勞雪芬+曹錚+湯里平+楊云喬+姚秋霞+尚秋晨+許小琴

摘要： 為研究富硒女貞子對(duì)山羊生產(chǎn)性能、血液學(xué)和血清生化指標(biāo)的影響，選取30只山羊隨機(jī)均分為5組，其中C組飼喂基礎(chǔ)日糧，CLL組基礎(chǔ)日糧中添加女貞子30 g/（只·d），LSLL組、MSLL組、HSLL組基礎(chǔ)日糧中分別添加富硒女貞子10、30、50 g/（只·d），給藥組于試驗(yàn)開始的第5天給藥，連續(xù)5 d。進(jìn)行產(chǎn)奶量、血液中WBC、RBC、HGB含量、血清中TP、ALB、ALT、AST、CK、LDH的水平測(cè)定。結(jié)果顯示：富硒女貞子和普通女貞子均能提高山羊的產(chǎn)奶量，在試驗(yàn)1～7 d、22～38 d產(chǎn)奶量增長率由大到小的排序?yàn)椋篖SLL組>MSLL組>HSLL組>CLL組>C組；CLL組能顯著提高山羊RBC（P<0.05），MSLL組、CLL組均能顯著提高山羊HGB含量（P<0.05）；LSLL組、MSLL組、HSLL組和CLL組均能顯著提高山羊血清中TP含量（P<0.05），LSLL組、MSLL組和CLL組均能顯著提高山羊血清中ALB含量（P<0.05），LSLL組能顯著降低血清中AST活性（P<0.05）；添加富硒女貞子對(duì)山羊WBC含量、ALT、CK、LDH活性均無顯著影響（P>0.05）。說明日糧中添加富硒女貞子在提高山羊產(chǎn)奶量的同時(shí)，亦提高了血液RBC、HGB和血清TP、ALB的含量，降低了血清AST活性，對(duì)山羊WBC、ALT、CK、LDH活性影響不明顯。

關(guān)鍵詞： 富硒女貞子；山羊；生產(chǎn)性能；血液學(xué)；血清生化

中圖分類號(hào)： S853.72 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2016）03-0256-04

隨著規(guī)?；?、集約化養(yǎng)殖模式的不斷發(fā)展，使用抗生素類添加劑來提高動(dòng)物生產(chǎn)水平、降低發(fā)病率已成為普遍現(xiàn)象，但長期不加選擇地濫用抗生素類飼料添加劑，導(dǎo)致了一系列耐藥微生物的出現(xiàn)，給畜禽疾病的防治帶來了新的難題，亦給人類健康帶來了潛在的威脅。中草藥由于含有多糖、生物堿、蛋白質(zhì)、氨基酸、苷類、礦物質(zhì)元素和維生素等生物活性物質(zhì)，使其具有健脾開胃、提高畜禽生長速度、增強(qiáng)動(dòng)物免疫機(jī)能、改善動(dòng)物產(chǎn)品品質(zhì)、提高飼料報(bào)酬等效果而備受關(guān)注[1]。中草藥資源豐富，其作用和安全性已被人們所認(rèn)可，作為動(dòng)物飼料添加劑是近年來國際動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)研究的一大熱點(diǎn)。本研究的目的是考察富硒女貞子對(duì)山羊的生產(chǎn)性能、血液學(xué)和血液生化指標(biāo)的影響，為新型藥源素材研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)山羊 選用30只體質(zhì)量、胎次、泌乳量相近，分娩日期與體況相近并處于泌乳期的成年健康薩能山羊作為試驗(yàn)對(duì)象。試驗(yàn)地點(diǎn)：上海浦東新區(qū)杰隆生物制品股份有限公司試驗(yàn)羊場(chǎng)。

