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        地錦草提取物對(duì)體外α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化活性研究

        2016-04-08 08:36:56楊二磊
        中成藥 2016年2期

        鄭 巧, 楊二磊, 朱 影, 屠 潔

        (江蘇科技大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院,江蘇鎮(zhèn)江212018)

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        地錦草提取物對(duì)體外α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化活性研究

        鄭 巧, 楊二磊, 朱 影, 屠 潔*

        (江蘇科技大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院,江蘇鎮(zhèn)江212018)

        摘要:目的 研究地錦草(EuPhorbia humifusa Wi11d.)提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制活性及其體外抗氧化活性。方法從地錦草40%、70%、95%乙醇提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶的體外抑制活性中選擇最適乙醇體積分?jǐn)?shù),再對(duì)該提取物用乙醚、氯仿、水飽和正丁醇和水相進(jìn)行萃取分離,比較對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制活性、自由基清除能力、鐵離子還原能力、羥自由基清除能力、超氧陰離子清除能力。結(jié)果 地錦草95%乙醇提取物的抑制活性較優(yōu),再經(jīng)乙醚萃取獲得萃取物對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制活性最強(qiáng),IC50值為78.8 μg/mL,化學(xué)成分分析顯示其含有較多的酚性成分。乙醚萃取物具有較好的抗氧化能力,其自由基清除能力EC50值為132.9 μg/mL,鐵離子還原能力EC50值為76.9 μg/mL,羥自由基清除能力EC50值為182.7 μg/mL,超氧陰離子清除能力EC50值為31.3 μg/m L。結(jié)論 地錦草95%乙醇提取物的乙醚萃取物具有較強(qiáng)的α-葡萄糖苷酶抑制活性,同時(shí)具有一定的抗氧化活性。

        關(guān)鍵詞:地錦草;乙醇提取物;α-葡萄糖苷酶抑制活性;抗氧化活性

        dol:10.3969/j.issn.1001-1528.2016.02.005

        KEY W 0RDS: EuPhorbia humifusa;ethano1extract;α-g1ucosidase inhibitory activity;antioxidant activity

        地錦草(EuPhorbia humifusa Wi11d.)又名血見愁,是大戟科大戟屬植物地錦草的全草,為一年生匍匐小草本植物。廣泛分布于我國(guó)各地,具有清熱解毒、涼血止血、抗氧化、抗真菌和抗乙型肝炎病毒等作用[1-5]。董福輪等[6]研究表明,地錦草配合其他中西醫(yī)治療能有效控制糖尿病患者空腹血糖,表明地錦草具有潛在的治療糖尿病的作用。但是,地錦草降糖活性物質(zhì)基礎(chǔ)以及作用機(jī)制尚未闡明。

        α-葡萄糖苷酶(EC.3.2.1.20,α-g1ucosidase)是一類存在于人體小腸刷狀緣上的水解酶,能夠催化碳水化合物非還原末端的α-1,4糖苷鍵的水解,釋放葡萄糖,主要包括蔗糖酶、麥芽糖酶、異麥芽糖酶和海藻糖酶等。α-葡萄糖苷酶的酶活性可以影響人體對(duì)蔗糖、淀粉、糊精等碳水化合物的吸收利用[7]。有報(bào)道指出通過(guò)抑制α-葡萄糖苷酶活性來(lái)治療某些疾病已經(jīng)成為一種有效的臨床治療手段,其中,α-葡萄糖苷酶抑制劑在糖尿病治療中的運(yùn)用最為成熟。目前α-葡萄糖苷酶抑制劑已被第三次亞太地區(qū)糖尿病治療藥物指南推薦為降低餐后血糖的一線藥物[8],如阿卡波糖(acarbose)、伏格列波糖(vog1ibose)、米格列醇(mig1ito1)等。α-葡萄糖苷酶抑制劑通過(guò)可逆性抑制或競(jìng)爭(zhēng)性抑制小腸刷狀緣上的α-葡萄糖苷酶活性,從而阻抑酶活性的發(fā)揮,阻滯雙糖水解為單糖,后延葡萄糖或單糖的吸收時(shí)間,減緩餐后高血糖的發(fā)生[9]。本研究將以α-葡萄糖苷酶體外抑制活性為追蹤指標(biāo),測(cè)定地錦草乙醇提取物對(duì)α-葡糖糖苷酶的抑制活性,進(jìn)一步采用不同極性溶劑系統(tǒng)分離,并對(duì)各分離部位進(jìn)行初步的化學(xué)成分分析,最后測(cè)定α-葡萄糖苷酶的抑制活性部位的抗氧化活性。以期為高效、安全的地錦草α-葡萄糖苷酶抑制劑的開發(fā)運(yùn)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

