廖　聰，牛鑫鑫，黃　皓，艾顯輝,王曉菲，薛　原

(東北林業(yè)大學(xué)野生動(dòng)物資源學(xué)院,黑龍江哈爾濱 150040)

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哈爾濱地區(qū)雞源沙門(mén)菌耐藥性分析

廖聰，牛鑫鑫，黃皓，艾顯輝,王曉菲，薛原*

(東北林業(yè)大學(xué)野生動(dòng)物資源學(xué)院,黑龍江哈爾濱 150040)

摘要:對(duì)黑龍江省哈爾濱地區(qū)雞源沙門(mén)菌進(jìn)行分離培養(yǎng)，并進(jìn)行沙門(mén)菌耐藥性調(diào)查。采用紙片擴(kuò)散法測(cè)定各分離菌株對(duì)19種抗菌藥物的敏感性。結(jié)果表明，雞源沙門(mén)菌各分離株對(duì)不同抗菌藥物的敏感性不同，對(duì)氨芐西林、恩諾沙星、卡那霉素和強(qiáng)力霉素的耐藥率較高，對(duì)阿莫西林/棒酸、阿米卡星和亞胺培南敏感。

關(guān)鍵詞:沙門(mén)菌；耐藥性；藥敏試驗(yàn)

沙門(mén)菌是人類(lèi)食源性疾病常見(jiàn)的病原菌之一。絕大多數(shù)沙門(mén)菌對(duì)人和動(dòng)物具有致病性,能引起人和動(dòng)物不同的沙門(mén)菌病，是引起人類(lèi)食物中毒的常見(jiàn)病原菌，在獸醫(yī)公共衛(wèi)生上具有十分重要的意義。

應(yīng)用抗微生物藥對(duì)控制和預(yù)防畜禽的沙門(mén)菌病發(fā)揮了巨大的作用。然而隨著抗微生物藥的廣泛、持續(xù)和不當(dāng)使用，沙門(mén)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性日趨普遍。本研究以雞源沙門(mén)菌為研究對(duì)象，進(jìn)行了耐藥性分析，旨在為抗菌藥物的正確使用提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1菌株藥敏質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922，購(gòu)自中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所；試驗(yàn)用沙門(mén)菌于2014年8月～12月從哈爾濱周邊地區(qū)雞群分離的沙門(mén)菌33株，所有菌株均經(jīng)過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的生化試驗(yàn)。分離菌株用于藥敏試驗(yàn)確證。

1.1.2培養(yǎng)基普通瓊脂和水解酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(Mueller-Hinton,MH),杭州天和微生物試劑有限公司產(chǎn)品(批號(hào)120201)。

1.1.3藥敏紙片 藥敏片共19種，購(gòu)自杭州天和微生物試劑有限公司。包括β-內(nèi)酰胺類(lèi)：阿莫西林/克拉維酸鉀(AMC)、氨芐西林(AMP)、氨曲南(AZT)、頭孢他啶(CZ)、頭孢噻吩(KF)、亞胺培南(IPM)；氨基糖苷類(lèi)：阿米卡星(AK)、慶大霉素(CN)、卡那霉素(KAN)、新霉素(FY)；喹諾酮類(lèi)： 諾氟沙星(NOR)、恩諾沙星(ENR)、環(huán)丙沙星(CIP)、氧氟沙星(OFL)；四環(huán)素類(lèi)：多西環(huán)素(DO)、四環(huán)素(TE)；磺胺類(lèi)：復(fù)方新諾明(SMZ)；氯霉素類(lèi)：氯霉素(CMP)；多肽類(lèi)：多黏菌素B(POL)。

1.2方法

1.2.1藥敏試驗(yàn)采用WHO推薦的Kirby-Bauer法[1]。依據(jù)CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，只有當(dāng)質(zhì)控菌株的抑菌圈直徑在允許范圍內(nèi),測(cè)試菌株結(jié)果才有效。

1.2.2判定標(biāo)準(zhǔn)按抗菌藥物敏感性試驗(yàn)擴(kuò)散法標(biāo)準(zhǔn)[2]，判定各菌株的敏感度，對(duì)所分離的細(xì)菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。以抑菌圈的大小判定敏感(susceptible)、中介(intermediate)、耐藥(resistant)。

2結(jié)果

2.1沙門(mén)菌的耐藥性

33株細(xì)菌均可產(chǎn)生耐藥性。對(duì)氨芐西林(AMP)、恩諾沙星(ENR)、卡那霉素(KAN)和強(qiáng)力霉素(DO)的耐藥率較高，達(dá)80%以上；對(duì)阿莫西林/棒酸(AMC)、阿米卡星(AK)和亞胺培南(IPM)高度敏感，其中IPM敏感率達(dá)97% (圖1)。

2.2沙門(mén)菌的多重耐藥性

32株受試沙門(mén)菌對(duì)19種抗菌藥物有多重耐藥性，表現(xiàn)對(duì)4種或4種以上藥物耐藥。6重耐藥菌株和7重耐藥菌株所占比例最大,均為21.2%，其次是5重耐藥和8重耐藥均為15.2%。分離菌株存在多重耐藥現(xiàn)象，最少為4種，最多為10種，存在敏感性較高的1株，為2重耐藥(圖2)。

2.3沙門(mén)菌的耐藥類(lèi)型

受試雞源沙門(mén)菌中，共有18種耐藥類(lèi)型(表1)。

圖1　禽源沙門(mén)菌對(duì)19種抗菌藥物的體外藥敏試驗(yàn)結(jié)果

圖2　受試沙門(mén)菌的耐藥總數(shù)

