孫慧穎　陳悅　周默　邊雪　韓雙　白慶榮

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué),長(zhǎng)春,130118)

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非洲鳳仙莖基腐病病原學(xué)及藥劑敏感性1)

孫慧穎陳悅周默邊雪韓雙白慶榮

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué),長(zhǎng)春,130118)

摘要對(duì)非洲鳳仙(Impatiens wallerana Hook. f.)莖基腐病的癥狀進(jìn)行了描述，結(jié)合病原形態(tài)特征、培養(yǎng)特性及rDNA-ITS序列分析結(jié)果，確定該病害由Rhizoctonia solani Kühn AG4-HG-Ⅰ融合群引起。病菌的生物學(xué)特性研究表明：菌絲較適生長(zhǎng)溫度為25～30 ℃；菌絲生長(zhǎng)較佳的培養(yǎng)基為OA和PSA，較佳的碳源為D-(+)麥芽糖、α-乳糖和可溶性淀粉，較佳的氮源為硝酸鉀和硝酸鈉；pH=7時(shí)菌絲生長(zhǎng)最好；光照條件對(duì)菌絲生長(zhǎng)無(wú)影響；菌絲致死條件為51 ℃、10 min。采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定了病菌對(duì)30種殺菌劑的敏感性，結(jié)果表明，病菌對(duì)≥300億個(gè)·g(-1)內(nèi)生芽孢桿菌WP、1 000億個(gè)·g(-1)枯草芽孢桿菌WP、25%肟菌·50%戊唑醇WG、40%氟硅唑EC敏感性較高，對(duì)其EC(50)<1.0 mg·L(-1)，可以作為田間防治非洲鳳仙莖基腐病的首選殺菌劑。

關(guān)鍵詞非洲鳳仙；莖基腐??；病原鑒定；生物學(xué)特性；藥劑敏感性

分類號(hào)S432.1；S681.1

Pathogen Identification and Fungicides Susceptibility onImpatienswallerianaRoot and Stem Rot

Sun Huiying, Chen Yue, Zhou Mo, Bian Xue, Han Shuang, Bai Qingrong

(Jilin Agricultural University, Changchun 130118, P. R. China)//Journal of Northeast Forestry University，2016,44(3)：101-105.

We described the symptoms ofImpatienswallerianaroot and stem rot disease. Based on the morphology, cultural characteristics of the isolates and ITS sequence, we identified the pathogen asRhizoctoniasolaniKühn AG4-HG-I. The results of the biological characteristics of the pathogen showed that the suitable temperature for mycelial growth was 25 ℃-30 ℃. The optimal media for mycelial growth were OA and PSA. D-(+) Maltobiose, α-lactose，soluble starch, potassium nitrate and sodium nitrate were optimal for mycelial growth. The pH of 7 was suitable for mycelial growth. Light had no effect on mycelial growth. The lethal temperature of mycelial was 51 ℃ for 10 min. The susceptibility of the pathogen to 30 fungicides was detected by mycelial growth rate method. The pathogen was more sensitive to Endophytic Bacillus WP, Bacillus Subtilis WP, Trifloxystrobin·Tebuconazole 25%·50% WG, Flusilazole 40% EC, EC50<1.0 mg/L.

KeywordsImpatiens walleriana; Root and stem rot; Pathogen identification; Biological characteristics; Laboratory toxicity