        1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器

        1.1 實(shí)驗(yàn)材料 地錦草,取材于江蘇科技大學(xué)西校區(qū),經(jīng)植物學(xué)講師褚衍亮鑒定為大戟屬植物地錦草。

        實(shí)驗(yàn)小鼠:昆明小鼠,雄性,清潔級(jí),(25± 2)g,江蘇大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,許可證號(hào),SCXK2012-0011。

        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 UV-9600紫外可見分光光度計(jì)(北京瑞利分析儀器公司);RE-52D旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海青浦滬西儀器廠);601超級(jí)恒溫水浴鍋(金壇市國(guó)旺實(shí)驗(yàn)儀器廠);TGL-16G冷凍離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)(日本和光純藥工業(yè)株式會(huì)社);葡萄糖測(cè)定試劑盒購(gòu)自南京建成科技有限公司;4-硝基酚為國(guó)產(chǎn)化學(xué)純;三羥甲基氨基甲烷(Tris)為國(guó)產(chǎn)生化試劑;甲醇為國(guó)產(chǎn)色譜純;磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、鐵氰酸鉀、三氯乙酸、氯化鐵、氯化鈉、蔗糖、碳酸鈉、醋酸、鹽酸等均為國(guó)產(chǎn)分析純。

        2 實(shí)驗(yàn)方法

        2.1 地錦草樣品的預(yù)處理 將新鮮的地錦草全草清洗干凈,自然晾曬,揮發(fā)水分至樣品恒重,放入粉碎機(jī)中粉碎至粉末狀過(guò)80目篩,干燥低溫(4℃)保存?zhèn)溆谩?/p>

        2.2 地錦草95%乙醇提取物的制備 取3份地錦草粉末,分別加入100 mL的95%、70%、40%乙醇,攪拌浸提12 h,取上清液,重復(fù)3次,合并提取液,50℃減壓濃縮干燥,即得地錦草醇提取物。將得到的提取物冷凍干燥,4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

        2.3 蔗糖酶的抑制實(shí)驗(yàn)

        2.3.1 蔗糖酶的提取 蔗糖酶制備方法參照文獻(xiàn)[10-11]略加修改而來(lái),取成年小鼠小腸,用生理鹽水沖洗干凈并剪碎,加入少許石英砂和聚乙烯吡咯烷酮,研磨至勻漿,在0~4℃下8 000 r/min離心15 min。取上清液,即為粗酶液。以蔗糖作為底物測(cè)定蔗糖酶的活性。

