司，其余試劑均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.3檢測方法采用免疫組化S-P法檢測組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)，陽性結(jié)果判斷：細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色、黃色或棕褐色為染色陽性。根據(jù)染色的程度和陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)來判斷Wnt5a的表達(dá)情況。百分?jǐn)?shù)<25%為1分，25%～<50%為2分，50%～<75%為3分，≥75%為4分，染色強(qiáng)度：黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分。每例標(biāo)本以半定量積分法來判斷結(jié)果，計算公式為：綜合分?jǐn)?shù)=染色強(qiáng)度×陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)，綜合評分≥4為陽性表達(dá)，<4為陰性表達(dá)。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2結(jié)果

2.1乳腺癌和癌旁組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)Wnt5a蛋白在乳腺癌和癌旁組織中的陽性表達(dá)率分別為33.8%(27/80)和63.8%(51/80)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.2乳腺癌組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系乳腺癌組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān)(P<0.05)。見表1。

2.3乳腺癌組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)與ER和PR表達(dá)的相關(guān)性乳腺癌組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)與ER和PR的表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.294、0.316，P<0.05)。見表2、3。

表1乳腺癌組織中Wnt5a蛋白

的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的相關(guān)性

臨床病理參數(shù)nWnt5a蛋白陽性χ2P年齡/歲 >5042160.7470.388 ≤503811腫瘤直徑/cm >258190.0930.761 ≤2228組織學(xué)分級 Ⅰ148 Ⅱ48163.3800.184 Ⅲ185淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 無32178.9540.003 有4810TNM分期 Ⅰ～Ⅱ29169.3370.002 Ⅲ～Ⅳ5111ER 陽性56254.4740.006 陰性242PR 陽性54245.4900.019 陰性263

表2乳腺癌組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)與ER的相關(guān)性

ERWnt5a蛋白陽性陰性合計陽性253459陰性21921合計275380

注：rs=0.294，P=0.008

表2乳腺癌組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)與PR的相關(guān)性

PRWnt5a蛋白陽性陰性合計陽性243458陰性31922合計275380

注：rs=0.316，P=0.004

3討論

Wnt5a可通過抑制Wnt/beta-catenin經(jīng)典通路及其下游分子的表達(dá)發(fā)揮抑癌作用[3]。在不同的惡性腫瘤中的研究[4-5]表明，Wnt5a既具有腫瘤啟動的作用，又具備腫瘤抑制的作用，在惡性黑色素瘤中能夠增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動性和侵襲性，在肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、胰腺癌和前列腺癌中Wnt5a基因表達(dá)上調(diào)，而在血液系統(tǒng)惡性腫瘤、直腸癌和甲狀腺癌中Wnt5a基因表達(dá)下調(diào)，起到腫瘤抑制的作用。

本研究通過免疫組化法檢測乳腺癌和癌旁組織標(biāo)本中Wnt5a蛋白的表達(dá)情況，分析其差異表達(dá)與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系，進(jìn)一步探討Wnt5a蛋白與乳腺癌患者的預(yù)后可能存在的關(guān)系。結(jié)果表明：Wnt5a蛋白在乳腺癌和癌旁組織中的陽性表達(dá)率分別為33.8%(27/80)和66.7%(51/80)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；乳腺癌組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān)(P<0.05)；乳腺癌組織中Wnt5a蛋白的表達(dá)與ER和PR的表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.294、0.316，P<0.05)。

綜上所述，乳腺癌組織中Wnt5a蛋白表達(dá)下調(diào)，Wnt5a蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān)。本研究與國內(nèi)大多數(shù)研究結(jié)果一致，提示W(wǎng)nt5a在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用，有可能成為乳腺癌早期診斷和預(yù)后判斷的指標(biāo)及治療的新靶點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]Clark CC,Cohen I,Eichstetter I,et al.Molecular cloning of the human proto-oncogene Wnt-5A and mapping of the gene (WNT5A) to chromosome 3p14-p21[J].Genomics,1993,18(2):249-260.

[2]Ma L,Wang HY.Suppression of cyclic GMP-dependent protein kinase is essential to the Wnt/cGMP/Ca2+pathway[J].J Biol Chem,2006,281(41):30990-31001.

[3]王新綱.乳腺癌中Wnt5a的表達(dá)及其對Wnt經(jīng)典信號通路調(diào)控的研究[D].山東：山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院，2015.

[4]Malgor R,Crouser S,Greco D,et al.Correlation of Wnt5a expression with histopathological grade/stage in urothelial carcinoma of the bladder[J].Diagn Pathol,2013,8:139.

[5]Ying J,Li H,Yu J,et al.WNT5A exhibits tumor-suppressive activity through antagonizing the Wnt/beta-catenin signaling,and is frequently methylated in colorectal cancer[J].Clin Cancer Res,2008,14(1):55-61.

Expression of Wnt5a in the Breast Carcinoma and Its Correlation with Clinicopathological Pathology and Prognosis

Chai Xiaofei1,Sun Yadong2,Zhang Bing1,Liu Hui1,Yu Qingkai1

(1.DepartmentofPathology,theCancerHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450008,China;2.DepartmentofBreastSurgery,theCancerHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450008,China)

[Abstract]ObjectiveTo detect the expression of Wnt5a in the breast carcinoma,and to analyze the association with clinicopathological parameters of breast carcinoma,and to discuss the relationship between Wnt5a and its effect in the development process of protein in the breast carcinoma.MethodsImmunohistochemistry S-P method was used to detect the Wnt5a protein expressions in the 80 patients with breast infiltrating ductal carcinoma tissues and the corresponding paraneoplastic tissues.ResultsThe Wnt5a protein positive expression rates in the breast carcinoma and the paraneoplastic tissues were 33.8% (27/80) and 63.8% (51/80),the difference was statistically significant (P<0.05); Wnt5a protein expression in the breast carcinoma was associated with lymph node metastasis and TNM stages (P<0.05); Wnt5a protein expression in the breast carcinoma was positively related with ER and PR expression (rs=0.294,0.316; P<0.05).ConclusionAbnormal expression of Wnt5a protein in the breast carcinoma play an important role in the occurrence and development of breast carcinoma,and has the potential to be early diagnosis and prognostic indicators in the breast carcinoma and new treatment targets.

[Key words]Wnt5a protein; breast carcinoma; immunohistochemistry

(收稿日期：2015-10-12)

[中圖分類號]R737.9；R730.23

[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

[文章編號]1673-5412(2016)02-0110-03

DOI:10.3969/j.issn.1673-5412.2016.02.005

作者簡介：柴曉菲(1983-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤病理診斷工作。E-mail：chai1861@163.com通信作者：于慶凱(1957-)，女，博士，主任醫(yī)師，主要從事腫瘤病理診斷工作。E-mail：yuqingkai@hotmail.com