蔡向敬　王　媛　王　偉

(山東大學(xué)第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科，山東　濟南　250033)

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DC/CIK聯(lián)合吉非替尼治療EGFR突變的晚期非小細(xì)胞肺癌的療效

蔡向敬王媛1王偉

(山東大學(xué)第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科，山東濟南250033)

〔摘要〕目的探討自體樹突細(xì)胞(DC)/ 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)聯(lián)合靶向藥物吉非替尼治療表皮生長因子受體(EGFR)突變的非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的安全性及療效。方法選取該院診治的90例EGFR突變的NSCLC患者，采用隨機數(shù)字方法分為聯(lián)合組和單藥組，單藥組采取口服吉非替尼進行治療，聯(lián)合組DC/CIK聯(lián)合吉非替尼進行治療，比較兩組療效。結(jié)果聯(lián)合組近期有效率(DCR)和疾病控制率(RR)及明顯高于單藥組(P< 0.05)；聯(lián)合組經(jīng)過治療后外周血淋巴細(xì)胞表型CD3+ 、CD4+ 、CD4+/CD8+、自然殺傷細(xì)胞(NK)明顯高于單藥組(P< 0.05)；聯(lián)合組較單純化療組患者體力下降和食欲減低明顯降低(P< 0.05)；聯(lián)合組與單藥組的無疾病生存進展時間(PFS)延長了2.5個月，兩組間差異顯著(P<0.05)；聯(lián)合組CIK輸注后出現(xiàn)發(fā)熱5例、胸悶3例，經(jīng)對癥處理后緩解，兩組皮疹和腹瀉發(fā)生率比較無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論DC/CIK聯(lián)合吉非替尼治療EGFR突變的NSCLC，可以提高患者DCR和RR，減少化療藥物對患者免疫力的影響，提高抵抗力，延長患者生存期，且安全性較好。

〔關(guān)鍵詞〕樹突細(xì)胞/細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞；吉非替尼；表皮生長因子受體突變；非小細(xì)胞肺癌

非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)5年生存率極低,且大多患者確診時已為晚期〔1〕。近年來靶向藥物治療因其高度選擇性、副作用小、療效確切〔2〕，逐漸應(yīng)用于臨床，但是隨著臨床應(yīng)用，單藥化療存在的原發(fā)性和獲得性耐藥情況，影響其療效。樹突細(xì)胞(DC)具有強大的抗原呈遞作用，其在肺癌患者免疫機制的產(chǎn)生以及調(diào)解發(fā)揮著重要的作用。 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)對腫瘤細(xì)胞具有一定的毒性溶解作用〔3〕。本文應(yīng)用吉非替尼聯(lián)合DC/CIK治療表皮生長因子受體(EGFR)突變的晚期NSCLC患者，得到了一定的臨床效果。

1資料與方法

1.1一般資料選取2011年6月至2013年6月聊城市腫瘤防治院住院的90例患者，均經(jīng)病理確診為ⅢB或Ⅳ期的NSCLC患者，其中11例鱗癌，74例腺癌，其他5例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)KPS 評分在60分以上，預(yù)計生存期大于3個月；(2)所有患者均經(jīng)過EGFR/ALK、ROS1 等基因檢測。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)對于CIK細(xì)胞生物治療過敏的患者；(2)患有嚴(yán)重心、肝、腎疾病的患者以及精神疾病患者。本研究通過聊城市腫瘤防治院倫理學(xué)委員會的批準(zhǔn)，采用隨機數(shù)字表法分為聯(lián)合組(45例)和單藥組(45例)。兩組患者一般資料均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法聯(lián)合組：口服吉非替尼250 mg/d治療，在服用吉非替尼前1 d，采集患者的靜脈血并分離淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)并培養(yǎng)出DC、CIK，皮內(nèi)注射DC，靜脈滴注CIK，1個周期為28 d。DC細(xì)胞數(shù)量>5×106/ml；在淋巴結(jié)富集區(qū)10 cm范圍進行注射，注射時間分別為第7、14、21、28天。CIK則進行肘靜脈回輸，調(diào)節(jié)30滴/min，細(xì)胞數(shù)量>6×108/ml，分別在第12、14、16、18、20天進行滴注。單藥組：給予吉非替尼250 mg/d治療，至少1個月復(fù)查評估1次，直至出現(xiàn)病情進展。

DC/CIK的制備流程：(1)血液采集。(2)自體外周血單個核細(xì)胞(PBMC)分離。(3)DC誘導(dǎo)，100 ml 5%人AB型血清RPMI1640完全培養(yǎng)基后進行細(xì)胞濃度調(diào)整，補足細(xì)胞因子，加入重組人腫瘤壞死因子(TNF)-α，誘導(dǎo)DC細(xì)胞成熟。(4)制備腫瘤細(xì)胞株抗原并進行CIK誘導(dǎo)。(5)取培養(yǎng)物進行細(xì)菌與真菌的培養(yǎng)，并分別檢測支原體、衣原體以及內(nèi)毒素(標(biāo)準(zhǔn)：病原學(xué)檢測陰性，內(nèi)毒素<5 Eu)。

1.3評價指標(biāo)

1.3.1療效評價免疫功能通過T細(xì)胞亞群數(shù)據(jù)進行評價；評價兩組患者治療前和治療2個周期后生活質(zhì)量。無疾病進展生存時間(PFS)指從患者開始治療到明確疾病進展的時間。

