呂松林南陽市第二人民醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，河南南陽　473000

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免疫組化檢測子宮內(nèi)膜腺癌促性腺激素釋放激素受體表達(dá)的臨床價值

呂松林
南陽市第二人民醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，河南南陽473000

[摘要]目的研究免疫組化檢測子宮內(nèi)膜腺癌促性腺激素釋放激素受體表達(dá)的臨床價值。方法隨機(jī)選擇2014年1—12月來該院就診的30例子宮內(nèi)膜腺癌患者作為觀察組，并選擇同一時期來該院體檢健康合格者40例作為對照組，采用免疫組化法檢測促性腺激素釋放激素受體在兩組研究對象中的表達(dá)情況，分析其臨床價值。結(jié)果對照組中促性腺激素釋放激素陽性表達(dá)率為22.50%，顯著低于觀察組的43.33%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。對照組增生期GnRH-R mRNA陽性表達(dá)率與對照組分泌期陽性表達(dá)率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論GnRH-R在子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞中顯著增高，GnRH參與子宮內(nèi)膜細(xì)胞癌變過程，對于診斷子宮內(nèi)膜腺癌具有較高參考價值。

[關(guān)鍵詞]子宮內(nèi)膜腺癌；促性腺激素釋放激素受體；免疫組化法

子宮內(nèi)膜腺癌是女性生殖道三大惡性腫瘤之一，發(fā)病率高且有上升趨勢[1]。促性腺激素釋放激素（GnRH）是下丘腦分泌產(chǎn)生的神經(jīng)激素，通過與相應(yīng)受體結(jié)合調(diào)節(jié)垂體前葉促性腺激素釋放。近年來有研究顯示[2]，GnRH不僅與肝癌腫瘤的分化程度有關(guān)，促性腺激素釋放激素受體（GnRH-R）與乳腺癌、卵巢上皮性癌等性激素依賴性惡性腫瘤組織也有高親和力表達(dá)。該研究選擇2014年1—12月到該院就診或體檢的70例研究對象，采用免疫組化法檢測他們的GnRH-R陽性表達(dá)率，研究GnRH-R對于診斷子宮內(nèi)膜腺癌的臨床應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

隨機(jī)選擇2014年1—12月來該院就診的30例子宮內(nèi)膜腺癌患者作為觀察組，并選擇同一時期來該院體檢健康合格者40例作為對照組。觀察組年齡39～67歲，平均（55.2±7.4）歲。對照組年齡37～69歲，平均（54.8±8.0）歲。所有研究對象均了解該研究內(nèi)容且簽署了知情同意書，兩組研究對象在性別、年齡等基本病歷資料上比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

嚴(yán)格無菌操作將標(biāo)本采集后一部分放入液氮中保存，一部分用10%甲醛固定，石蠟包埋，5 um連續(xù)切片備用。其中正常子宮內(nèi)膜組織中處于增生期的19例，分泌期21例。按Trizol一步法提取組織樣品總RNA，按反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明進(jìn)行RT反應(yīng)，將RT產(chǎn)物保存與-20℃?zhèn)溆?。將洗凈的子宮內(nèi)膜標(biāo)本剪成1 mm×1 mm×1 mm小塊，加入3倍體積左右的膠原酶溶液，在37℃、5%CO2暖箱內(nèi)消化30～60 min，將得到的細(xì)胞懸液移入離心管內(nèi)，清洗后離心3次，取沉淀接種到培養(yǎng)瓶，加DMEM培養(yǎng)基,在37℃、5%CO2暖箱內(nèi)培養(yǎng)，24 h后去懸浮，加入新培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，2～3 d后換液，在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。培養(yǎng)細(xì)胞傳代于內(nèi)置蓋玻片的六孔板，待細(xì)胞貼壁達(dá)70%，終止培養(yǎng)，倒掉培養(yǎng)基，加入95%酒精固定，用免疫細(xì)胞化學(xué)法鑒定培養(yǎng)細(xì)胞，同時進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。免疫組化以出現(xiàn)棕黃色細(xì)顆粒狀物質(zhì)為陽性。

1.3觀察指標(biāo)

比較兩組GnRH-R mRNA表達(dá)情況。

1.4統(tǒng)計方法

選用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，計數(shù)資料采取率（%）表示，組間對比進(jìn)行χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1兩組GnRH-R mRNA表達(dá)情況比較

正常子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織中GnRH-R mRNA陽性表達(dá)物質(zhì)均位于細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞核均呈陰性。正常子宮內(nèi)膜陽性表達(dá)率為22.50%[（5+4）/40]。見表1。