        2.3.2 蔗糖酶的抑制活性測(cè)定 蔗糖酶抑制活性的測(cè)定參照Kim[12]的方法略加修改而來(lái),反應(yīng)體系如下: 10 μL 2 mo1/L蔗糖溶液,加入70 μL 0.05 mo1/L PH 6.8的磷酸緩沖液,再加入10 μL提取物,37℃預(yù)熱5 min后,加入10 μL酶液(約0.1 U,實(shí)驗(yàn)條件下1 min內(nèi)水解麥芽糖產(chǎn)生1 μmo1葡萄糖所需酶量,定義為一個(gè)酶活力單位)啟動(dòng)反應(yīng)。37℃反應(yīng)30 min,加入100 μL 0.05 mo1/L PH 8.8 Tris-HC1緩沖液終止反應(yīng)。以提取溶液代替抑制劑作為全酶管;以緩沖液代替酶液作為校正管。酶促反應(yīng)產(chǎn)生的葡萄糖的測(cè)定采用葡萄糖測(cè)定試劑盒(葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化物酶法)。在酶促反應(yīng)體系中分別加入不同質(zhì)量濃度的抑制劑,測(cè)定其對(duì)蔗糖酶活性的影響。按公式1計(jì)算抑制率。

        2.3.3 IC50值的測(cè)定 以橫坐標(biāo)為酶促反應(yīng)體系中抑制劑的質(zhì)量濃度,縱坐標(biāo)為抑制率,繪圖,計(jì)算并生成公式,其抑制率為50%時(shí)的抑制劑濃度,即為IC50值。

        2.4 95%乙醇提取物的分部萃取 將所得的95%乙醇提取物,用少量的水混懸,再倒入3倍體積的乙醚混勻,接著倒入分液漏斗中,劇烈振蕩30 min,室溫下靜置至兩相完全分離,即得上相乙醚相,下相繼續(xù)依次用氯仿、水飽和正丁醇萃取,分別得到氯仿相、正丁醇相和萃余相(水相)。將各萃取液減壓濃縮至膏狀體,4℃保存,待用。

        2.5 地錦草萃取物的化學(xué)成分分析 化學(xué)成分分析按照謝奇[13]的方法略加修改而來(lái)。采用三氯化鐵法分析酚性成分,PH值法分析脂肪酸成分,醋酸鉛法分析黃酮類成分,碘-碘化鉀法和泡沫實(shí)驗(yàn)分析生物堿成分,氯仿-濃硫酸法分析三萜類成分,苯酚濃硫酸法分析多糖類成分。

        2.6 地錦草乙醚萃取物(DEEF)抗氧化性能的測(cè)定

        2.6.1 DEEF的DPPH自由基清除能力的測(cè)定DPPH自由基清除能力的測(cè)定參考Liu[14]的方法略加修改而來(lái)。以甲醇梯度稀釋地錦草提取液,取1.5 mL樣品加入2.5 mL DPPH,1.5 mL 0.06 mmo1/L甲醇溶液,混勻,20 min后測(cè)定517 nm處吸光度;同法1.5 mL甲醇加入2.5 mL DPPH溶液混勻測(cè)定吸光度。每份樣品平行操作3次,取平均值,以維生素(Vc)為陽(yáng)性對(duì)照。按照公式2計(jì)算清除率。清除能力以IC50來(lái)表示,IC50即清除率為50%時(shí)所需的提取物質(zhì)量濃度。其中A0為空白對(duì)照;Ai為反應(yīng)液的吸光度值;Aj為不加DPPH應(yīng)用液時(shí)提取液自身的吸光度值。

        2.6.2 DEEF的鐵離子還原力的測(cè)定 鐵離子還原力的測(cè)定按照Liu[14]的方法略加修改而來(lái)。1.0 mL提取液中,加入2.5 mL 0.2 mo1/L PH 6.6磷酸緩沖液,然后加入2.5 mL 1%六氰合鐵酸鉀,50℃水浴30 min后加入2.5 mL 10%三氯乙酸,混均后以4 000 r/min離心10 min,取上清液2 mL同2 mL甲醇和0.4 mL 0.1%三氯化鐵混均,于700 nm比色測(cè)定。同時(shí)以Vc作為陽(yáng)性對(duì)照,考察樣品的還原力。還原力以IC50來(lái)表示,IC50為吸光值為0.5時(shí)的提取液質(zhì)量濃度值。