非洲鳳仙(ImpatienswalleranaHook. f.)為鳳仙花科(Balsaminaceae)，鳳仙花屬(Impatiens)植物,俗名蘇丹鳳仙花、玻璃翠，為多年生肉質(zhì)草本植物,是草花中最耐陰的品種之一，適合于涼臺(tái)、室內(nèi)盆栽，也可做成吊盆等掛于窗前、樹(shù)上或用于樹(shù)蔭下的綠化材料[1-3]。非洲鳳仙原產(chǎn)非洲東部熱帶地區(qū),鳳仙花屬主要分布于熱帶非洲、印度、西南亞、中國(guó)南部和日本的大部分地區(qū)[4]。非洲鳳仙在北方地區(qū)多用作1年生栽培應(yīng)用[5]。目前，在我國(guó)北京植物園熱帶溫室[2]以及沈陽(yáng)[5]、哈爾濱[6]等地均有栽培。2013年2月，在長(zhǎng)春市春蓮花卉基地非洲鳳仙育苗圃發(fā)現(xiàn)莖基腐病，發(fā)病率高達(dá)45%，對(duì)非洲鳳仙的生產(chǎn)造成嚴(yán)重危害；栽植后的植株也常常發(fā)生該病害，造成缺蔸死叢，影響其觀賞價(jià)值。本研究對(duì)該病害的癥狀進(jìn)行了描述，對(duì)病原菌進(jìn)行了分離與鑒定，并對(duì)病原菌的生物學(xué)特性及藥劑敏感性進(jìn)行了研究，以期為該病害的診斷提供依據(jù)，為病害防控奠定基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1病害標(biāo)本的采集及癥狀觀察

2013年2月中旬開(kāi)始，在長(zhǎng)春市春蓮花卉基地進(jìn)行病害標(biāo)本采集，并跟蹤調(diào)查，記錄病害發(fā)生特點(diǎn)及危害情況。

1.2病原菌的分離、純化與致病性測(cè)定

采用組織分離法對(duì)采自春蓮花卉基地的病害標(biāo)本進(jìn)行病原菌的分離。剪取病健交界處的病組織若干塊，大小為2 mm×2 mm，70%酒精消毒1 min，0.1%升汞消毒1 min。無(wú)菌水沖洗3次，置于PDA平板培養(yǎng)基上，每皿2～4塊，在培養(yǎng)箱內(nèi)25 ℃恒溫培養(yǎng)。用滅菌的挑針，挑取單絲頂端2～3 mm，轉(zhuǎn)入PDA培養(yǎng)基上置于恒溫箱中25 ℃純化培養(yǎng)。

1年生盆栽健康植株莖基部用75%的酒精消毒，將培養(yǎng)3 d的純化菌株，打取直徑8 mm的菌餅貼到已消毒植株的莖基部，每個(gè)分離物接種5盆，以接種無(wú)菌PDA為對(duì)照，分別套袋保濕培養(yǎng)，定期觀察并記錄植株的發(fā)病情況。

1.3病原菌的培養(yǎng)學(xué)性狀及形態(tài)學(xué)觀察

觀察病原菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況，菌絲、菌落及菌核的形態(tài)、色澤等。

細(xì)胞核染色：番紅O-KOH染色法[7]。將滅菌的載玻片放入PDA平板中，挑取菌絲塊放入平板中，置于培養(yǎng)箱中25 ℃恒溫培養(yǎng)。待其菌絲長(zhǎng)至載玻片1/3處，取出載玻片，放入含有番紅O-KOH染色缸中，染色1 min，在超景深顯微鏡下進(jìn)行觀察，并拍照記錄。

1.4病原菌的分子生物學(xué)鑒定

以CTAB法[8]提取的菌株基因組DNA為模板，ITS4/ITS5(5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′)/(5′-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3′)為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增的產(chǎn)物送至上海生物工程有限公司進(jìn)行測(cè)序，并將測(cè)序所得的rDNA-ITS序列遞交GenBank，并與GenBank中核酸數(shù)據(jù)(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/)中的ITS區(qū)相關(guān)序列進(jìn)行同源性比較。

1.5病原菌生物學(xué)特性測(cè)定

供試菌株：FF1。

培養(yǎng)基對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響：在PDA、PSA、PCA、OA、水瓊脂、玉米粉、黃瓜煎汁培養(yǎng)基上分別放置直徑為8 mm的病原菌菌餅，4次重復(fù)，25 ℃恒溫培養(yǎng)，2 d后，采用十字交叉法測(cè)量菌落直徑[9]。將培養(yǎng)3 d的病原菌菌餅(直徑8 mm)，轉(zhuǎn)入滅菌的150 mL對(duì)應(yīng)的上述液體培養(yǎng)基中，置于25 ℃、180 r·min-1的恒溫震蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6 d。用真空抽濾機(jī)將菌絲分離后置于電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)，40 ℃烘干至恒質(zhì)量，測(cè)其質(zhì)量。

