梁肖云，黃鎮(zhèn)華，張素娟，曾蘭蘭，趙學芹

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心檢驗科，廣東廣州 510120)

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·臨床研究·

婦女及兒童尿液分析復檢規(guī)則的建立與應(yīng)用

梁肖云，黃鎮(zhèn)華，張素娟，曾蘭蘭，趙學芹

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心檢驗科，廣東廣州 510120)

摘要:目的建立LabUMat全自動尿液分析工作站對婦女、兒童尿液分析鏡檢的復檢規(guī)則。方法收集2014年8月至9月在婦女兒童醫(yī)療中心門診就診和住院的兒童和婦女的隨機尿液常規(guī)標本共1 036份，用LabUMat全自動尿液分析儀分別進行尿液干化學和有形成分分析；檢測完畢后采用雙盲法進行顯微鏡檢查，采用人工鏡檢與全自動沉渣分析儀器檢測平行比對的，探討復檢規(guī)則及復檢方法，并計算復檢規(guī)則的真陽性率、假陽性率、真陰性率、假陰性率(漏診率)、復檢率。根據(jù)自動化尿液分析工作站的檢測方法，根據(jù)婦女兒童尿液標本的特點，參照在《中華醫(yī)學檢驗雜志》發(fā)表的有關(guān)尿液有形成分的復檢規(guī)則的方案，設(shè)計制訂適合婦女兒童的復檢規(guī)則。選取2014年10月門診和住院的隨機尿液常規(guī)標本300份進行復檢規(guī)則的驗證。結(jié)果建立復檢規(guī)則的1 036份尿液標本中，陽性標本占35%，陰性標本占65%。其中RBC陽性標本占65.30%，WBC陽性標本占53.32%，管型(CAST)陽性標本占3.86%。驗證規(guī)則的符合率為86.5%，漏診率為0.5%，復檢率為21.7%。300份尿液常規(guī)標本進行復檢規(guī)則的驗證，驗證結(jié)果符合率為91.67%，漏診率0.67%，復檢率為19.67%，圖片審核修正后的復檢率為8.67%。結(jié)論針對朗邁全自動尿液分析工作站，根據(jù)婦女兒童尿液標本的特征，制訂適合本實驗室的復檢規(guī)則及方法能夠有效地篩選異常標本，結(jié)合圖片人工審核，可顯著減少工作量。

關(guān)鍵詞:全自動尿液分析；尿液；復檢規(guī)則

目前有關(guān)尿液有形成分鏡檢篩查有不少報道[1-3]，但針對婦女、兒童的報道較少。因為婦女的尿液經(jīng)常受白帶的污染，兒童特別是新生兒由于尿液比較難留取、標本超時等原因，容易出現(xiàn)假陽性，所以制訂適合婦女、兒童的尿液有形成分的鏡檢規(guī)則，規(guī)范尿液常規(guī)的檢測，保證檢驗質(zhì)量，是目前急需解決的問題。文獻報道的有關(guān)尿液復檢規(guī)則建立，雖然使用同一款儀器，但由于標本人群的來源、復檢率、漏檢率等結(jié)果存在較大差異。本研究為探討這種差異是否出現(xiàn)在不同人群間，并結(jié)合基于數(shù)字成像原理的朗邁尿液分析工作站儀器特點，制訂了針對該儀器在本院尿液自動化檢測的復檢規(guī)則。

1資料與方法

1.1標本來源收集2014年8月至9月在婦女兒童醫(yī)療中心門診就診和住院的兒童和婦女的隨機尿液常規(guī)標本共1 036份，用于建立復檢規(guī)則；所采集標本覆蓋腎病科、新生兒科、內(nèi)分泌科、血液科、婦女免疫腫瘤科、婦產(chǎn)科、產(chǎn)科等臨床科室；其中兒童400例，婦女636例，兒童年齡0～14歲，婦女20～60歲。選取2014年10月門診和住院的隨機尿液常規(guī)標本300份，以驗證復檢規(guī)則的有效性，其中兒童100份，婦女200份。尿液留取標準依據(jù)《臨床檢驗操作規(guī)程(第3版)》[4]，標本均在2 h內(nèi)完成檢測。