        2.6.3 DEEF的羥自由基清除能力的測(cè)定 羥自由基清除能力的測(cè)定按照梁鵬[15]的方法略加修改而來(lái),以甲醇溶液梯度稀釋地錦草提取液至2 mL,依次加入6 mmo1/L的FeSO42 mL,2.4 mmo1/L的H2O2溶液2 mL,搖勻,靜置10 min,再加入6 mmo1/L的水楊酸溶液2 mL搖勻,然后37℃水浴30 min,離心(3 000 r/min,10 min),取上清液于510 nm處測(cè)吸光值,以Vc作為陽(yáng)性對(duì)照。按照公式3計(jì)算清除率。清除能力以IC50來(lái)表示,IC50即清除率為50%時(shí)所需的提取物濃度。其中A0為空白對(duì)照;Ai為反應(yīng)液的吸光度值;Aj為不加水楊酸時(shí)提取液自身的吸光度值。

        2.6.4 DEEF的超氧陰離子清除能力的測(cè)定 超氧陰離子清除能力的測(cè)定按照李明靜[16]的方法略加修改而來(lái)。甲醇溶液梯度稀釋地錦草提取液至1.0 mL,加入3 mL Tris-HC1(PH=8.2),25℃水浴20 min后,加入100 μL 10 mmo1/L鄰苯三酚,精確反應(yīng)4 min,滴入100 μL 6 mo1/L HC1終止反應(yīng),在325 nm處測(cè)定吸光值。每個(gè)試驗(yàn)作3個(gè)平行樣。空白組以蒸餾水代替樣品溶液。以抗壞血酸作為陽(yáng)性對(duì)照,考察樣品清除·O-2的能力。清除能力以IC50來(lái)表示,IC50即清除率為50%時(shí)所需的提取物濃度。按照公式4計(jì)算清除率。

        3 結(jié)果與分析

        3.1 不同體積分?jǐn)?shù)乙醇溶液對(duì)地錦草提取率的影響 10 g地錦草粉末經(jīng)95%、70%、40%乙醇提取,過(guò)濾并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),以及減壓濃縮干燥之后,得到3種提取物。提取率如圖1所示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明: 40%乙醇提取地錦草的提取率為11.001%;70%乙醇提取地錦草的提取率為15.872%;95%乙醇提取地錦草的提取率為10.594%。

        圖1 不同體積分?jǐn)?shù)乙醇對(duì)地錦草的提取率的影響Flg.1 Effects of dlfferent ethanol concentratlons on the extractlon rate from Euphorbia Humifusa

        3.2 地錦草提取物對(duì)鼠腸蔗糖酶的抑制活性 將所得到的95%乙醇提取物、70%乙醇提取物、40%乙醇提取物與二甲亞砜混勻配成溶液,使得反應(yīng)體系的抑制劑最終的質(zhì)量濃度為1、5、10、50、100 μg/mL。測(cè)得其對(duì)鼠腸蔗糖酶抑制率,結(jié)果如圖2所示。

        地錦草95%乙醇提取物對(duì)蔗糖酶的抑制活性明顯好于40%乙醇提取物和75%乙醇提取物。在1~100 μg/mL范圍內(nèi),地錦草40%與95%乙醇提取物對(duì)蔗糖酶的抑制呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),在1~10 μg/mL范圍內(nèi)隨著抑制劑質(zhì)量濃度的增加,抑制率增高;在10 μg/mL時(shí),地錦草95%乙醇提取物對(duì)蔗糖酶的抑制率達(dá)到48%;在10~100 μg/mL之后隨著抑制劑質(zhì)量濃度的增加,抑制率降低。

        圖2 地錦草提取物對(duì)鼠腸蔗糖酶的抑制率Flg.2 Inhlbltory actlvltles of Euphorbia Hum ifusa at d lfferent concentratlons onα-glucosldase