碳、氮源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和菌絲干質(zhì)量的影響：①碳源。以查氏培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基[10]，分別稱取等質(zhì)量碳素的D(+)-麥芽糖、葡萄糖、D-果糖、α-乳糖、D-木糖、可溶性淀粉替代蔗糖，配置成培養(yǎng)基。移植菌餅(直徑8 mm)到上述平板培養(yǎng)基中(15 mL·皿-1)，4次重復(fù)，25 ℃培養(yǎng)。2 d后，十字交叉法測(cè)量菌落直徑。液體培養(yǎng)，6 d后，測(cè)量菌絲干質(zhì)量。②氮源。以查氏培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，分別稱取等質(zhì)量氮素的草酸氨、L-天冬氨酸、L-苯丙氨酸、DL-α-丙氨酸、硝酸鈉、硝酸氨氮源代替硝酸鉀，配置成培養(yǎng)基，移植菌餅(直徑8 mm)到上述平板培養(yǎng)基中(15 mL·皿-1)，4次重復(fù)，25 ℃培養(yǎng)。2 d后，十字交叉法測(cè)量菌落直徑。液體培養(yǎng)，6 d后，測(cè)量菌絲干質(zhì)量。

pH對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響：用1 mol·L-1HCl和1 mol·L-1NaOH調(diào)節(jié)PDA培養(yǎng)基的pH分別為4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0，向上述不同pH平板(15 mL·皿-1)中移入菌餅(直徑8 mm)，4次重復(fù)，25 ℃恒溫培養(yǎng)。2 d后，十字交叉法測(cè)量菌落直徑。液體培養(yǎng)，6 d后，測(cè)量菌絲干質(zhì)量。

溫度對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響：將直徑為8 mm的菌餅放置于PDA培養(yǎng)基平板中(15 mL·皿-1)，分別置于4、10、15、20、25、30、35、40、45 ℃下培養(yǎng)，4次重復(fù)。2 d后，十字交叉法測(cè)量菌落直徑。

光照對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響：將直徑為8 mm的菌餅放置到PDA培養(yǎng)基平板(15 mL·皿-1)中，設(shè)置連續(xù)光照、光暗交替和完全黑暗3個(gè)處理，每個(gè)處理4次重復(fù)，25 ℃恒溫培養(yǎng)，2 d后，十字交叉法測(cè)量菌落直徑。液體培養(yǎng)，6 d后，測(cè)量菌絲干質(zhì)量。

病原菌菌絲的致死溫度測(cè)定：將培養(yǎng)3 d的病原菌(試管)，分別放置到30、35、40、45、50、55、60、65、70 ℃的水浴鍋中處理10 min(預(yù)熱1 min)。水浴后立即放入冷水中降至室溫，將試管內(nèi)菌絲轉(zhuǎn)入PDA平板中，置25 ℃恒溫培養(yǎng)，4次重復(fù)，3 d后根據(jù)其是否萌發(fā)確定菌絲致死范圍。然后以1 ℃為梯度更精準(zhǔn)的確定其致死溫度[11]。