1.1.2 試驗(yàn)藥材 富硒女貞子（硒含量1.88 μg/g）、對(duì)照藥女貞子由筆者所在實(shí)驗(yàn)室保存[2]，60 ℃烘干粉碎。

1.1.3 主要儀器 BS-120生化分析儀、BC-2800vet血液細(xì)胞分析儀（邁瑞mindray），通用臺(tái)式冷凍離心機(jī)（Eppendorf公司），一次性使用負(fù)壓采血管（江蘇榮業(yè)科技有限公司產(chǎn)品），核酸蛋白濃度檢測(cè)儀（美國伯騰儀器有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 分組及處理方法 選用30只泌乳期健康薩能山羊，經(jīng)編號(hào)隨機(jī)均分5組，分別為空白對(duì)照組（C組，基礎(chǔ)日糧）和4個(gè)試驗(yàn)給藥組，即普通女貞子組（CLL組，基礎(chǔ)日糧+女貞子30 g/（只·d））、富硒女貞子低劑量組[LSLL組，基礎(chǔ)日糧+富硒女貞子10 g/（只·d）]、富硒女貞子中劑量組[MSLL組，基礎(chǔ)日糧+富硒女貞子30 g/（只·d）]、富硒女貞子高劑量組[HSLL組，基礎(chǔ)日糧+富硒女貞子50 g/（只·d）]，飼養(yǎng)于同一羊舍，采用舍飼圈養(yǎng)方式飼養(yǎng)，自由飲水。試驗(yàn)期從2014年5月5日至6月12日（共38 d），給藥組于試驗(yàn)開始的第5天給藥，連續(xù)5 d。

1.2.2 測(cè)定指標(biāo)

1.2.2.1 產(chǎn)奶量的采集與分析 試驗(yàn)期間每天記錄羊的產(chǎn)奶量，試驗(yàn)結(jié)束后統(tǒng)計(jì)分析每組產(chǎn)奶量的變化規(guī)律。

1.2.2.2 血液樣品的采集保存與分析 在試驗(yàn)1、7、14、21、38 d的06：30，試驗(yàn)羊空腹?fàn)顟B(tài)下頸靜脈無菌采血7 mL，分成2份，分別為：2 mL置于含EDTA-K2抗凝劑的負(fù)壓采血管進(jìn)行血液學(xué)指標(biāo)的測(cè)定；5 mL置于負(fù)壓采血管常溫保存，待血清析出后離心（3 000 r/min，4 ℃，10 min），血清分裝于EP管中，-20 ℃保存，用于檢測(cè)血清生化指標(biāo)含量。血液學(xué)指標(biāo)：主要檢測(cè)白細(xì)胞數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞數(shù)（RBC）和血紅蛋白（HGB），均采用BC-2800vet血液細(xì)胞分析儀測(cè)定。血清生化指標(biāo)：采用BS-120生化分析儀測(cè)定血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、肌酸磷酸激酶（CK）和乳酸脫氫酶（LDH）的含量。樣品測(cè)定所用試劑盒均購自深圳邁瑞公司。

1.3 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，運(yùn)用方差分析進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)結(jié)果以x±s表示，P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 富硒女貞子對(duì)山羊產(chǎn)奶量的影響

由表1可知，隨著時(shí)間的延長，C組的產(chǎn)奶量呈先上升后下降的趨勢(shì)，富硒女貞子各劑量組的產(chǎn)奶量均呈先上升再下降最后上升的趨勢(shì)，CLL組的產(chǎn)奶量一直呈上升趨勢(shì)。試驗(yàn)1～7 d各組的產(chǎn)奶量均增加，且各給藥組的增長率較C組大（增長率是指該組某時(shí)間段的產(chǎn)奶量與同組試驗(yàn)前5 d的平均產(chǎn)奶量相比）；8～14 d、15～21 d各組的產(chǎn)奶量上升率較1～7 d小甚至下降；22～38 d時(shí)，各給藥組的產(chǎn)奶量均增加，C組則下降。在試驗(yàn)1～7 d、22～38 d產(chǎn)奶量增長率由大到小的排序?yàn)椋篖SLL組>MSLL組>HSLL組>CLL組>C組。

2.2 富硒女貞子對(duì)山羊血液學(xué)指標(biāo)的影響

由表2可知，給藥后各組WBC都有所提高，但差異不顯著（P>0.05），C組WBC在各時(shí)間點(diǎn)變化不大。各給藥組的RBC隨著試驗(yàn)時(shí)間的延長變化不大，在試驗(yàn)7、14、21 d時(shí)，CLL組的RBC顯著高于C組（P<0.05），其余時(shí)間點(diǎn)各組間RBC差異不顯著（P>0.05）。各組的HGB含量隨著試驗(yàn)時(shí)間的延長呈先下降后上升的趨勢(shì)。在試驗(yàn)1、7、21、38 d時(shí)MSLL組的HGB含量均顯著高于C組（P<0.05），在試驗(yàn)14、21、38 d時(shí)CLL組的HGB含量均顯著高于C組（P<005），其余時(shí)間點(diǎn)各組間RBC差異不顯著（P>0.05）。

