徐惠敏曹紹歧

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CyclinD1、p73和p27在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義

徐惠敏曹紹歧

【摘要】目的考察cyclinD1、p73和p27在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法選取60例結(jié)直腸癌患者腫瘤組織和30例正常組織中cyclinD1、p73和p27的表達(dá)水平及與臨床指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果cyclinD1蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)率為68.3%(41/60)顯著高于正常組織中的23.3% (7/30) (P＜0.05)，其陽性率與侵潤深度、淋巴轉(zhuǎn)移和dukes分期相關(guān)(P＜0.01)。p73蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)率為58.3% (35/60)顯著高于正常組織中的3.3%(1/30) (P＜0.01)，其陽性率與分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移和dukes分期相關(guān)(P＜0.05)。p27蛋白在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)率為53.3%(32/60)，顯著低于正常組織中的80.0% (24/30) (P＜0.05)，其陽性率與分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移和dukes分期相關(guān)(P＜0.01)。結(jié)論cyclinD1、p73和p27蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)具有特異性，對三者進(jìn)行檢測有助于預(yù)后判斷。

【關(guān)鍵詞】結(jié)直腸癌; cyclinD1; p73; p27

結(jié)直腸癌是發(fā)病率最高的消化道腫瘤，其發(fā)病率為所有腫瘤發(fā)病率前三，致死率為前五，是影響居民健康的重要疾?。?］。與其他腫瘤疾病類似，結(jié)直腸癌近年來的發(fā)病率處于上升趨勢［2］。原癌基因和抑癌基因的突變和表達(dá)對于結(jié)直腸癌的發(fā)生具有重要影響［3］。CyclinD、p73和p27蛋白均是細(xì)胞周期調(diào)控蛋白，參與了多種癌癥的發(fā)生和發(fā)展［4，5］。因此，考察三者在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)水平及與臨床特征的相關(guān)性有助于我們加深對結(jié)直腸癌發(fā)生和發(fā)展的了解。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2011年1月至2014年1月手術(shù)治療的結(jié)直腸癌患者60例，其中男35例，女25例;年齡39～80歲，平均年齡(55.3±8.9)歲。Duke分期，A期7例、B期10例、C期27例、D期16期。所有患者未行放療或化療。

1.2方法采用鼠抗人cyclinD1、p73和p27免疫組化多克隆抗體，并使用由上海生工公司提供的免疫組化SP超敏試劑盒，嚴(yán)格依照試劑盒說明書進(jìn)行操作。以胞內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽信號，每次染色均設(shè)置陰性及陽性對照。高倍鏡下陽性細(xì)胞數(shù)百分比記分:陽性細(xì)胞5%～25%記1分，26%～50% 2分，51%～75%3分，＞75%4分。染色記分:無染色或與背景相同記0分，淡黃色顆粒為1分，棕黃色為2分、黃褐色為3分。兩項(xiàng)結(jié)果相乘分?jǐn)?shù)大于或等于兩份為陽性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1三種蛋白在癌組織和健康組織中的表達(dá)差異在結(jié)腸癌組織中，p27蛋白、p73蛋白及cyclinD1蛋白的表達(dá)率分別為53.3% (32/60)、58.3% (35/60)、68.3%(41/60) ;在正常組織中，p27蛋白、p73蛋白及cyclinD1蛋白的表達(dá)率分別為80.0% (24/30)、3.3% (1/30)、23.3%(7/30)。2組比較，p27蛋白、p73蛋白及cyclinD1蛋白的表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見圖1～3。

圖1　p27在結(jié)腸癌腺瘤中的陽性表達(dá)(免疫組化×100)

圖2　p73在結(jié)腸癌腺瘤中的陽性表達(dá)(免疫組化×400)

圖3　cyclin D1蛋白在結(jié)腸癌腺瘤中的陽性表達(dá)(免疫組化×400)

2.2p27蛋白結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床特征關(guān)系p27蛋白在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)率為53.3% (32/60)顯著低于正常組織中的80.0% (24/30) (P＜0.05)，其陽性率與分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移和dukes分期相關(guān)(P＜0.01)。見表1。

表1　p27蛋白結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床特征關(guān)系　例(%)

2.3p73蛋白結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床特征關(guān)系p73蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)率為58.3% (35/60)顯著高于正常組織中的3.3% (1/30) (P＜0.01)，其陽性率與分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移和dukes分期相關(guān)(P＜0.05)。見表2。

表2　p73蛋白結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床特征關(guān)系　例(%)

2.4cyclinD1蛋白結(jié)直腸癌表達(dá)與臨床特征關(guān)系cyclinD1蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)率為68.3%(41/60)顯著高于正常組織中的23.3% (7/30) (P＜0.05)，其陽性率與浸潤深度、淋巴轉(zhuǎn)移和dukes分期相關(guān)(P＜0.01)。見表3。