1.6室內(nèi)藥劑篩選

1.6.1供試菌株及藥劑

供試菌株為FF1。試驗(yàn)選用化學(xué)農(nóng)藥和生物農(nóng)藥共計(jì)30種。供試藥劑分別為：50%腐霉利WP(日本住友化學(xué)株式會(huì)社)；2%春雷·45%王銅WP(北興化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社)；40%菌核凈WP、50%異菌脲WP(江西禾益化工有限公司)；10%甲霜·48%錳鋅WP(深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司)；50%腐霉利WP(宜賓川安高科農(nóng)藥有限責(zé)任公司)；50%多菌靈WP(江蘇藍(lán)豐生物化工股份有限公司)；75%百菌清WP、10%苯醚甲環(huán)唑WG(先正達(dá)作物保護(hù)有限公司)；10%多抗霉素WP(績(jī)溪農(nóng)華生物科技有限公司)；25%肟菌·50%戊唑醇WG(拜耳作物科學(xué)公司)；70%甲基硫菌靈WP(江蘇龍燈化學(xué)有限公司)；77%氫氧化銅WP(浙江禾本農(nóng)藥化學(xué)有限公司)；30%醚菌酯WP(山東京博農(nóng)化有限公司)；2.1%丁香·芹酚AS(大連永豐農(nóng)藥廠)；40%氟硅唑EC(陜西恒潤(rùn)化學(xué)工業(yè)有限公司)；66.5%霜霉威AS(重慶市化工研究院)；26%甲霜·6%噁霉靈AS(南京源生化工股份有限公司)；5%唑醚·55%代森聯(lián)WG、25%吡唑醚菌酯EC(巴斯夫(中國(guó))有限公司)；12.5%硅唑·27.5%多菌靈SE(陜西恒潤(rùn)化學(xué)工業(yè)有限公司)；30%噁霉靈AS(濰坊天達(dá)植保有限公司)；70%代森錳鋅WP(利民化工股份有限公司)；30%氟菌唑WP(中農(nóng)住商(天津)農(nóng)用化學(xué)有限公司)；50%嘧菌環(huán)胺WG(陜西上格之路生物科學(xué)有限公司)；1 000億個(gè)·g-1枯草芽孢桿菌(依天得)WP(武漢天惠生物工程有限公司)；2億個(gè)·g-1木霉菌WG(云南星耀生物制品有限公司)；2億菌落·g-1哈茨木霉菌WP(美國(guó)拜沃股份有限公司)；≥300億個(gè)·g-1內(nèi)生芽孢桿菌(益微)WP(山東京青農(nóng)業(yè)科技有限公司)；0.1億菌落·g-1多粘類芽孢桿菌FG(浙江省桐廬匯豐生物化工有限公司)。

1.6.2試驗(yàn)方法

將每種藥劑配制成質(zhì)量濃度分別為1×103、1×102、1×10、1、1×10-1、1×10-2mg·L-1的含藥平板。取直徑為8 mm的菌餅，放置于含藥平板中央，菌絲面朝下，以不加藥劑作為空白對(duì)照，每個(gè)處理3次重復(fù)。恒溫培養(yǎng)箱中25 ℃培養(yǎng)2 d后，采用十字交叉法測(cè)量供試病菌在含藥培養(yǎng)基上的菌落直徑，與對(duì)照比較計(jì)算各藥劑處理對(duì)病菌的生長(zhǎng)抑制率。查機(jī)率值與死亡率(抑制率)換算表，用最小二乘法建立毒力回歸方程，計(jì)算出各藥劑對(duì)病原菌的有效中濃度(EC50)，比較病原菌對(duì)各種藥劑的敏感程度。

抑制率=((對(duì)照組菌落直徑-處理組菌落直徑)/(對(duì)照組菌落直徑-菌餅原始直徑))×100%。

2結(jié)果與分析

2.1病害癥狀

該病害主要為害非洲鳳仙幼苗的莖基部，在靠近地面的莖基部形成橢圓形或不規(guī)則的暗褐色病斑，略凹陷，水漬狀，病斑逐漸向莖基部周?chē)鷶U(kuò)展，形成繞莖病斑，病部溢縮，最后葉片萎蔫枯死。當(dāng)病斑繞莖一周后，幼苗逐漸枯死。潮濕時(shí)，病苗基部可見(jiàn)淺褐色的蛛絲網(wǎng)狀霉。

2.2病原菌的分離、純化與致病性

通過(guò)組織分離和單絲分離獲得培養(yǎng)性狀一致的9個(gè)分離物，分別命名為FF1、FF2、FF3、FF4、FF5、FF6、FF7、FF8、FF9。致病性測(cè)定結(jié)果表明：接種后5～7 d后表現(xiàn)的發(fā)病癥狀與田間觀察到的癥狀一致，對(duì)照植株未見(jiàn)異常(部分接種結(jié)果見(jiàn)圖1)。對(duì)發(fā)病部位進(jìn)行病菌的再分離，得到與原來(lái)培養(yǎng)性狀一致的分離物，證明菌株FF1～FF9均具有致病力，為該病害的病原菌。

2.3病原菌的培養(yǎng)性狀及形態(tài)

