孟祥玉
( 牡丹江醫(yī)學院基礎(chǔ)醫(yī)學院,黑龍江 牡丹江 157011)
?
液相色譜儀在生物技術(shù)中的應用
孟祥玉
( 牡丹江醫(yī)學院基礎(chǔ)醫(yī)學院,黑龍江牡丹江157011)
摘要:液相色譜儀可應用于生物化學、生物醫(yī)學、環(huán)境化學等方面的分析研究。隨著現(xiàn)代醫(yī)學的發(fā)展,采用液相色譜法進行生物技術(shù)研究已經(jīng)成為一種常規(guī)方法。鑒于此,針對應用液相色譜法進行生物技術(shù)研究時出現(xiàn)的常見問題進行分析,并提出合理的解決辦法。
關(guān)鍵詞:液相色譜儀;故障;醫(yī)學生物技術(shù)
隨著現(xiàn)代醫(yī)學的發(fā)展,采用液相色譜法進行生物技術(shù)研究已經(jīng)成為一種常規(guī)方法。目前,在生物化學、生物醫(yī)學、環(huán)境化學等實驗室均配備液相色譜儀等先進大型儀器,但是在操作者使用過程中儀器往往會出現(xiàn)不同的問題,亟待解決。鑒于此,以下針對應用液相色譜法進行生物技術(shù)研究時出現(xiàn)的常見問題進行分析,并提出合理的解決辦法。
1儀器配置
液相色譜儀組成包括高壓輸液泵、進樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分。
2故障一
2.1故障現(xiàn)象
進樣閥故障。
2.2分析與解決方法
可能原因之一為手動進樣閥轉(zhuǎn)動異常。解決方法為若轉(zhuǎn)子太緊,應調(diào)整轉(zhuǎn)子的松緊度;若轉(zhuǎn)子密封損壞,應更換或調(diào)整轉(zhuǎn)子密封??赡茉蛑槭謩舆M樣閥載樣異常,解決方法是當進樣器污染、定量環(huán)阻塞和管路阻塞時,對該部分應清洗或更換;當進樣閥安裝異常時,可重新安裝調(diào)整。
3故障二
3.1故障現(xiàn)象
漏液故障。
3.2分析與解決方法
可能原因之一為泵漏液,解決方法是若放空閥、比例閥、脈沖阻尼器、壓力傳感器、泵密封、混合器密封和單向閥等損壞,應維修或更換??赡茉蛑榻宇^處漏液,解決方法是若松動可擰緊,若被污染可及時清洗,若損壞則需維修或更換。可能原因之三為進樣閥漏液,解決方法是當轉(zhuǎn)子密封損壞、廢液管阻塞和定量環(huán)阻塞時,應維修或更換;若進樣口密封松動,應重新調(diào)整;若進樣針頭尺寸不符合,應使用適合的進樣針;若廢液管中產(chǎn)生虹吸,應保持廢液管高于廢液液面??赡茉蛑臑闄z測器漏液,解決方法是當廢液管阻塞、流通池阻塞、手緊接頭漏液、流通池窗破碎和流通池墊片損壞時,應維修或更換。可能原因之五為色譜柱漏液,解決方法是若篩板厚度不符合,應使用合適的篩板;若卡套內(nèi)有填料,應拆卸清洗后重新安裝;若尾端接頭松動,可適當擰緊。
4故障三
4.1故障現(xiàn)象
壓力異常。
4.2分析與解決方法
可能原因之一為壓力波動,解決方法是若單向閥或泵密封損壞,應維修或更換;若泵中有氣體,可以采用溶劑脫氣、從泵中除去氣體;若脫氣不充分,需要重新過濾一遍、溶劑脫氣;由于流動相粘度的變化引起的壓力波動,可以使用梯度洗脫。 可能原因之二為壓力持續(xù)偏低,解決方法是若系統(tǒng)漏液或控制器失常,應維修或更換;若流速設(shè)定過低,可以調(diào)整流速;若色譜柱選擇不符合,應選擇適合的色譜柱;若柱溫過高,則應適當降低溫度。可能原因之三為壓力持續(xù)偏高,解決方法是若進樣閥損壞、控制器異常,應維修或更換;若保護柱或在線過濾器阻塞,應清洗或更換;若流動相使用不當或出現(xiàn)緩沖鹽的結(jié)晶沉淀,應使用恰當?shù)牧鲃酉?、沖洗柱塞桿;若柱前篩板堵塞,應反沖色譜柱、更換篩板或色譜柱;若流速設(shè)定過高,可以調(diào)整流速;若色譜柱選擇不符合,應選擇適合的色譜柱;若柱溫過低,則應適當提高溫度。 可能原因之四為沒有壓力顯示和流動相流動,解決方法是若保險絲、單向閥、柱塞桿和控制器損壞,則應維修或更換;若是電源問題,應接通電源開機;若泵頭內(nèi)有空氣,應采用溶劑脫氣、啟動泵抽出空氣;若流動相不足,應補充流動相、更換入口濾頭;若漏液,應維修或更換手緊接頭??赡茉蛑鍨榱鲃酉嗔鲃诱#珱]有壓力顯示,解決方法是若為儀表壓力傳感器損壞,應維修或更換。
5小結(jié)
液相色譜儀是大型精密儀器,若出現(xiàn)故障維修較困難。實驗室管理人員應定期培訓,熟練掌握該儀器的使用及維護,盡量避免儀器發(fā)生故障,從而更好地確保實驗的順利進行。采用液相色譜法的研究人員也應適當掌握部分儀器故障、實驗分析等問題的處理方法,從而能夠更好地開展醫(yī)學生物技術(shù)等實驗研究,確保實驗結(jié)果的真實可靠。
參考文獻:
[1]ZüHLKE M, RIEBE D, BBITZ T, et al.An electrospray ionization-ion mobility spectrometer as detector for high-performance liquid chromatography[J].Eur J Mass Spectrom (Chichester, Eng),2015,21(3):391-402.
[2]JJANG Q, XU T, HUANG J, et al.Analysis of vitamin E metabolites including carboxychromanols and sulfated derivatives using liquid chromatography tandem mass spectrometry[J].J Lipid Res,2015(9):8.
[3]LEI Z, JING L, QIU F, et al.Construction of an Ultrahigh Pressure Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectral Library of Plant Natural Products and Comparative Spectral Analyses[J].Anal Chem, 2015 21,87(14):7373-7381.
本編輯部可供選購圖書
The Application and Maintain of Liquid Chromatograph in Medical Biotechnology
MENG Xiangyu
( Basic Medical Science College, Mudanjiang Medical University, Heilongjiang Mudanjiang 157011, China)
Abstract:Liquid chromatography can be used in the analysis of biological chemistry, biomedicine, environmental chemistry and so on. With the development of modern medicine,the research of biological technology could be carried by liquid chromatography. The aim is to solve common problems in the application of liquid chromatography in biological technology research.
Key words:Liquid chromatograph; failure; medical biotechnology
中圖分類號:TH 833
文獻標識碼:A
作者簡介:孟祥玉(1987—),男,助教,碩士,主要從事醫(yī)學生物技術(shù)方向研究。
收稿日期:2015 - 09 - 21
文章編號:1006-446X(2016)02-0068-03