表1　兩組GnRH-R mRNA表達(dá)情況比較[n（%）]

3　討論

GnRH是下丘腦垂體性腺軸的重要信息分子，含10個氨基酸肽類激素，GnRH-R由氨基酸殘基組成，含7個跨膜結(jié)構(gòu)域，屬G蛋白偶聯(lián)受體[3-4]，GnRH與GnRHR結(jié)合，促進(jìn)促性腺激素——卵泡刺激素（FSH）和黃體生成素（LH）合成與分泌，維持生殖系統(tǒng)功能穩(wěn)定。

該研究中，正常子宮內(nèi)膜增生期GnRH-R mRNA陽性表達(dá)率與正常子宮內(nèi)膜分泌期陽性表達(dá)率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），這與肖楠[5]等人的研究結(jié)果一致，我們認(rèn)為這可能是因為子宮內(nèi)膜組織中的GnRH-R參與了除激素調(diào)節(jié)以外的其他作用所致，而與子宮內(nèi)膜的周期性變化無直接關(guān)系。另外正常子宮內(nèi)膜增生期和分泌期陽性表達(dá)率分別高達(dá)26.32%和19.05%，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），這提示我們正常子宮內(nèi)膜組織中GnRH-R mRNA陽性表達(dá)率較高，這個數(shù)據(jù)略高于以往文獻(xiàn)報道水平[6-7]，這可能是因該研究樣本量少的緣故。此外，該研究中正常子宮內(nèi)膜組織GnRH-R mRNA陽性表達(dá)率顯著低于子宮內(nèi)膜腺癌組織GnRH-R mRNA陽性表達(dá)率，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。這表明子宮內(nèi)膜細(xì)胞癌變可使細(xì)胞表面GnRHR顯著增加，GnRH和GnRH-R了參與子宮內(nèi)膜腺癌的凋亡過程，GnRH-R對于診斷子宮內(nèi)膜腺癌具有較高的參考價值。但也有文獻(xiàn)報道正常子宮內(nèi)膜組織與子宮內(nèi)膜腺癌組織中GnRH-R的陽性表達(dá)率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)[8]，這可能是由于正常子宮內(nèi)膜組織中GnRH-R具有雌激素功能，與GnRH結(jié)合后，引起子宮內(nèi)膜增生所致，另外也不排除統(tǒng)計學(xué)結(jié)果偏差的原因。

綜上，GnRH和GnRH-R參與了子宮內(nèi)膜腺癌的病變過程，GnRH-R在子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞中陽性表達(dá)率顯著增高，可作為臨床診斷子宮內(nèi)膜癌的重要參考依據(jù)。

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Clinical Value of Immunohistochemical in Detecting Expression of Gonadotropin Releasing Hormone Receptors in Endometrial Adenocarcinoma

LV Song-lin
Nuclear medicine Department, Nanyang Second People's Hospital, Nanyang, Henan Province, 473000 China

[Abstract]Objective To research the clinical value of immunohistochemical in detecting expression of gonadotropin releasing hormone receptors in endometrial adenocarcinoma. Methods 30 cases of patients with endometrial adenocarcinoma treated in our hospital from January 2014 to December 2014 were regarded as the observation group, 40 cases of healthy examined people treated in our hospital at the same period were regarded as the control group, the expression and clinical value of immunohistochemical in detecting gonadotropin releasing hormone receptors in endometrial adenocarcinoma were analyzed. Results The positive expression rate in the control group was obviously lower than that in the observation group (22.50% vs 43.33%) the difference was statistically significant（P＜0.05）, in the control group, the difference in the positive expression rate between the proliferative phase GnRH-R mRNA and the progestational phase was not statistically significant（P＞0.05）. Conclusion GnRH-R was obviously improved in endometrial adenocarcinoma cells, and GnRH is involved in the carcinogenesis of endometrial cells and is of higher reference value to the diagnosis of endometrial adenocarcinoma.

[Key words]Endometrial adenocarcinoma; Gonadotropin releasing hormone receptors; Immunohistochemical

收稿日期：（2015-10-16）

[作者簡介]呂松林（1981.8-），男，河南南陽人，本科，主管檢驗師，研究方向：臨床檢驗專業(yè)，免疫、內(nèi)分泌激素、腫瘤等。

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.02.084

[中圖分類號]R5

[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

[文章編號]1674-0742（2016）01（b）－0084-02