1.2儀器與試劑朗邁尿液分析工作站由匈牙利Elektronika77公司生產(chǎn)制造，配套試紙條和沉渣板由北京倍肯公司提供。顯微鏡采用日本Olympus雙目顯微鏡。

1.3方法

1.3.1自動化尿液分析檢測每日隨機抽取50份尿液標本，在朗邁尿液分析工作站上檢測，尿有形成分分析指標包括紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)、管型(CAST)等，尿干化學檢測指標包括潛血(BLD)、中性粒細胞酯酶(LEU)、蛋白(PRO)、亞硝酸鹽(NIT)，將原始檢測結(jié)果備份存檔。UriSed尿液分析儀檢測RBC、WBC、CAST及顯微鏡人工鏡檢任何一項參數(shù)超過正常參考范圍均定義為陽性標本。

1.3.2顯微鏡檢查每份標本在尿液分析工作站上檢測完畢后由選定的2名主管檢驗師采用雙盲法做顯微鏡檢查[5]，并計算檢測結(jié)果的均值作為鏡檢結(jié)果。操作方法嚴格按照《臨床檢驗操作規(guī)程》第3版要求檢測，鏡檢內(nèi)容包括：RBC、WBC、CAST的定量計數(shù)，上皮細胞、酵母菌、結(jié)晶、精子、黏液絲、細菌及雜質(zhì)等定性檢測。

1.3.3陽性標本判斷標準對于RBC、WBC、CAST 超出參考范圍上限，或出現(xiàn)非透明管型時即判定為陽性(+)。本研究使用Fast Read-10 尿沉渣計數(shù)板計數(shù)尿沉渣中的有形成分，根據(jù)《臨床檢驗操作規(guī)程》第3版提供的參考范圍[4]，陽性判斷標準如下：(1)RBC，>4 個/μL(男)，>9個/μL(女)；(2)WBC，>5 個/μL(男)，>12個/μL(女)；(3)CAST，≥1個/μL。尿液干化學分析的參考范圍由廠家提供，以BLD、WBC、NIT 和PRO 達到陽性閾值及以上判斷為陽性。COBISxs 尿液有形成分分析儀的參考范圍為本實驗自建范圍，RBC、WBC 和CAST 超出參考范圍上限判斷為陽性。

1.3.4復檢規(guī)則制定及復檢方法見表1。

表1　　復檢規(guī)則的制訂及采取的復檢方法

1.3.5復檢規(guī)則的評估以尿沉渣顯微鏡檢查中RBC、WBC、CAST 的結(jié)果作為參考標準，針對復檢方案，根據(jù)國內(nèi)外通用的復檢規(guī)則評估指標，評估復檢規(guī)則篩選的真陽性率、假陽性率、真陰性率、假陰性率(即漏診率)和復檢率。

2結(jié)果

2.1尿沉渣鏡檢結(jié)果將尿沉渣出現(xiàn)RBC、WBC、CAST 數(shù)量異常的標本稱為陽性標本，而鏡檢未見異常者稱為陰性標本。建立復檢規(guī)則的1 036份尿液標本中，陽性標本占35%(363/1 036)，陰性標本占65%(673/1 036)。其中RBC陽性標本占65.30%(237/363)，WBC陽性標本占53.32%(194/363)，CAST陽性標本占3.86%(14/363)。

2.2復檢規(guī)則的評估驗證復檢規(guī)則的真陽性率是37.5%(388/1 036)，假陽性率是13.0%(135/1 036)，真陰性率是29.0%(508/1 036)，假陰性率(漏診率)是0.5%(5/1 036)，復檢率是21.7%(225/1 036)，符合率為86.5%。

2.3臨床驗證對300份尿液常規(guī)標本進行復檢規(guī)則的驗證，驗證結(jié)果符合率為91.67%(275/300)，真陽性率、假陽性率、真陰性率、假陰性率(漏診率)分別為35.67%(107/300)、7.67%(23/300)、56.00%(168/300)、0.67%(2/300)，其復檢率為19.67%(59/300)，圖片審核修正后的復檢率為8.67%(26/300)。