2.3 富硒女貞子對(duì)山羊血清生化指標(biāo)的影響

由表3可知，各給藥組的TP與ALB含量隨著時(shí)間的延長均有所提高，C組則有所下降，但差異均不顯著（P>0.05）。其中14 d時(shí)各劑量富硒女貞子組的TP含量極顯著高于C組（P<0.01），21、38 d時(shí)LSLL組的TP含量顯著高于C組（P<0.05）；7 d時(shí)LSLL組、CLL組的ALB含量顯著高于C組（P<0.05），38 d時(shí)LSLL組、MSLL組、CLL組的ALB含量顯著高于C組（P<0.05）。各組ALT、AST的活性隨著試驗(yàn)時(shí)間的延長均呈下降趨勢(shì)。38 d時(shí)LSLL組、CLL組、C組的ALT活性顯著低于7、14 d的活性（P<0.05），MSLL組、HSLL組的ALT活性隨著時(shí)間的延長差異不顯著（P>0.05）；38 d時(shí)MSLL組的AST活性顯著低于7 d的活性（P<0.05），38 d時(shí)C組的AST活性顯著低于14 d的活性（P<0.05），14 d 時(shí)LSLL組的AST活性顯著低于C組（P<0.05），38 d時(shí)CLL組顯著高于C組（P<0.05）。各組CK與LDH的活性隨著時(shí)間的延長變化不大，差異不顯著（P>0.05）。

3 討論

3.1 富硒女貞子對(duì)山羊產(chǎn)奶量的影響

產(chǎn)奶量是衡量奶畜泌乳性能高低最重要的指標(biāo)，也是奶農(nóng)收益的可靠保障。影響產(chǎn)奶量的因素有很多，概括起來主要包括2個(gè)方面：遺傳因素和飼養(yǎng)管理?xiàng)l件。據(jù)測(cè)定，奶山羊產(chǎn)奶量的遺傳力為0.3～0.35，因此，其產(chǎn)奶量的高低主要受飼養(yǎng)管理等環(huán)境因素的影響，而飼糧營養(yǎng)水平就是主要的環(huán)境因素之一。中草藥一般含有多種營養(yǎng)成分，如維生素、礦物質(zhì)、微量元素等，大多兼有營養(yǎng)與藥用2種屬性，在防病治病的同時(shí)，用作飼料添加劑可促進(jìn)動(dòng)物生長、提高生產(chǎn)性能。研究表明，日糧中添加1%的女貞子能顯著提高產(chǎn)蛋雞的產(chǎn)蛋量[3]。李慶試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，肌注復(fù)方微量元素注射液“生命元”能明顯提高山羊日采食量，顯著增加日增質(zhì)量和降低料質(zhì)量比[4]。張瑞霜等發(fā)現(xiàn)日糧中添加1%女貞子粉可使蛋雞平均日產(chǎn)蛋量和產(chǎn)蛋率較對(duì)照組顯著提高了20.09%和18.75%[5]。崔國強(qiáng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)飼料中添加0.6 mg/kg的亞硒酸鈉與0.8 mg/kg酵母硒組合對(duì)促進(jìn)種母雞采食量、提高產(chǎn)蛋率和蛋質(zhì)量、降低料蛋比的效果最好[6]。吳顯實(shí)研究發(fā)現(xiàn)日糧中添加富硒益生菌、益生菌或亞硒酸鈉均能提高奶牛產(chǎn)奶量，且提高效果由高到低排序?yàn)椋焊晃嫔M>益生菌組>亞硒酸鈉組>對(duì)照組[7]。魯玉花等報(bào)道日糧中補(bǔ)硒可極顯著提高山羊的日增質(zhì)量[8]。張春香等發(fā)現(xiàn)0.3 mg/kg硒水平可以促進(jìn)山羊的生長和提高飼料的利用率[9]。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼料中添加各劑量富硒女貞子粉和普通女貞子粉均能提高山羊的產(chǎn)奶量，在試驗(yàn)1～7 d、22～38 d產(chǎn)奶量增長率由大到小的排序?yàn)椋篖SLL組>MSLL組>HSLL組>CLL組>C組。表明飼料中添加富硒女貞子粉、普通女貞子粉均能提高山羊產(chǎn)奶量，這可能是飼料中添加的富硒女貞子粉和普通女貞子粉中含有多糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、齊墩果酸等物質(zhì)，可以補(bǔ)充和提高飼料的營養(yǎng)價(jià)值，進(jìn)而提高山羊的生產(chǎn)性能。葉面噴施亞硒酸鈉水溶液可提高作物對(duì)硒的生物利用率，植物通過自身的生理代謝，將生物活性低的無機(jī)硒轉(zhuǎn)化成以硒蛋白、硒多糖為主的有機(jī)硒，從而提高了女貞子的營養(yǎng)價(jià)值和藥效[10]。這是富硒女貞子提高山羊生產(chǎn)性能效果較普通女貞子好的原因。且每只山羊添加10 g富硒女貞子（硒的總含量為18.8 μg/g）的效果最好。此劑量是根據(jù)《中華人民共和國獸藥典》（2010年版）中女貞子的劑量確定的推薦劑量，30、50 g/（頭·d）是其推薦劑量的3、5倍。結(jié)果表明添加30、50 g/（頭·d）富硒女貞子對(duì)山羊產(chǎn)奶量均有促進(jìn)作用，但其作用與富硒女貞子劑量不呈正相關(guān)，且作用效果低于10 g/（頭·d）。由此可見，日糧中添加10 g/（頭·d）富硒女貞子的效果較好，且血液學(xué)、血清生化指標(biāo)的試驗(yàn)結(jié)果均證明了這一結(jié)論。