菌株FF1～FF9形態(tài)特征一致，在PDA培養(yǎng)基上菌絲均匍匐生長(zhǎng)，氣生菌絲少，菌絲呈放射狀。菌絲直徑5.54～11.48 μm，菌絲細(xì)胞多核；多為直角分枝，分枝處稍有縊縮，近分枝處有1個(gè)隔膜，不產(chǎn)生菌核(圖2)。菌落初期為灰白色或淡黃色，隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，最后全菌落變?yōu)楹稚８鶕?jù)病原菌的培養(yǎng)性狀和形態(tài)特征，可鑒定該病原菌為茄立枯絲核菌(RhizoctoniasolaniKühn)[12]。

A.EF1菌株接種植物發(fā)病癥狀及對(duì)照CK；B.EF9菌株接種植物發(fā)病癥狀及對(duì)照CK。

圖1非洲鳳仙莖基腐病菌的致病性測(cè)定結(jié)果

A.菌落形態(tài)；B、C.菌絲特征及細(xì)胞核染色。

2.4病原菌分子生物學(xué)鑒定

利用真菌特異性引物ITS4/ITS5對(duì)菌株FF1、FF7、FF9的rDNA-ITS進(jìn)行PCR擴(kuò)增，電泳檢測(cè)結(jié)果得到大小約750 bp的片段。病原菌rDNA-ITS區(qū)序列PCR產(chǎn)物經(jīng)生物公司測(cè)序?yàn)?35 bp的核苷酸序列，GenBank登錄號(hào)分別為HG934415、HG934416、HG934417。獲得的序列與GenBank中已有的序列進(jìn)行Blast分析，與RhizoctoniasolaniAG4-HG-I(DQ102447、AB000007、JN254788、KF746162)的序列同源性為99%，表明分離獲得的病菌為RhizoctoniasolaniAG4-HG-I融合群。

2.5病原菌生物學(xué)測(cè)定

2.5.1不同培養(yǎng)基對(duì)病原菌生長(zhǎng)的影響

由表1可知，非洲鳳仙莖基腐病菌在7種培養(yǎng)基中均能生長(zhǎng)，在OA培養(yǎng)基中生長(zhǎng)最快，在水瓊脂培養(yǎng)中生長(zhǎng)較慢，在5%顯著水平上存在顯著性差異。菌絲在PDA中生長(zhǎng)量最大，在水瓊脂中生長(zhǎng)量最小。

表1　培養(yǎng)基對(duì)非洲鳳仙莖基腐病菌菌絲生長(zhǎng)的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.5.2不同碳源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響

由表2可知，非洲鳳仙莖基腐病菌在7種不同碳源培養(yǎng)基中均可以生長(zhǎng)，但其生長(zhǎng)速度和生長(zhǎng)量不同，在以可溶性淀粉為碳源的培養(yǎng)中生長(zhǎng)較快，以D-木糖為碳源的培養(yǎng)基生長(zhǎng)較慢，在5%顯著水平上存在顯著性差異。在以可溶性淀粉為碳源的培養(yǎng)基中菌絲生長(zhǎng)量最大，在以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)中菌絲生長(zhǎng)量最小。

表2　碳源對(duì)非洲鳳仙莖基腐病菌菌絲生長(zhǎng)的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.5.3不同氮源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響

由表3可知，病原菌在7種不同氮源培養(yǎng)基中均能生長(zhǎng)，在硝酸鈉為氮源的培養(yǎng)中生長(zhǎng)較快，在L-苯丙氨酸為氮源的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢。病原菌在硝酸鉀為氮源的培養(yǎng)基中菌絲生長(zhǎng)量最大，在L-天冬氨酸為氮源的培養(yǎng)基中菌絲生長(zhǎng)量最低。

表3　氮源對(duì)非洲鳳仙莖基腐病菌菌絲生長(zhǎng)的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.5.4不同pH對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響

由表4可知，病菌在不同pH下均能生長(zhǎng)，在中性條件下生長(zhǎng)較好，強(qiáng)酸性和強(qiáng)堿性均不利于菌絲生長(zhǎng)，在5%顯著水平上存在顯著性差異。病原菌在中性條件下菌絲生長(zhǎng)量最大，酸性和堿性條件下菌絲生長(zhǎng)量較低。

