張危紅 譯自 Nutrition and Health，Vol.23(2015)，№9：22～23龔炎長(zhǎng) 校 陳建康 審 何 閃 制圖

飼料對(duì)仔豬腸道微生物菌群平衡的影響

張危紅*譯自 Nutrition and Health，Vol.23(2015)，№9：22～23龔炎長(zhǎng) 校 陳建康 審 何 閃 制圖

腸道菌群的平衡有助于斷奶仔豬保持健康，維持生長(zhǎng)。本研究分析了分別飼喂益生菌、菊粉或兩者混合物時(shí)仔豬腸道菌群受到的影響。

眾所周知，斷奶后仔豬的日糧會(huì)從液態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)楣虘B(tài)，同時(shí)仔豬腸道微生物群組成的多樣性也將發(fā)生改變。

在這個(gè)變化過(guò)程中，仔豬對(duì)腸道疾病高度敏感，如斷奶后腹瀉，這種高度敏感將導(dǎo)致胃腸道(Gastrointestinal，GI)中腸毒性大腸桿菌過(guò)度生長(zhǎng)和乳酸菌(Lactic Acid Bacteria，LAB)生長(zhǎng)減少。

為了維持動(dòng)物的健康并在不使用抗生素的情況下減少斷奶造成的不利影響，營(yíng)養(yǎng)師經(jīng)常使用飼料添加劑來(lái)刺激腸道菌群，使其達(dá)到最佳的微生態(tài)平衡。

1 檢測(cè)技術(shù)的改進(jìn)

之前已經(jīng)有研究嘗試檢測(cè)了飼料添加劑對(duì)剛斷奶仔豬胃腸道微生物生態(tài)學(xué)的影響，例如2000年Mair等的研究。

但是，特定的添加劑成分對(duì)腸道微生物菌群產(chǎn)生的所有影響并非都能通過(guò)培養(yǎng)的方法檢測(cè)到。

認(rèn)識(shí)到細(xì)菌分離法在研究腸道菌群上的局限性，研究人員引進(jìn)了更高效的分子技術(shù)(例如腸道微生物譜分析)以改進(jìn)對(duì)復(fù)雜的腸道微生物菌群組成的分析。

變性梯度凝膠電泳法(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis，DGGE)能使我們?cè)谖⑸锝M成成分未知的情況下直接觀測(cè)復(fù)雜環(huán)境中的優(yōu)勢(shì)微生物譜及其多樣性。

高靈敏度的實(shí)時(shí)定量PCR可以使研究人員對(duì)感興趣的特定細(xì)菌進(jìn)行定量分析；而高通量的16s rRNA基因測(cè)序技術(shù)使鑒定腸道微生物菌群組成及檢測(cè)GI菌群的相對(duì)豐度成為可能。

2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

如先前所述，Mair等(2010)利用健康的斷奶仔豬進(jìn)行了為期28 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)。

仔豬的常規(guī)生產(chǎn)性能、腸道微生物菌群和微生物代謝產(chǎn)物利用經(jīng)典方法進(jìn)行分析。

試驗(yàn)仔豬平均日齡為26 d，活重為9.2 kg，試驗(yàn)分為四組：對(duì)照組、益生菌組、菊粉組和益生菌與菊粉混合組(簡(jiǎn)稱混合添加物組)。

對(duì)照組仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧，益生菌組仔豬飼喂由基礎(chǔ)日糧和益生菌(每千克飼料含有1×109CFU的屎腸球菌、唾液乳桿菌、羅伊氏乳桿菌以及嗜熱鏈球菌的混合物)配制的日糧，菊粉組仔豬飼喂由基礎(chǔ)日糧和菊粉(添加量為0.4%)配制的日糧，而混合組仔豬飼喂由基礎(chǔ)日糧、益生菌制劑和菊粉配制的日糧，益生菌制劑和菊粉的添加量同上。

基因組DNA提取于250 mg腸消化物，并用于進(jìn)一步分析細(xì)菌的組成。

3 飼料添加劑的影響具有腸道位點(diǎn)特異性

利用DGGE和/或焦磷酸測(cè)序法發(fā)現(xiàn)，在所有三個(gè)腸道位點(diǎn)上，菊粉組仔豬腸道菌群多樣性提高，而混合組仔豬腸道菌群的多樣性僅在盲腸和結(jié)腸位點(diǎn)增加(圖1)。

相比之下，益生菌只影響仔豬回腸中的微生物群多樣性。

在益生菌組和混合添加物組中，經(jīng)DGGE方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)仔豬盲腸和結(jié)腸的微生物群組成發(fā)生了變化，而菊粉組仔豬的微生物群譜與對(duì)照組仔豬的相似。

利用16s rRNA焦磷酸測(cè)序法分析顯示：所有三種添加物都可以減少每一個(gè)腸道位點(diǎn)上的埃希氏桿菌屬種類。這表明這三種添加物對(duì)腸道微生物群具有潛在的有益影響。

研究發(fā)現(xiàn)：菊粉組仔豬大腸內(nèi)梭菌科細(xì)菌的相對(duì)豐度增加。

此外，采用實(shí)時(shí)PCR方法檢測(cè)后顯示：益生菌和混合添加物都能增加回腸中雙歧桿菌的數(shù)量，測(cè)序結(jié)果也證實(shí)了這一點(diǎn)。

益生菌和菊粉在不同程度上都改變了豬腸道微生物菌群的多樣性和相對(duì)豐度以及菌群組成。

但是，菌群組成的改變?cè)谀c道的各位點(diǎn)上并不一致，這證明了飼料添加劑的功能具有腸道位點(diǎn)特異性。

因此，在以鑒別健康腸道微生物群組成為手段來(lái)研究飼料添加劑對(duì)腸道菌群的影響時(shí)，對(duì)不同腸道位點(diǎn)進(jìn)行采樣至關(guān)重要。□□

原題名：Effect of feed on microbiota balance in piglets(英文)

原作者：Verity Ann Sattler(澳大利亞自然資源和應(yīng)用科學(xué)大學(xué))

S816

C

1001-0769(2016)12-0005-02

張危紅(1992.12- )，女，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)專業(yè)，碩士在讀，主要研究方向：家禽遺傳育種與繁殖；E-mail：519677269@qq.com。