1.3.2安全性評價兩組隨化療周期進行常規(guī)化驗檢查，包括血、尿、便常規(guī)，肝腎功能，凝血系列，心電圖及心臟超聲。主要觀察患者在 CIK 回輸過程中及以后出現(xiàn)的不良反應(yīng)(根據(jù)藥物毒副反應(yīng)判定標(biāo)準(zhǔn)NCI-CTC4.0)。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS17.0軟件進行χ2檢驗、方差分析和Kaplane-Meier分析；安全性評價采用描述性統(tǒng)計。

2結(jié)果

2.1近期臨床療效聯(lián)合組的近期有效率(DCR)、疾病控制率(RR)(82.2%、55.6%)明顯高于單藥組(40.0%，73.3%)，其中部分緩解 25 vs 15例，穩(wěn)定12 vs 13例，進展8 vs 17例(P< 0.05)。

2.2免疫狀態(tài)聯(lián)合組經(jīng)過治療后外周血淋巴細(xì)胞表型CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、自然殺傷細(xì)胞(NK)水平明顯高于單藥組(P< 0.05)，見表1。

2.3治療后生活質(zhì)量評價對比聯(lián)合組與單藥組患者治療前后抑郁、體力、睡眠、食欲、體重等指標(biāo)，聯(lián)合治療組體力下降(8例)(χ2=6.25，P=0.012)和食欲減低(7例)(χ2=4.8，P=0.028)明顯低于單藥組(18例、17例)；另外，睡眠差9 vs 14例，體重下降7 vs 14例。

2.4兩組PFS比較見圖1。截止到最后隨訪時間，聯(lián)合組的PFS為10.6個月，單藥組為8.1個月，聯(lián)合組較單藥組延長了2.5個月，兩組間差異顯著(P<0.05)。

表1　兩組治療前后外周血CD3+、CD4+、CD8+和

與治療前比較：1)P<0.05；與單藥組比較：2)P<0.05

圖1　兩組患者無疾病進展的生存曲線

2.5不良反應(yīng)聯(lián)合組出現(xiàn)皮疹 20例(44.4%)、腹瀉8 例(17.8%，其中Ⅲ度腹瀉 1例)，單藥組皮疹 19例(42.2%)、腹瀉9例(20%，其中Ⅲ度腹瀉 2例)，兩組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。聯(lián)合組患者輸注CIK后5例出現(xiàn)發(fā)熱，3例胸悶，對癥處理后癥狀緩解。

3討論

隨著腫瘤發(fā)生機制的逐步闡明及基因突變與肺癌的關(guān)系的研究，分子靶向藥物在肺癌治療中的作用越來越受到重視。分子靶向藥物作用于腫瘤細(xì)胞的某些靶點，通常這些靶點在人體正常細(xì)胞中不表達(dá)或很少表達(dá)，所以靶向藥物在殺傷腫瘤細(xì)胞時對正常細(xì)胞無影響或影響很小。EGFR酪氨酸激酶抑制劑可用于NSCLC的一線、二線、三線治療及輔助治療〔4〕。研究顯示，吉非替尼單藥治療晚期NSCLC客觀有效率為30.0%～40.0%，RP為70.0%～80.0%〔5,6〕，由于其與傳統(tǒng)的細(xì)胞毒藥物作用靶點不同，故不良反應(yīng)較輕，對于敏感突變者療效好，但遠(yuǎn)期耐藥不可避免。

腫瘤患者的免疫功能將會隨著不同的免疫程度而發(fā)生不同的抑制作用，而當(dāng)機體出現(xiàn)腫瘤細(xì)胞時，免疫應(yīng)答則將很難被調(diào)動〔7,8〕。DC/CIK免疫治療能很好地調(diào)動免疫應(yīng)答，其具有調(diào)節(jié)機體免疫功能、對腫瘤細(xì)胞具有直接殺傷作用且對機體不會造成嚴(yán)重不良反應(yīng)的優(yōu)點。絕大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞均可以通過放化療來進行殺滅，疾病復(fù)發(fā)的根源是殘存的腫瘤細(xì)胞〔9,10〕。有研究結(jié)果表明，輔助性CIK治療對于淋巴瘤、肝細(xì)胞癌、消化道腫瘤的PFS具有明顯的改善作用，且可進一步提高患者的生活質(zhì)量〔11〕。Ando等〔12〕研究發(fā)現(xiàn)了CIK細(xì)胞用于逆轉(zhuǎn)吉非替尼耐藥治療具有一定的可行性。

本研究說明聯(lián)合組患者的免疫狀態(tài)相對要好，這種免疫能力不僅增強抗腫瘤效果，而且還可抵御病原菌感染，避免伴發(fā)感染性疾病。而且在應(yīng)用吉非替尼治療的基礎(chǔ)上加用DC/CIK生物免疫治療可明顯延長患者的PFS，說明DC/CIK與化療藥物聯(lián)合使用可起到協(xié)同抗腫瘤作用。

本研究的缺點是因隨訪時間短，未能統(tǒng)計兩組患者的總生存時間，并進行比較。目前細(xì)胞免疫(DC/CIK)主要存在實驗設(shè)備昂貴，體外培養(yǎng)條件要求高，患者花費較大的缺點。

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〔2015-03-11修回〕

(編輯李相軍)

〔中圖分類號〕R734.2

〔文獻標(biāo)識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)06-1374-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.06.042

通訊作者：王偉(1963-),男，主任醫(yī)師，教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事呼吸疾病研究。

1聊城市腫瘤防治院腫瘤科

第一作者：蔡向敬(1983-),男，主治醫(yī)師，主要從事呼吸疾病研究。