表4　pH對(duì)非洲鳳仙莖基腐病菌菌絲生長(zhǎng)的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.5.5不同溫度對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響

由表5可知，病原菌在25～30 ℃適合病原菌生長(zhǎng)，在4、40、45 ℃溫度下病原菌不能生長(zhǎng)。

表5　溫度對(duì)非洲鳳仙莖基腐病菌菌絲生長(zhǎng)的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.5.6不同光照對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響

由表6可知，病原菌在不同的光照條件下均可以生長(zhǎng)，在5%顯著水平上無(wú)差異。病菌菌絲在半光照條件下生長(zhǎng)量最大，在5%顯著水平上不存在差異。

表6　光照對(duì)非洲鳳仙莖基腐病菌菌絲生長(zhǎng)的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。

2.5.7病原菌菌絲致死溫度的測(cè)定

菌絲致死溫度試驗(yàn)結(jié)果表明，病菌在50 ℃時(shí)可以生長(zhǎng)，在55 ℃不生長(zhǎng)；以1 ℃為梯度，最終確定菌絲致死條件為51 ℃、10 min。

2.5.8病原菌對(duì)不同殺菌劑的敏感性

由表7可知，所選的30種殺菌劑對(duì)病原菌均有抑制作用。病原菌對(duì)≥300億個(gè)·g-1內(nèi)生芽孢桿菌WP、1 000億個(gè)·g-1枯草芽孢桿菌WP、25%肟菌·50%戊唑醇WG、40%氟硅唑EC的敏感性較好，對(duì)其EC50<0.1 mg·L-1，可以作為田間防治非洲鳳仙立枯病的首選殺菌劑；50%腐霉利WP、25%吡唑醚菌酯EC、10%多抗霉素WP、50%多菌靈WP、12.5%靈硅唑·27.5%多菌靈SE、40%菌核凈WP、5%唑醚·55%代森聯(lián)WG、50%異菌脲WP次之，0.1 mg·L-120 mg·L-1。

表7　非洲鳳仙莖基腐病菌對(duì)殺菌劑的敏感性

3結(jié)論與討論

對(duì)非洲鳳仙莖基腐病的癥狀進(jìn)行描述，結(jié)合病原形態(tài)特征、培養(yǎng)特性及rDNA-ITS序列分析結(jié)果，確定該病害由RhizoctoniasolaniKühn AG4-HG-Ⅰ融合群引起。非洲鳳仙莖基腐病對(duì)非洲鳳仙的生產(chǎn)造成極大的威脅，需引起園林觀賞植物工作者的高度重視。掌握該病害的診斷特征，及時(shí)采取有效的防治措施，才能防止病害的擴(kuò)大蔓延，減少其對(duì)觀賞植物造成的重大損失。

掌握病菌的生物學(xué)特性和病害的發(fā)生規(guī)律，是進(jìn)行病害防治的必要前提。對(duì)病原菌生物學(xué)特性的研究結(jié)果表明：病菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)、光照、酸堿度等的要求并不嚴(yán)格，因此病害在營(yíng)養(yǎng)瘠薄的栽培條件下也可嚴(yán)重發(fā)生。

采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定了病菌對(duì)30種殺菌劑的敏感性，結(jié)果表明，病原菌對(duì)≥300億個(gè)·g-1內(nèi)生芽孢桿菌WP、1 000億個(gè)·g-1枯草芽孢桿菌WP、25%肟菌·50%戊唑醇WG、40%氟硅唑EC敏感性較高，可以作為田間防治非洲鳳仙莖基腐病的首選殺菌劑。為了延緩抗藥性的產(chǎn)生，建議藥劑輪換使用。

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收稿日期：2015年8月4日。

第一作者簡(jiǎn)介：孫慧穎，女，1991年7月生，吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，碩士研究生。E-mail：1185175221@qq.com。通信作者：白慶榮，吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，教授。E-mail：bbbqqqrrr@163.com。

1)科技創(chuàng)新基金(201410193005)；吉林省自然科學(xué)基金(20101565)。

責(zé)任編輯：程紅。