林達芳/重慶市墊江縣畜牧生產(chǎn)站

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豬支原體肺炎合并鏈球菌病的診斷與防治

林達芳/重慶市墊江縣畜牧生產(chǎn)站

2015年3～7月，墊江縣幾個豬場的仔豬及育肥豬出現(xiàn)以咳嗽、呼吸困難、發(fā)病率高、死亡率高為特征的豬傳染病。筆者對該病進行了流行病學調(diào)查、臨床診斷、病理剖檢、病原分離、生化鑒定和動物實驗等確診為豬支原體肺炎合并鏈球菌病?，F(xiàn)報告如下：

（一）發(fā)病情況

三月，A場的125頭80 kg左右的豬全部發(fā)病，突然不食，體溫升高，咳嗽，腹式呼吸，經(jīng)藥物治療，有一定好轉(zhuǎn)，但始終不能完全恢復，后被迫淘汰，于全群轉(zhuǎn)出后的當晚將整個場地徹底消毒后，又將146頭40 kg的豬轉(zhuǎn)入此場，第二天，后進這一批又全群發(fā)病，同時，另有56頭太湖后備母豬也發(fā)病，后經(jīng)過積極處理，得以控制。其附近一豬場共有86頭育肥豬也同樣遭此命運。

B場于三月從外縣引進20 kg左右仔豬562頭，進場后即有部分豬發(fā)病，主要癥狀是喘氣、呼吸困難，用藥物得以控制，但此病在豬群中都有零星散發(fā)，其中死亡23頭，在5月5日用水給豬沖水時由于水溫只有4℃～7℃，第二天全群發(fā)病，共死亡45頭。

C場于三月從外縣引進仔豬182頭，陸續(xù)有仔豬發(fā)病，死亡26頭。

（二）臨床癥狀

精神不振，頭下垂，呼吸次數(shù)增加，伸頸呼吸，甚者呈犬坐姿勢，腹壁起伏明顯，不時發(fā)出哮喘聲，有的口鼻流出淡紅色泡沫。體溫多在40℃左右。食欲減退、廢絕。耳根、腹側(cè)、四肢內(nèi)側(cè)皮膚出現(xiàn)彌漫性暗紅色紫斑。有的豬不能站立，跛行；有的四肢作游泳狀。

（三）病理變化

肺水腫，氣腫，在肺的心葉、尖葉、中間葉及膈葉的前下部，出現(xiàn)融合性支氣管肺炎變化，病變的顏色為淡灰色或灰紅色，病變部界限明顯，像鮮嫩的肌肉樣。肺門淋巴結(jié)和縱膈淋巴結(jié)顯著腫大，呈灰白色，邊緣輕度充血。

脾臟腫大、柔軟，呈暗紅紫色，切面濾泡及脾梁不明顯。

全身淋巴結(jié)有不同程度的腫大、充血和出血。

切開腫大的關(guān)節(jié)可見關(guān)節(jié)囊內(nèi)有黃色膠凍樣液體，關(guān)節(jié)囊膜面充血、粗糙。

（四）實驗室檢驗

1．取病死豬肝、脾、淋巴結(jié)、腎制成觸片，干燥、固定、革蘭氏染色、鏡檢，可見革蘭氏染色陽性，并呈短鏈狀排列的球菌。無菌采取病料直接劃線于血清瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板、巧克力瓊脂平板，同時接種于皮克增菌液做鏈球菌選擇性增菌，37℃培養(yǎng)24 h后，挑取皮克增菌液轉(zhuǎn)接種于綿羊血瓊脂平板，挑取各類瓊脂平板上的可疑菌落，反復純化后做生化實驗，最終鑒定獲得一株細菌，即β溶血性鏈球菌。選取病料接種于馬丁肉湯培養(yǎng)基，經(jīng)24 h培養(yǎng)，取培養(yǎng)物0．2 ml皮下注射小鼠，實驗組小鼠均于48 h以內(nèi)死亡，對照組全部健活。

2．微量全血－酶聯(lián)免疫吸附試驗（微酶試驗）。用消毒針頭點刺豬耳背側(cè)靜脈，用定量移液管吸取0．1 ml血液，滴于新華濾紙上，自然風干，制成全血紙片送檢。將干血紙片按血滴大小剪下，放入試管中，加入被檢血樣稀釋液2．5 ml作1∶25倍稀釋。

支原體抗原、酶標記抗體、標準陰、陽性血清均為0．1 ml、凍干包裝，由吉林獸醫(yī)科學研究所提供。

取聚苯乙烯微量反應板每孔加入稀釋抗原200 uL（最后一孔不加抗原，為底物對照孔）37℃水浴作用3 h后，置4℃過夜。

次日，用洗滴液沖洗3次，甩干后每孔加被檢血樣200 uL（最后第2列孔加標準陰性對照血清、標準陽性對照血清200 uL）37℃作用2 h。

甩干血樣液，洗滌3次，甩干各孔分別加入已稀釋標記抗體200 uL，置37℃水浴作用2 h。

用去酶標記抗體，洗滌3次，甩干，加入底物溶液200 uL，置37℃水浴作用20 min后取出，每孔加50 uL 2 mol/L硫酸液中止反應。

以底物對照孔校正酶標測定儀，在波長490 nm，測光密度值（OD）。

結(jié)果判定：以被檢血樣孔OD值為S，標準陰性對照血清孔OD值為N，S/N比值進行判定。其標準為：

判定標準：

S/N　判定結(jié)果　S/N　判定結(jié)果＜1.4　-　2.6～3.0　+ + + 1.4～2.0　+?。?.1　+ + + + 2.1～2.5　+ +

三個豬場共采集血樣86份，其結(jié)果如下：

結(jié)果及份數(shù)　-　+　+ +　+ + +　 + + + + 86　4　8　16　21　37

3．采集病豬血清20份，用正向間接血凝試驗檢測，豬瘟抗體滴度＞4 Log2的有19份，有效免疫抗體合格率為95%。

4．采用北京望爾生物公司生產(chǎn)的高致病性藍耳病抗體檢測ELISA試劑盒檢測18份豬血清樣品，結(jié)果全部為陰性。

經(jīng)上述診斷，此三批豬為支原體合并鏈球菌感染。

（五）治療措施

1．預防和控制本病主要在于堅持預防為主，采取綜合性防制措施。堅持自繁自養(yǎng)的原則，確實需引進豬時，引入后應遠離生產(chǎn)區(qū)隔離飼養(yǎng)3個月，并經(jīng)檢疫證明無疫病，方可混群飼養(yǎng)。發(fā)現(xiàn)喘氣病陽性的病豬，應立即隔離治療，治愈后再接種疫苗。

2．給種豬和新生仔豬接種豬喘氣病滅活疫苗和鏈球菌苗，以提高豬群免疫力。

3．每噸飼料中添加80%泰妙菌素50 g和金霉素150 g，或利高霉素(林肯霉素＋壯觀霉素)1 000 g，可有效預防和治療豬喘氣病和鏈球菌病。

4．對已感染喘氣病及鏈球菌病的豬群要精心護理，隔離飼養(yǎng)。對咳嗽嚴重的豬群，可考慮以濕料分餐飼喂。及時淘汰治療效果不佳的病豬和僵豬，防止疫病的傳播。

5．病豬可使用氟苯尼考、林肯霉素、頭孢等肌肉注射，重者可在充分保定的情況下進行胸腔注射、腹腔注射、耳靜脈滴注。對呼吸困難者，使用氨茶堿等；對體弱者可采用支持療法。