張鳳銀，李為，梅立（.江漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，湖北武漢，40056；2.湖北省豆類（蔬菜)植物工程技術(shù)研究中心；.中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所)

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外源水楊酸對(duì)鹽脅迫下蕹菜種子萌發(fā)及幼苗生長(zhǎng)的影響

張鳳銀1，2，李為3，梅立1
（1.江漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，湖北武漢，430056；2.湖北省豆類（蔬菜)植物工程技術(shù)研究中心；3.中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所)

摘要：用不同濃度的水楊酸（SA）（0.15、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00 mmol/L）處理0.9% NaCl脅迫的蕹菜種子，測(cè)量種子萌發(fā)指標(biāo)以及幼苗生長(zhǎng)指標(biāo)，以期研究鹽脅迫條件下，不同濃度SA對(duì)蕹菜種子萌發(fā)及幼苗生長(zhǎng)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，0.9% NaCl脅迫對(duì)蕹菜種子發(fā)芽率的影響不明顯，但顯著降低發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)，明顯抑制幼苗的芽、根以及側(cè)根生長(zhǎng)。0.15 mmol/L SA能緩解NaCl鹽脅迫作用，對(duì)蕹菜種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)的傷害，提高其抗鹽能力；而在0.25～2.00 mmol/L SA濃度范圍內(nèi)，隨SA濃度的增加，蕹菜種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)受抑制程度加重。

關(guān)鍵詞：蕹菜；水楊酸；鹽脅迫；種子萌發(fā)；幼苗生長(zhǎng)

張鳳銀（1964-），女，教授，研究方向?yàn)閳@藝植物栽培生理，E-mail：zhangfengyin0811@126.com

土壤鹽脅迫是非生物逆境因素之一[1]，當(dāng)作物受到鹽脅迫時(shí)，其生長(zhǎng)受到抑制、產(chǎn)量降低。我國(guó)大約有2 700萬hm2鹽地，占耕地面積的10%左右[2]。近20 a來，為了實(shí)現(xiàn)蔬菜周年均衡供應(yīng)的目的、大力促進(jìn)了設(shè)施園藝的發(fā)展，土壤常年連作，加上大量使用化肥等，而設(shè)施內(nèi)土壤無雨水沖刷，導(dǎo)致許多土壤產(chǎn)生次生鹽漬化[3]。因此，長(zhǎng)期以來，人們極為重視植物耐鹽機(jī)理、提高植物耐鹽性、增加鹽脅迫下農(nóng)作物產(chǎn)量等方面的研究。

水楊酸（Salicylic acid，SA)是普遍存在于植物體內(nèi)的一種酚類化合物，既是細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)分子，又是一種內(nèi)源性激素，參與調(diào)節(jié)許多植物的生理過程[4]。研究發(fā)現(xiàn)，SA能誘導(dǎo)植物系統(tǒng)抗病性[5]，提高植物對(duì)非生物逆境的抗性，如緩解重金屬對(duì)植物的毒害作用[4]、提高植物抗鹽性[6，7]、加快種子萌發(fā)速率等[8]。

蕹菜（Ipomoea aquatica Forsk.)，又名空心菜、竹葉菜，在我國(guó)的華南、華中、華東及西南各地栽培普遍，是夏秋季的重要蔬菜之一。蕹菜作為一種水生蔬菜，可以水面栽培，但實(shí)際生產(chǎn)中主要進(jìn)行旱地栽培。蕹菜目前也是促成栽培的一種綠葉蔬菜，其生長(zhǎng)發(fā)育也常受到次生鹽害的影響。因此，本試驗(yàn)試圖通過研究在鹽脅迫環(huán)境中，不同濃度水楊酸對(duì)蕹菜種子萌發(fā)以及幼苗生理指標(biāo)的影響，從而找到能緩解鹽脅迫的有效水楊酸濃度。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2014年4～5月在江漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心進(jìn)行。以泰國(guó)王蕹菜種子為試驗(yàn)材料。NaCl，化學(xué)純，來自天津市福晨化學(xué)試劑廠；水楊酸（SA)來自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2試驗(yàn)方法