3.2 富硒女貞子對(duì)山羊血液學(xué)指標(biāo)的影響

血液是動(dòng)物內(nèi)環(huán)境的重要組成部分，參與動(dòng)物新陳代謝，是體內(nèi)代謝原料、廢物運(yùn)輸及基礎(chǔ)代謝反應(yīng)進(jìn)行的重要場(chǎng)所。紅細(xì)胞通過血紅蛋白運(yùn)輸O2、CO2和營養(yǎng)物質(zhì)，對(duì)機(jī)體產(chǎn)生的酸性或堿性物質(zhì)起緩沖作用；白細(xì)胞能刺激機(jī)體增強(qiáng)對(duì)外源抗原的抵抗力，反映機(jī)體免疫功能水平的高低。所以血液對(duì)動(dòng)物來說是十分重要的，其成分的變化往往反映機(jī)體的代謝和健康情況。李慶試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，肌注復(fù)方微量元素注射液“生命元”能適度提高波爾山羊的白細(xì)胞數(shù)，顯著提高其紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白含量[4]。張春香等試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)日糧中添加0.3、0.5 mg/kg亞硒酸鈉組WBC顯著升高，添加0.1、0.3 mg/kg 亞硒酸鈉組RBC顯著升高，改善了山羊的免疫狀況[9]。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼料中添加富硒女貞子粉和普通女貞子粉能適度提高山羊的白細(xì)胞數(shù)，增強(qiáng)奶山羊抵抗力。飼料中添加普通女貞子粉組的紅細(xì)胞數(shù)顯著高于空白對(duì)照組，添加30 g/（頭·d） 富硒女貞子粉和普通女貞子粉組的血紅蛋白含量顯著高于空白對(duì)照組。由此可見，飼料中添加 30 g/（頭·d） 富硒女貞子粉和普通女貞子粉均能顯著提高山羊的紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白含量。此結(jié)果與上述報(bào)道一致。

3.3 富硒女貞子對(duì)山羊血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)的改變是組織細(xì)胞通透性發(fā)生改變和機(jī)體新陳代謝機(jī)能發(fā)生改變的反映，也是反映機(jī)體代謝狀況最敏感的一類指標(biāo)。