        3.3 95%乙醇提取物的萃取分離 由前面實(shí)驗(yàn)得到的最好的抑制酶活性的相是95%乙醇相,我們對(duì)該相進(jìn)一步進(jìn)行物質(zhì)的萃取分離,選擇不同極性的溶劑:乙醚、氯仿、水飽和的正丁醇進(jìn)行萃取分離,加上最后水相,得到四相。各萃取物的得率結(jié)果如圖3所示。

        圖3 地錦草9 5%乙醇提取物各萃取物的萃取率Flg.3 Extractlon of 95% ethanol extract of Euphorbia hum ifusa extracts rate

        萃取率分別為乙醚相7.093%,氯仿相0.569%,水飽和正丁醇相14.450%,水相9.821%。

        3.4 不同萃取物對(duì)蔗糖酶的抑制率 將所得到的乙醚萃取物與二甲亞砜混勻,使得反應(yīng)體系的抑制劑最終的質(zhì)量濃度為1、10、25、50、75、 100 μg/mL,測(cè)其抑制率,同樣將氯仿相、水飽和的正丁醇相和水相分別配成相同質(zhì)量濃度,得到對(duì)鼠腸蔗糖酶抑制率,結(jié)果如圖4所示。

        圖4 不同萃取物對(duì)蔗糖酶的抑制率Flg.4 Inhlbltlon ratlo of dlfferent extracts on α-glucosldase

        95%地錦草乙醚萃取物對(duì)蔗糖酶的抑制率在1~100 μg/mL范圍內(nèi)隨著抑制劑質(zhì)量濃度的增加而增高;95%地錦草水飽和正丁醇萃取物對(duì)蔗糖酶的抑制率在1~100 μg/mL范圍內(nèi)并不明顯,在100 μg/mL時(shí)抑制率僅達(dá)到22%;95%地錦草氯仿萃取物對(duì)蔗糖酶抑制率在1~100 μg/mL范圍內(nèi)隨質(zhì)量濃度增大呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),在50 μg/mL時(shí)抑制率達(dá)到33%;95%地錦草水提取物對(duì)蔗糖酶的抑制率在1~100 μg/mL范圍內(nèi)變化并不明顯。按公式1計(jì)算得到的抑制率通過(guò)作圖計(jì)算可得DEEF IC50值為78.8 μg/mL。曹乃峰[17]等用甲醇提取地錦草中降糖活性物質(zhì),其石油醚提取物IC50=279.40 μg/mL、正丁醇提取物IC50= 130.70 μg/mL。本實(shí)驗(yàn)得到的DEEF的IC50值為78.8 μg/mL,比曹乃峰得到甲醇石油醚提取物和正丁醇提取物低,說(shuō)明DEEF具有較好的α-葡萄糖苷酶抑制活性。

        3.5 不同萃取物的化學(xué)成分分析 不同的萃取物經(jīng)過(guò)化學(xué)成分分析,結(jié)果顯示各萃取物中含有酚性成分、脂肪酸成分、三萜類成分等。乙醚相、氯仿相、水飽和正丁醇相及水相的結(jié)果如表1所示。

        由化學(xué)顯色分析可知,95%地錦草的醇提物中,經(jīng)過(guò)乙醚、氯仿、水飽和正丁醇萃取后,萃取物的組成成分各不相同。其中DEEF中的三萜類成分少于其他三相,而酚性成分多余其余三相,而其余成分與其他萃取物所含大致相同。根據(jù)DEEF為地錦草體外抑制α-葡萄糖苷酶活性最強(qiáng)組分,初步推測(cè)DEEF中的酚性成分可能是地錦草降糖活性物質(zhì)的基礎(chǔ)。田瑛[18]等從地錦草70%乙醇提取物中分離得到7個(gè)酚性化合物如短葉蘇木酚(brevifo1in)、短葉蘇木酚酸(brevifo1in carboxy1ic acid)、短葉蘇木酚酸甲酯(methy1brevifo1incarboxy1ate)等。

        表1 萃取物的化學(xué)成分分析Tab.1 Prellm lnary chem lcal composltlon analysls of d lfferent extracts