①種子萌發(fā)選擇籽粒飽滿、大小均勻一致、種皮完好的種子，先用55℃溫水浸泡15 min，然后繼續(xù)浸泡2 h撈出，將表面水分吸干，擺放在鋪有2層濾紙的培養(yǎng)皿中。分別添加以下處理液各15 mL，即蒸餾水（CK，A)、0.9% NaCl溶液（B)、0.9% NaCl+ 0.15 mmol/L SA混合液（C)、0.9% NaCl+0.25 mmol/L SA混合液（D)、0.9% NaCl+0.50 mmol/L SA混合液（E)、0.9% NaCl+1.00 mmol/L SA混合液（F)、0.9% NaCl+ 1.50 mmol/L SA混合液（G)、0.9% NaCl+2.00 mmol/L SA混合液（H)。各處理均重復(fù)3次，每培養(yǎng)皿放置50粒種子。萌發(fā)試驗(yàn)于25℃恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。每天觀察種子的發(fā)芽情況，統(tǒng)計(jì)發(fā)芽種子數(shù)。每隔2 d更換1次濾紙，并添加15 mL相應(yīng)濃度的處理液。種子萌發(fā)10 d結(jié)束發(fā)芽試驗(yàn)。

②指標(biāo)測(cè)定方法萌發(fā)指標(biāo)發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)以及活力指數(shù)測(cè)定參照顏啟傳[9]方法。種子萌發(fā)10 d后，從培養(yǎng)皿中隨機(jī)取15株幼苗，測(cè)量其芽長(zhǎng)、根長(zhǎng)，并統(tǒng)計(jì)側(cè)根數(shù)。

1.3數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)用SPSS v17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析和多重比較，其中多重比較采用Duncan's新復(fù)極差測(cè)驗(yàn)法。

2　結(jié)果與分析

2.1不同濃度SA對(duì)鹽脅迫下蕹菜種子萌發(fā)的影響

由表1可知，經(jīng)0.9% NaCl處理后，蕹菜種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)以及活力指數(shù)顯著低于CK，而兩者的發(fā)芽率差異不明顯，表明0.9% NaCl鹽脅迫降低了蕹菜種子活力、延緩了發(fā)芽速度，導(dǎo)致發(fā)芽不整齊。在0.9% NaCl鹽脅迫條件下，0.15 mmol/L SA明顯緩解了鹽脅迫對(duì)蕹菜種子萌發(fā)的鹽害，而添加0.25、0.50、1.00、1.50、2.00 mmol/L SA，不僅未減緩鹽脅迫的影響，反而使蕹菜種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)以及活力指數(shù)隨著SA濃度的增加而顯著降低。

2.2不同濃度SA對(duì)鹽脅迫下蕹菜萌發(fā)期幼苗生長(zhǎng)的影響

由表2可知，0.9% NaCl處理后，蕹菜種子萌發(fā)期幼苗的芽長(zhǎng)、根長(zhǎng)和側(cè)根數(shù)均顯著低于CK。說明0.9% NaCl鹽脅迫明顯抑制萌發(fā)期蕹菜幼苗的生長(zhǎng)。在0.9% NaCl鹽脅迫下，濃度為0.15 mmol/L SA明顯緩解NaCl對(duì)蕹菜幼苗生長(zhǎng)的脅迫作用，提高幼苗的抗鹽能力，促進(jìn)生長(zhǎng)；濃度為0.25、0.50、1.00、1.50、2.00 mmol/L SA處理使得蕹菜萌發(fā)期幼苗的芽長(zhǎng)、根長(zhǎng)以及側(cè)根數(shù)均顯著低于對(duì)照，且隨SA濃度的增加，蕹菜萌發(fā)期幼苗的芽長(zhǎng)、根長(zhǎng)以及側(cè)根數(shù)呈下降趨勢(shì)。這說明0.25～2.00 mmol/L SA未能緩解鹽脅迫作用，而且隨SA濃度的增加，蕹菜萌發(fā)期幼苗生長(zhǎng)受抑制程度增加。

