李國奮

摘 要：當(dāng)前許多養(yǎng)豬地區(qū)出現(xiàn)了仔豬腹瀉的疫情，并具有高死亡率的特征，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。在仔豬腹瀉的多種類型中，豬瘟和豬藍耳病的混合感染是較為常見的類型。本文結(jié)合診斷實例，對由豬瘟和豬藍耳病混合感染引發(fā)的仔豬腹瀉疫情診斷進行了介紹，并提出了相關(guān)的防治措施，為有關(guān)需要提供參考。

關(guān)鍵詞：仔豬腹瀉；診斷；防治措施

當(dāng)前有許多豬病，一當(dāng)發(fā)生，將會給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。在眾多的豬病中，仔豬腹瀉是較為常見的傳染病之一，它能夠造成仔豬生長發(fā)育緩慢、死亡，仔豬的成活率大大降低，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。而仔豬腹瀉的癥狀復(fù)雜，引發(fā)的原因多樣，其中由豬瘟和豬藍耳病混合感染的類型較為常見。如何準(zhǔn)確對由豬瘟和豬藍耳病混合感染引發(fā)的仔豬腹瀉病進行診斷，并采取有效措施進行防治是當(dāng)前的一個重要課題。對此，筆者進行了詳細介紹。

一、流行病學(xué)調(diào)查

某養(yǎng)豬廠現(xiàn)有母豬50頭，仔豬200頭，發(fā)病豬50～60頭，現(xiàn)已死亡10余頭，豬場免疫過的疫苗有豬瘟疫苗、豬偽狂犬疫苗、豬圓環(huán)疫苗和副豬嗜血桿菌疫苗，并且使用過替米考星和地塞米松治療效果不顯著。經(jīng)調(diào)查2013年和2014年分別出現(xiàn)過副豬嗜血桿菌和豬圓環(huán)病毒感染的情況。

二、臨床癥狀與剖檢病變

1.臨床癥狀?；疾∝i拉稀、消瘦后慢慢死亡，糞便呈黃白色，并有水樣便；仔豬出現(xiàn)四肢游泳的神經(jīng)癥狀，出生7d后拉稀較多，斷奶后也有拉稀甚至死亡的現(xiàn)象。

2.病理剖檢。剖檢2頭死亡仔豬，其病變大致為肺臟出血，脾臟有壞死灶，邊緣有鋸齒狀病變，腎臟有出血斑、出血點，腹股溝淋巴結(jié)腫大、出血，脾臟腫大，關(guān)節(jié)腫大。

三、實驗室診斷

1.材料

（1）病料。某豬場送檢的2頭死亡仔豬，剖檢觀察后采集血液、肺臟、脾臟、腎臟和淋巴結(jié)。病料分類編號，并于-20℃保存。

（2） 試劑。北京天根公司總RNA抽提試劑盒、北京全式金生物技術(shù)公司RT-PCR一步法盒子。

（3）引物。CSFV和PRRSV特異引物由當(dāng)?shù)匾呖刂行膶嶒炇冶４妗?/p>

2.方法

（1）總RNA的抽提。將所采的肺臟、脾臟、淋巴結(jié)等病料在無菌條件下剪取適量于2mL EP管中，加入生理鹽水并用研磨儀研磨成懸液，-20℃反復(fù)凍融2～3次，12000R/min離心2min。按試劑盒說明書操作步驟進行抽提：吸取200μL病料上清液，加入300μL裂解液RL和10μL蛋白酶K，振蕩混勻；放入56℃水浴鍋水浴15min；加入250μL無水乙醇，混勻后轉(zhuǎn)到套有收集管CR3吸附柱中，12000R/min離心60s；棄去收集管中的廢液，向吸附柱中加入350μL的去蛋白液RW1，12000R/min離心60s；棄去收集管中的廢液，向吸附柱中加入配制好的DNASEI工作液80μL，靜置15min，加入350μL的去蛋白液RW1，12000R/min離心60s；棄去收集管中廢液，向吸附柱中加入500μL的漂洗液RW，靜置2min，12000R/min離心60s；棄去收集管中的廢液，再向吸附柱中加入500μL的漂洗液，12000R/min離心60s；棄去收集管中的廢液，12000R/min空離2min，把吸附柱取出置于新的RNASE-FREE離心管中，打開蓋子數(shù)分鐘晾干漂洗液；向吸附柱中懸空滴加35μL ddH2O，靜置2min，12000R/min離心2min，離心管中所得液體即為RNA溶液。