        3.6 95%地錦草醇提物的乙醚萃取物抗氧化活性的測(cè)定 按“2.6”項(xiàng)實(shí)驗(yàn)方法從4個(gè)方面進(jìn)一步考察了DEEF的體外抗氧化能力。結(jié)果如表2所示。

        表2 地錦草乙醚萃取物的抗氧化活性Tab.2 Antloxldant actlvltles of DEEF

        DEEF的超氧陰離子清除能力EC50值為31.3 μg/mL,Vc的EC50值為31.8 μg/mL,表明DEEF具有較好的超氧陰離子清除能力。李容[19]等研究表明白茅根多糖對(duì)羥基自由基有清除作用,EC50為1.1 mg/mL,王衛(wèi)東[20]等研究表明陳皮提取物質(zhì)量濃度為600 mg/L時(shí)對(duì)羥基自由基抑制率為51.23%。DEEF對(duì)羥自由基的清除率為EC50= 182.7 μg/mL,可見DEEF對(duì)羥自由基的清除能力比白茅根多糖與陳皮提取物好。

        4 討論

        糖尿?。╠iabetes me11itus,DM)是在遺傳和環(huán)境因素相互作用下,產(chǎn)生胰島素分泌相對(duì)不足、絕對(duì)不足、胰島素抵抗,繼而引起體內(nèi)的糖、蛋白質(zhì)、脂肪、水、電解質(zhì)等代謝紊亂,其中以2型糖尿病居多。國(guó)際糖尿病聯(lián)盟(IDF)2013年公布的第六版“IDF糖尿病地圖”顯示,中國(guó)糖尿病人數(shù)居于世界首位,為9 840萬(wàn)。糖尿病的治療和防治給社會(huì)經(jīng)濟(jì)帶來(lái)沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。α-葡萄糖苷酶抑制劑是治療糖尿病的一種有效口服藥物[7],其可通過(guò)抑制小腸α-葡萄糖苷酶的活性,延緩多糖的降解,減少葡萄糖的吸收,抑制餐后血糖的升高。因此,探尋高效、安全的α-葡萄糖苷酶抑制劑是糖尿病干預(yù)或治療的重要研究?jī)?nèi)容。

        王翼[21]等研究表明植物中的多糖、皂苷、黃酮、生物堿、酚類這5類化學(xué)成分在降血糖方面有顯著效果,本實(shí)驗(yàn)化學(xué)成分分析結(jié)果表明DEEF中含有較多的酚性成分,且DEEF對(duì)α-葡萄糖苷酶活性抑制作用最強(qiáng)。田瑛[18]等從地錦草70%乙醇提取物中分離得到7個(gè)酚性化合物,有短葉蘇木酚(brevifo1in)、短葉蘇木酚酸(brevifo1in carboxy1ic acid)、短葉蘇木酚酸甲酯(methy1brevifo1incarboxy1ate)等。由此可見,地錦草中的酚類物質(zhì)可能為降糖活性物質(zhì)基礎(chǔ)。曹乃峰[17]等首先提出地錦草甲醇提取物具有較好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,活性物質(zhì)為地錦草石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物。本實(shí)驗(yàn)以α-葡萄糖苷酶體外抑制活性為追蹤指標(biāo),測(cè)得地錦草的95%乙醇提取物具有最高的α-葡萄糖苷酶的抑制活性(IC50= 78.8 μg/mL),進(jìn)一步采用不同極性的溶劑對(duì)95%地錦草醇提物進(jìn)行萃取分離,得到α-葡萄糖苷酶的抑制活性最強(qiáng)的DEEF部位,實(shí)驗(yàn)表明DEEF部位同時(shí)具有較好的抗氧化活性。