3討論

由于女性其生理結(jié)構(gòu)特殊性，易患尿路感染；對于妊娠期婦女，由于其激素水平及生理結(jié)構(gòu)改變，如子宮逐漸增大壓迫輸尿管使尿路不暢、腎盂積水、尿糖升高等因素以及妊娠早期抵抗力下降等，更易受到各種病原體侵襲而引發(fā)尿路感染[5]。因此，早期確診和治療尿路感染，對婦女，尤其是妊娠婦女及其胎兒的健康尤其重要[6-7]。兒童方面，由于兒童無癥狀性蛋白尿或血尿，低分子量蛋白尿未在尿中形成管型；尿液標本的復雜性，多樣性及在體外易發(fā)生改變，兒童的腎病改變情況與成人并不相同，并且相對較輕，尤其是臨床上表現(xiàn)為單純性血尿的患兒，可能與患兒年齡相對較小，疾病尚處于早期有關(guān)；新生兒尿少，留尿困難，導致取樣不合格引起的假陽性較多等原因：所以設(shè)定婦女、兒童尿液分析復檢規(guī)則，可避免婦女、兒童泌尿系統(tǒng)疾病的漏檢及延誤病情，既保證質(zhì)量，又提高工作效率，滿足臨床需要。

朗邁尿液分析工作站包括干化學尿液分析儀LabUMat和尿液有形成分分析儀UriSed，是干化學及尿液有形成分檢查一體機，在聯(lián)機狀態(tài)下可以自動連續(xù)工作檢測。UriSed全自動尿液有形成分分析儀采用自動顯微鏡成像技術(shù)和神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)自適應(yīng)共振理論專家控制技術(shù)，通過訓練過的ARTEC神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)識別系統(tǒng)計算可能性的圖譜，根據(jù)有形微粒的圖譜，對結(jié)果進行評定，并進行計算和自動標記。本研究旨在針對朗邁尿液分析工作站建立一套符合婦女、兒童，而且準確性高與可操作性強的指導尿液檢測的復檢規(guī)則，把規(guī)則導入LIS系統(tǒng)，既能提高檢驗人員的工作效率，又能最大可能地降低假陽性及假陰性率，保證檢驗規(guī)則效率和結(jié)果準確性。

本研究根據(jù)婦女、兒童和該儀器自身特點，利用干化學檢測指標中的RBC、WBC、PRO、NTT及有形成分分析中的RBC、WBC、CAST等項目，制訂出的復檢規(guī)則和復檢要求與文獻[3,8-10]的復檢規(guī)則有區(qū)別，更加詳細地制訂出復檢的方法和流程，提高了工作效率。研究中的假陰性病例由黏液絲、細菌、非結(jié)晶鹽類、上皮細胞等背景不清晰因素造成；假陽性病例中RBC易受細菌、黏液絲雜質(zhì)、兒童紙尿片的棉絮、婦女月經(jīng)期等影響，WBC受聚集成團的細菌、黏液絲雜質(zhì)、上皮細胞(主要是非鱗狀上皮細胞)、細胞碎片、非結(jié)晶鹽類及婦女的分泌物等影響。有全景拍攝圖譜真實顯示復檢標本可以直接在儀器可視操作界面人工審核并修正。用于驗證試驗的300份尿常規(guī)標本，以提高檢出率和降低漏檢率為原則，經(jīng)修正后篩選出最終需要復檢的標本例數(shù)為26份，復檢率為8.67%。

由于本院陽性標本占的比率不是特別高，所以根據(jù)本院的特點制訂的復檢規(guī)則是符合陽性復檢要求的。標本先在儀器可視操作界面人工審核并修正，可疑的標本才進行人工顯微鏡復檢，該規(guī)則經(jīng)過驗證漏檢率是0.5%，符合國家標準漏診率低于5%的要求，提高了工作效率。

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(收稿日期：2015-12-16)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.034

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)06-0797-03