（2） 病毒RNA的RT-PCR反應(yīng)。按北京全式金生物技術(shù)公司的一步法盒子進行RT-PCR反應(yīng)。反應(yīng)體系：R-mix10μL、水3.8μL、上游引物0.4μL、下游引物0.4μL、E-mix0.4μL。RT-PCR反應(yīng)條件如下：45℃30min，94℃5min，94℃30s，56℃30s，72℃1min，35個循環(huán)；72℃5min，4℃保存。

3.實驗室檢測結(jié)果。通過RT-PCR，1號病料擴增出2個條帶，其大小分別為508bP和511bP，與CSFV和PRRSV的陽性對照片段大小相符，說明1號病料有豬瘟和豬藍耳病毒；2號病料無明顯條帶，說明沒有豬瘟和豬藍耳病毒。見圖1。

1：1號病料CFSV；2：2號病料CSFV；3：CSFV陽性對照；4：1號病料PRRSV；5：2號病料PRRSV；6：PRRSV陽性對照；7：HPRRSV陽性對照；8：MARKER DL 2000經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、剖檢變化及實驗室RT-PCR檢測的結(jié)果，1號病豬確診為豬瘟和豬藍耳病共同感染所引起的仔豬腹瀉。

四、討論

1號病豬確診為豬瘟和豬藍耳病混合感染，而2號病豬病料未檢到豬瘟和豬藍耳病毒，可能是大腸桿菌引起的仔豬腹瀉，如早發(fā)性大腸桿菌病和遲發(fā)性大腸桿菌病，即仔豬黃痢和仔豬白痢。仔豬黃痢可造成仔豬排黃白色水樣便，體重減輕甚至死亡；仔豬白痢主要以排灰白色的糞便為主，呈漿糊狀，有腥臭味。

五、防治措施

1.發(fā)病豬應(yīng)立即隔離，病情較重病豬果斷淘汰，對病死豬采用深埋處理。糞便作為重要傳播源應(yīng)進行發(fā)酵或深埋處理，豬舍和工具應(yīng)及時清洗并消毒，保持豬舍通風(fēng)、干燥。

2.對豬群緊急免疫接種豬瘟細胞活疫苗和豬藍耳病滅活疫苗，為避免相互感染，1頭豬使用1個針頭。

3.仔豬腹瀉將造成機體的水、電解質(zhì)大量丟失，酸堿失衡，這時對癥治療應(yīng)以補液為主，具體措施可采用口服補液鹽如0.9%氯化鈉、氯化鉀、碳酸氫鈉和5%葡萄糖；對因治療可服用抗病毒藥物如干擾素、黃芪多糖、排疫肽、免疫球蛋白等。由于抵抗力的下降，疾病的發(fā)生多伴有細菌繼發(fā)感染，需使用抗菌藥物如氨芐青霉素、阿米卡星、頭孢氨芐等，同時使用收斂劑、吸附劑，如：鞣酸蛋白、藥用炭，前者口服有止瀉作用，后者可吸附胃腸道內(nèi)的有毒物質(zhì)和氣體，起到止瀉作用。對于腹瀉較嚴(yán)重的仔豬還可服用神經(jīng)性止瀉藥阿托品。

4.防控其他疫病如豬偽狂犬病、豬氣喘病等疾病的發(fā)生，做好疫苗注射工作，定期對豬群的豬瘟和豬藍耳病進行監(jiān)測。

六、結(jié)語

綜上所述，仔豬腹瀉的癥狀較為復(fù)雜，其中由豬瘟和豬藍耳病混合感染引發(fā)的仔豬腹瀉是較為常見的類型之一，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。因此，要準(zhǔn)確地對仔豬腹瀉疫情進行診斷，并結(jié)合診斷結(jié)果采用相應(yīng)的處理措施進行治療，同時還要采取有效的防治措施對病情進行防治，從而避免仔豬腹瀉疫情的出現(xiàn)，減少養(yǎng)豬業(yè)的經(jīng)濟損失。

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