3　討論與結(jié)論

植物種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)期是對(duì)鹽脅迫最敏感的階段之一[10]，如果這個(gè)階段受到鹽脅迫，輕則種子發(fā)芽率降低，出苗時(shí)間延遲；重則，種子完全失去發(fā)芽能力或者幼苗死亡[11]。從生理方面分析，鹽脅迫對(duì)種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制作用是由于滲透脅迫引起的植物細(xì)胞生理性缺水，或者由于細(xì)胞質(zhì)遭到破壞，使得溶質(zhì)外滲；或者由于離子毒害導(dǎo)致細(xì)胞膜的選擇性被破壞，使得細(xì)胞生理功能遭到破壞[12]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng)過0.9% NaCl處理后，蕹菜種子的發(fā)芽速度顯著降低、發(fā)芽整齊度顯著下降、萌發(fā)期幼苗生長(zhǎng)受到明顯抑制。

表1　不同濃度SA對(duì)鹽脅迫下蕹菜種子萌發(fā)的影響

表2　不同濃度SA對(duì)鹽脅迫下蕹菜幼苗生長(zhǎng)的影響

在逆境如高鹽、干旱、低溫或者高溫條件下，植物體內(nèi)活性氧的含量增加，引起膜功能異常[13]，導(dǎo)致植物生長(zhǎng)受到抑制。水楊酸扮演信號(hào)分子或者化學(xué)信號(hào)，誘導(dǎo)植物在不利環(huán)境中產(chǎn)生保護(hù)物質(zhì)[14]。大量研究表明，在逆境下，適宜濃度的外源水楊酸可以提高植物體內(nèi)細(xì)胞膜保護(hù)酶SOD、POD等的活性，消除逆境誘導(dǎo)產(chǎn)生的活性氧自由基，降低膜脂過氧化，減少M(fèi)DA累積，維持細(xì)胞膜的穩(wěn)定性和完整性，提高植物的抗逆性[15]。但植物不同，外源水楊酸的適宜濃度不同，如1 g/L SA、50 mg/L SA、1.0 mmol/L SA分別能提高小麥種子[15]、鳳仙花種子[16]、花椰菜種子[17]的耐鹽性，150 mg/L SA能提高黃瓜幼苗的耐鹽性[7]。本研究發(fā)現(xiàn)，SA濃度為0.15 mmol/L時(shí)能緩解鹽脅迫對(duì)蕹菜種子萌發(fā)期的傷害，而濃度為0.25～2.00 mmol/L時(shí)沒有緩解鹽脅迫作用，反而隨著SA濃度升高，對(duì)蕹菜種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)的抑制作用加強(qiáng)。

綜上所述，0.9% NaCl鹽脅迫抑制蕹菜種子萌發(fā)和幼苗的生長(zhǎng)，濃度為0.15 mmol/L的SA能緩解鹽害作用。

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Effects on Exogenous Salicylic Acid on Seed Germination and Seedling Growth of Ipomoea aquatica under Salt Stress

ZHANG Fengyin1,2,LI Wei3,MEI Li1
(1.College of Life Sciences,Jianghan University,Wuhan 430056;2.Hubei Province Engineering Research Center of Legume Plants;3.Institute of Aquatic Biology,Chinese Academy of Sciences)

Abstract:We treated seeds of Ipomoea aquatic with different concentration of SA(0.15,0.25,0.50,1.00,1.50,2.00 mmol/L)under 0.9% NaCl stress,and measured the indexes of seed germination and seedling growth,in order to analyze the effects of different SA concentrations on seed germination and seedling growth ofI.aquatic under 0.9% NaCl stress.The results showed that,0.9% NaCl stress did not affect germination rate significantly,but germination potential,germination index and vigor index significantly decreased,in addition,inhibited the growth of buds,roots and lateral roots obviously.0.15 mmol/L SA could improve the salt resistance ofI.aquatic by relieving the damage of NaCl stress to seed germination and seedling growth.While as the concentration of SA increased in the range of 0.25-2.00 mmol/L,the inhibition degree of seed germination and seedling growth aggravated.

Key words:Ipomoea aquatic;Salicylic acid;Salt stress;Seed germination;Seedling growth

收稿日期：2015-10-20

基金項(xiàng)目：國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（2012BAD27B02-07）

DOI:10.3865/j.issn.1001-3547.2016.04.021

中圖分類號(hào)：S636.9；S645.9

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1001-3547（2016)04-0053-03