3　討論

近年來，癌癥相關(guān)基因在結(jié)直腸癌及其他癌癥中的表達(dá)水平差異得到了越來越多的重視。CyclinD蛋白是G1期細(xì)胞周期蛋白，具有啟動細(xì)胞周期和促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)行蛋白合成的功能，過量表達(dá)的cyclinD蛋白可以使細(xì)胞從G1期加速進(jìn)入S期，進(jìn)而加快細(xì)胞增殖［6］。曲福杰［7］研究顯示結(jié)直腸癌患者中cyclinD蛋白陽性率為70%且cyclinD和CD15共表達(dá)與結(jié)直腸癌分化程度、浸潤深度、淋巴轉(zhuǎn)移情況和Dukes分期均有相關(guān)性。本研究證實(shí)，cyclinD1蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)率為68.3%(41/60)顯著高于正常組織中的23.3%(7/30)，其陽性率與浸潤深度、淋巴轉(zhuǎn)移和dukes分期相關(guān)。浸潤程度較低、存在淋巴轉(zhuǎn)移和dukes分期較高的組織中陽性率較高，提示cyclinD蛋白的表達(dá)促進(jìn)了癌癥的發(fā)生和發(fā)展但卻會抑制腫瘤細(xì)胞的浸潤。

P73蛋白與腫瘤抑制蛋白p53具有較高的同源性，但其在癌癥組織中的表達(dá)量卻高于正常組織［8］。p73在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中的作用是發(fā)揮抑制作用還是促進(jìn)作用目前尚未有公論。Prabhu等［9］證實(shí)p73基因的表達(dá)和激活會導(dǎo)致結(jié)直腸癌出現(xiàn)耐藥性。王玲玲等［10］發(fā)現(xiàn)p73基因mRNA在大腸癌組織中的表達(dá)水平顯著高于健康組織。在本研究中，p73蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)率為58.3%(35/60)顯著高于正常組織中的3.3%(1/30) (P＜0.01)，其陽性率與分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移和dukes分期相關(guān)(P＜0.05)。低分化、存在淋巴轉(zhuǎn)移及dukes分期較高的組織中p73蛋白陽性率較高，提示與cyclinD蛋白類似，p73的表達(dá)促進(jìn)了癌癥的發(fā)生和發(fā)展。

p27蛋白是細(xì)胞周期的負(fù)性調(diào)節(jié)因子，可以一直cyclinE-CDK2復(fù)合物的生理活性將細(xì)胞周期停滯進(jìn)而發(fā)揮阻滯細(xì)胞過度增殖的作用［11］。已有研究證實(shí)，p27的表達(dá)下調(diào)會導(dǎo)致多種癌癥的發(fā)生［12］。在本研究中，p27蛋白在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)率為53.3% (32/60)，顯著低于正常組織中的80.0% (24/30) (P＜0.05)，其陽性率與分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移和dukes分期相關(guān)(P＜0.05)。高分化、未轉(zhuǎn)移和dukes分期較低的組織中p27的表達(dá)水平較低，提示p27的表達(dá)有助于抑制結(jié)直腸癌的發(fā)生。

本研究結(jié)果表明，cyclinD、p73和p27均參與了結(jié)直腸癌的發(fā)生、淋巴轉(zhuǎn)移和dukes分期。但僅有cyclinD蛋白對腫瘤細(xì)胞的侵潤具有影響，而p73和p27的表達(dá)水平與分化轉(zhuǎn)移相關(guān)。

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·論著·

Expression and clinical significance of cyclinD1，p73 and p27 in colorectal cancer tissues

XU Huimin，CAO Shaoqi.
Department of Digestive System Diseases，The First Peoople’s Hospital of Huizhou City，Guangdong，Huizhou 516221，China

【Abstract】Objective To investigate the expression and clinical significance of cyclinD1，p73 and p27 in colorectal cancer tissues.MethodsThe expression levels of cyclinD1，p73 and p27 were detected in 60 cases of colorectal cancer tissues and 30 cases of normal tissues.The correlation between expressions of cyclinD1，p73，p27 and clinical indexes was analyzed.Results The positive expression rate of cyclinD1 in colorectal cancer tissues was 68.3% (41/60)，which was significantly higher than 23.3% (7/30) in normal tissues (P＜0.05)，moreover，the positive rate was closely correlated to infiltration depth，lymphatic metastasis，dukes staging of colorectal cancer (P＜0.01).The positive expression rate of p73 in colorectal cancer tissues was 58.3% (35/60)，which was significantly higher than 3.3% (1/30) in normal tissues (P＜0.01)，furthermore the positive expression rate was closely correlated to differentiation degree，lymphatic metastasis，dukes staging of colorectal cancer (P＜0.05).The positive expression rate of p27 in colorectal cancer tissues was 53.3% (32/60)，which was significantly lower than 80.0% (24/30) in normal tissues (P＜0.05)，besides，the positive expression rate was closely related with differentiation degree，lymphatic metastasis，dukes staging of colorectal cancer (P＜0.01).ConclusionThe expressions of cyclinD1，p73 and p27 are closely correlated to colorectal cancer，therefore，the detection of the three factors is helpful for the evaluation of prognosis of patients with colorectal cance.

【Key words】colorectal cancer; cyclinD1; p73; p27

(收稿日期:2015－10－27)

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2016.04.005

【中圖分類號】R 735.37

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】1002－7386(2016) 04－0499－03

作者單位: 516211廣東省惠州市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科