摘要：本文針對草莓組培苗的玻璃化問題進(jìn)行分析和討論。封口透氣膜的透氣程度影響草莓組培苗的玻璃化；瓊脂濃度的多少影響草莓組培苗的玻璃化；6-BA濃度影響草莓組培苗的玻璃化；不同碳源影響草莓組培苗的玻璃化；銨根離子濃度影響草莓組培苗的玻璃化。針對玻璃化草莓苗采取的預(yù)防措施。

關(guān)鍵詞：草莓苗玻璃化；封口透氣膜；瓊脂濃度；6—BA；碳源；銨根離子濃度

中圖分類號： S668 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A DOI編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2016.15.037

在進(jìn)行草莓組織培養(yǎng)時，通常會觀察到小苗出現(xiàn)類似玻璃的半透明的水浸狀，將其稱之為玻璃化苗，這種苗葉片比較脆，用鑷子夾取組培苗的時候容易碎，試管苗矮小、腫脹失綠，整個生長異常。玻璃化苗是由于培養(yǎng)環(huán)境中的一些物理、化學(xué)因子一起導(dǎo)致植物組織代謝失調(diào)引起的，玻璃化現(xiàn)象一般不出現(xiàn)在自然生長的植株上，其是植物組織培養(yǎng)中很獨特的一種生理病變。用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行植株快繁時由于玻璃苗的出現(xiàn)，使試管苗的生理功能發(fā)生障礙，移栽大田不易成活，已成為莖尖脫毒、工廠化育苗和材料保存等方面的嚴(yán)重障礙，是進(jìn)行組培工作中的一大難題，也是組培擴(kuò)大生產(chǎn)亟待解決的問題之一。

玻璃苗的發(fā)生因素很多，不同植物的主導(dǎo)影響因素往往因種類而異。盡管試管苗有的時候在后期的繼代轉(zhuǎn)接中可改善玻璃化的狀態(tài)，偶爾可恢復(fù)，但繼代培養(yǎng)如果不能消除玻璃化現(xiàn)象，不僅試管苗的分化能力低下，難以繼代增殖，并且試管苗也難以發(fā)根成苗，致使移栽也不易成活，因而研究玻璃化苗發(fā)生的原因和預(yù)防措施，消除玻璃化苗是植物組培中至關(guān)重要的環(huán)節(jié)。

1減少玻璃化苗的措施

1.1封口膜的透氣性與草莓玻璃化苗的關(guān)系

將接種好的草莓組培苗放入帶有瓊脂的錐形瓶中，培養(yǎng)基濃度為MS+6-BA0.6毫克/升+NAA0.05 毫克/升，封口膜有兩種，一種是單層聚丙烯膜，另一種是雙層聚丙烯中間夾一層無紡布透氣膜，兩者的透氣性不同對組培苗產(chǎn)生的效果不一樣，培養(yǎng)30天，數(shù)據(jù)結(jié)果見表1。

由表1可以看出封口膜的透氣程度越大，玻璃花苗越少。

1.2不同瓊脂濃度與草莓玻璃化苗的關(guān)系

在生產(chǎn)中我們所說的培養(yǎng)基做的稀還是干，取決于放的瓊脂濃度。試驗研究：8克/升，7克/升，6.5克/升，每個梯度接種20瓶，接完苗后的結(jié)論依次為：8克/升的基本沒有玻璃化苗，7克/升的有6瓶玻璃化苗，6.5克/升的有10瓶玻璃化苗。由此下結(jié)論，隨著瓊脂濃度的遞減接種的試管苗玻璃化逐漸增多。

1.3不同濃度6-BA與草莓玻璃化苗關(guān)系

不同6-BA的濃度對玻璃化苗影響不同，設(shè)置6-BA濃度為0.8克/升，1.0克/升，1.5克/升，2.0克/升，接種30天后的統(tǒng)計結(jié)果見表2。

由表2可以看出6-BA濃度越高玻璃化苗越嚴(yán)重。

1.4不同碳源與草莓玻璃化苗的關(guān)系

一般在組培上使用的碳源都是蔗糖，也有用果糖和葡萄糖的，詳見表3。

由表3可見：用蔗糖作為碳源玻璃化苗最少。

1.5銨離子濃度與草莓玻璃化苗的關(guān)系

適當(dāng)降低培養(yǎng)基的銨根離子濃度也能減少玻璃化苗，銨根離子多數(shù)來自于NH4O3，想要降低銨根離子濃度，那么就要在配置MS母液的時候減少NH4NO3的放入量，如表4進(jìn)行討論。

由表4可見：隨著銨根離子的減少玻璃化苗葉隨之減少。

2結(jié)果與討論

封口膜越是透氣玻璃化苗越少。瓊脂濃度越大玻璃花苗越少，一般8克/升最佳；適當(dāng)降低6-BA濃度能減少玻璃化苗；選擇適當(dāng)?shù)奶荚磳档筒ＡЩ缬泻锰?；適當(dāng)降低銨根離子濃度葉能減少玻璃化苗。

預(yù)防措施：在選材的時候盡量選取不易玻璃化的外植體作培養(yǎng)材料；在制作培養(yǎng)基的時候要控制水分；配制培養(yǎng)基時，選用的激素濃度要反復(fù)推敲，選用的激素濃度做出的組培苗在生產(chǎn)上得看栽培效果，比如草莓出瓶后是否結(jié)果，增加培養(yǎng)容器的通氣度，選擇透氣性好的封口膜，降低瓶內(nèi)濕度，采用棉塞，透氣膜等透氣性好的作為封口材料；培養(yǎng)瓶采用容積較大容器培養(yǎng)，并且盡可能的減少接種密度；培養(yǎng)過程中注意控制室溫，以減少玻璃化苗的發(fā)生。

作者簡介：胡穎，沈陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，中級農(nóng)藝師，研究方向：組織培養(yǎng)（草莓組織培養(yǎng)，大白菜小孢子技術(shù)）。