血清總蛋白是由白蛋白和球蛋白2個(gè)部分組成，總蛋白含量高，有利于提高代謝水平和免疫力，促進(jìn)動(dòng)物健康快速生長。血清蛋白質(zhì)是動(dòng)物機(jī)體最主要的貯存蛋白質(zhì)之一，在畜體氮素營養(yǎng)良好時(shí)能形成蛋白質(zhì)的貯備。而當(dāng)?shù)夭蛔銜r(shí)，貯存蛋白質(zhì)則被動(dòng)物機(jī)體用來維持重要的組織結(jié)構(gòu)和代謝機(jī)能。因此，血清蛋白質(zhì)對(duì)動(dòng)物的生產(chǎn)性能具有重要的生理意義。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，7、38 d時(shí)富硒女貞子各劑量組和普通女貞子組的TP和ALB含量顯著高于空白對(duì)照組，且富硒女貞子低劑量組效果最好。表明日糧中添加富硒女貞子和普通女貞子均能提高山羊血清TP和ALB的含量，即富硒女貞子和普通女貞子能加強(qiáng)山羊血清蛋白質(zhì)合成代謝，促進(jìn)山羊的生長發(fā)育，尤以10 g/（頭·d）富硒女貞子效果最優(yōu)。

轉(zhuǎn)氨酶是催化氨基酸與酮酸之間氨基轉(zhuǎn)移的一類酶。普遍存在于動(dòng)物、植物組織和微生物中，心肌、腦、肝、腎等動(dòng)物組織中含量較高。ALT和AST反映了蛋白質(zhì)合成和分解的狀況。ALT主要是催化氨基酸在丙氨酸和谷氨酸之間轉(zhuǎn)移，在非必需氨基酸的合成和蛋白質(zhì)分解代謝中起重要的中介作用。AST催化谷氨酸與草酰乙酸之間的轉(zhuǎn)氨作用，以心臟中活力最大，其次為肝臟。正常情況下血清ALT和AST活性很低，當(dāng)這些組織細(xì)胞受損或通透性增大時(shí)，可有大量的ALT和AST溢入血清，造成血清中ALT和AST的活性升高。故可根據(jù)血清中ALT和AST活性的變化，作為診斷心、肝功能的指標(biāo)之一[11]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示各試驗(yàn)組血清ALT和AST活性與空白對(duì)照組相比有降低趨勢(shì)，14 d時(shí)富硒女貞子低劑量組的AST活性顯著低于空白對(duì)照組，說明日糧中添加富硒女貞子和普通女貞子對(duì)山羊心臟和肝臟無損害，在一定程度上驗(yàn)證了其安全性。

CK是一種器官特異性酶，以骨骼肌含量最高，其功能是催化三磷酸腺苷中的高能磷酸鍵轉(zhuǎn)移到磷酸分子上，生成磷酸肌酸而貯存能量[12]。應(yīng)激可使動(dòng)物采食量下降、糖原降低，因肌肉功能不足而導(dǎo)致肌肉營養(yǎng)不良，從而使血液CK活性升高，故CK活性的升高是應(yīng)激反應(yīng)的一個(gè)重要特征。本試驗(yàn)各組的CK活性變化不大，差異不顯著。表明富硒女貞子和普通女貞子對(duì)山羊血清的CK活性影響不明顯。提示本試驗(yàn)期間山羊沒有受到應(yīng)激。

LDH催化丙酮酸與L-乳酸之間的還原與氧化反應(yīng)，是糖酵解和糖異生的主要酶之一，廣泛存在于動(dòng)物機(jī)體所有組織中，沒有器官特異性。但腎、心肌、骨骼肌含量最為豐富，其次是肝、脾、胰及肺組織內(nèi)較多。若器官或組織損傷，可釋放LDH至血液中，血清該酶含量即見增高。本試驗(yàn)各組的LDH活性變化不大，差異不顯著。表明富硒女貞子和普通女貞子對(duì)山羊血清的LDH活性影響不明顯。提示本試驗(yàn)期間富硒女貞子和普通女貞子對(duì)山羊器官組織無損害。

4 結(jié)論

日糧中添加富硒女貞子、普通女貞子均能提高山羊產(chǎn)奶量，且添加10 g/（頭·d）富硒女貞子的效果最好；添加30 g/（頭·d） 富硒女貞子和普通女貞子能顯著提高山羊的RBC和HGB含量，且均能提高血清中TP、ALB含量，降低了AST活性，但對(duì)山羊WBC、ALT、CK、LDH影響不明顯。

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