        Brown1ee[22]等提出氧化應(yīng)激是糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生的機(jī)制之一。氧化應(yīng)激是體內(nèi)大量活性分子的產(chǎn)生和抗氧化防御能力不平衡的一種狀態(tài),其會(huì)導(dǎo)致組織受損?;钚匝酰≧OS)是氧化應(yīng)激的主要來(lái)源之一,主要包括超氧陰離子、羥自由基、過(guò)氧化氫等[23]。本實(shí)驗(yàn)以DEEF對(duì)DPPH自由基、羥自由基、超氧陰離子的清除能力以及鐵離子的還原能力研究了DEEF的抗氧化能力,結(jié)果表明,DEEF清除超氧陰離子的EC50值為31.3 μg/mL,羥自由基清除能力EC50值為182.7 μg/mL,鐵離子還原能力EC50值為76.9 μg/mL,DPPH自由基清除能力EC50值為132.9 μg/mL。李潔[24]等研究表明昆侖雪菊多糖具有α-葡萄糖苷酶抑制活性,質(zhì)量濃度為0.091 72 mg/mL時(shí),對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制作用達(dá)到50%,DPPH自由基清除能力EC50值為0.939 4 mg/mL,具有一定的抗氧化能力;李榮[19]等研究表明,白茅根多糖對(duì)羥基自由基有清除作用,EC50為1.1 mg/mL,但對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制作用較低。由此可見,DEEF具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制能力且同時(shí)具有較好的抗氧化活性。因此,本實(shí)驗(yàn)在為地錦草的降糖活性機(jī)制研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),同時(shí)也為地錦草的進(jìn)一步開發(fā)及其在降糖活性保健產(chǎn)品中的利用奠定基礎(chǔ)。

        參考文獻(xiàn):

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        Antloxldant andα-glucosldase lnhlbltory actlvltles of Euphorbia Humifusa extracts

        ZHENG Qiao, YANG Er-1ei, ZHU Ying, TU Jie*
        (School of Biotechnology,Jiangsu University of Science and Technology,Zhenjiang 212018,China)

        ABSTRACT:AIM To study antioxidantand α-g1ucosidase inhibitory activities of EuPhorbia Humifusa extracts in vitro.METH0DS Theα-g1ucosidase inhibitory activities of40%,70%,and 95% ethano1extracts from E.Humifusa were tested,of which the higher inhibitory activity of ethano1 extract was se1ected for further extraction. Tested extraction so1ventswere diethy1ether,ch1oroform,water-satureted n-butano1,and water.Free radica1-,hydroxy1 free radica1-,suPeroxide anion-scavenging caPacity,and iron ion reducing caPacity were examined.RESULTS 95% ethano1extracts from E.Humifusa had the stronestα-g1ucosidase inhibitory activity and the diethy1 ether extract had the strongestα-g1ucosidase inhibitory activity of them,with its IC50va1ue at 78.8 μg/mL.The Pre1iminary chemica1comPositions of diethy1ether extract showed Pheno1ic comPounds;their free radica1scavenging caPacity EC50was132.9 μg/mL;iron ion reducing caPacity was76.9 μg/mL;hydroxy1 free radica1scavenging ca-Pacity was 182.7 μg/mL;suPeroxide anion scavenging caPacity was 31.3 μg/mL.C0NCLUSI0N The diethy1 ether extract of 95% ethano1extracts from E.Humifusa has the antioxidant and re1ative1y the strongestα-g1ucosidase inhibitory activity.

        *通信作者:屠 潔(1977—),女,碩士,副教授,研究方向?yàn)槭称飞锛夹g(shù)。Te1: 13921581995,E-mai1: tujie@just.edu.cn

        作者簡(jiǎn)介:鄭 巧(1994—),女,研究方向?yàn)樘烊凰幬锘钚猿煞?。Te1: 18362894635,E-mai1: 1300205004@qq.com

        基金項(xiàng)目:江蘇科技大學(xué)本科生創(chuàng)新計(jì)劃(2014年)

        收稿日期:2015-07-08

        中圖分類號(hào):R285.5

        文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

        文章編號(hào):1001-1528(2016)02-0252-06

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