編號(hào)Number耐藥類(lèi)型Typeofdrugresistance耐藥種數(shù)No.drugresistance1POL-CN22ENR-TE-KF-DO43TE-KF-NOR-DO44AMP-KAN-SXT-TE-KF55KAN-CMP-SXT-KF-NOR56AMP-KAN-SXT-TE-KF-ENR67AMP-ENR-KAN-CMP-TE-DO68AMP-POL-CIP-TE-CN-DO69CMP-SXT-TE-KF-NOR-DO610AMP-ENR-CIP-KAN-SXT-CZ-CN711AMP-ENR-CIP-KAN-CMP-KF-NOR712ENR-KAN-SXT-TE-KF-CN-DOX713AMP-POL-ENR-KAN-CMP-SXT-KF-CN814AMP-POL-KAN-CMP-SXT-TE-NOR-DO815AMP-POL-ENR-CIP-SXT-TE-KF-CZ-DO916AMP-AZT-ENR-CIP-KAN-KF-CZ-NOR-DO917AMC-AMP-AZT-ENR-CIP-KAN-TE-KF-CN918AMP-ENR-CIP-KAN-CMP-SXT-TE-KF-CN-NOR10

3討論

沙門(mén)菌病是獸醫(yī)臨床上具有重要意義的人畜共患病之一。沙門(mén)菌是引起人類(lèi)食物中毒最常見(jiàn)的致病菌[3]。在我國(guó)由沙門(mén)菌引起的食物中毒屢居首位[4]。由于抗微生物藥的廣泛應(yīng)用，使得沙門(mén)菌的耐藥譜不斷增寬，特別是出現(xiàn)了多重耐藥菌株。許多耐藥基因可在動(dòng)物和人類(lèi)病原菌間相互傳播，嚴(yán)重危害養(yǎng)殖業(yè)[5]。國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)顯示，沙門(mén)菌的耐藥率逐漸上升，耐藥譜逐漸變寬[6-7]。潘志明等[8]根據(jù)325株雞沙門(mén)菌不同年代多重耐藥菌株的變化，得出20世紀(jì)60年代菌株幾乎沒(méi)有多重耐藥性，20世紀(jì)70年代以四重耐藥、五重耐藥菌株為主，20世紀(jì)80年代以五重耐藥、六重耐藥、七重耐藥菌株為主，20世紀(jì)90年代七重耐藥以上菌株的比率高達(dá)83.7%，而且對(duì)青霉素、鏈霉素、卡那霉素等藥物的耐藥性大多呈現(xiàn)出顯著增強(qiáng)的變化趨勢(shì)。戴建華等[9]從江蘇蘇中地區(qū)分離到禽源沙門(mén)菌，其多重耐藥現(xiàn)象較嚴(yán)重，且每個(gè)菌株耐藥表型均在4重或4重以上，甚至有10重耐藥菌株。李靜怡等[10]從廣東和廣西兩省分離雞白痢沙門(mén)菌，發(fā)現(xiàn)菌株對(duì)青霉素G、利福平、紅霉素等常用藥物高度耐藥。唐攀等[11]發(fā)現(xiàn)42株雞源沙門(mén)菌對(duì)四環(huán)素、氨芐青霉素和萘啶酸普遍耐藥，耐藥率均在60%以上，4重以上耐藥菌株占88.9%。

哈爾濱地區(qū)的受試雞源沙門(mén)菌對(duì)試驗(yàn)所采用的19種抗菌藥物均有不同程度耐藥性。其中最少的耐藥2種，最多的耐藥10種。33株耐藥沙門(mén)菌中有97%為多重耐藥，其中耐4種抗菌藥物的占9%，耐5種～9種抗菌藥物的占88% ，耐10 種抗菌藥物的占3%。對(duì)氨芐西林、恩諾沙星、卡那霉素和強(qiáng)力霉素的耐藥率較高。分離的菌株中具有耐藥性的占100%，其中恩諾沙星的耐藥比例高達(dá)94%。同時(shí)也看出，受試大腸埃希菌對(duì)亞胺培南敏感性相對(duì)較高，敏感比例達(dá)到97%。在動(dòng)物飼養(yǎng)過(guò)程中抗菌藥物的不規(guī)范使用或?yàn)E用，從而導(dǎo)致沙門(mén)菌的多重耐藥現(xiàn)象，這將會(huì)對(duì)人畜沙門(mén)菌病的控制產(chǎn)生不利影響，應(yīng)引起高度重視。沙門(mén)菌可以將其抗藥性質(zhì)粒傳遞給其他菌株，所以沙門(mén)菌的抗藥性形成較快，導(dǎo)致環(huán)境中沙門(mén)菌耐藥性菌株越來(lái)越多。為控制耐藥性沙門(mén)菌的發(fā)展，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)沙門(mén)菌耐藥性監(jiān)測(cè)力度。

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Drug Resistance Analysis ofSalmonellaIsolated from Chickens in Harbin

LIAO Cong,NIU Xin-xin,HUANG Hao,AI Xian-hui,WANG Xiao-fei，XUE Yuan

(CollegeofWildlifeResource,NortheastForestUniversity,Harbin,Heilongjiang,150040,China)

Abstract:In order to investigate the multi-drug resistance of Salmonella from chickens,Salmonella were isolated from the fecal samples in chicken farms of Harbin region.The sensitivities of Salmonella isolates to 19 antimicrobials were determined by scrip diffusion method.The results of antimicrobials sensitivity test indicated that all the isolates had drug resistance.Most of the isolated Salmonella strains had high resistance to ampicillin,enrofloxacin,kanamycin and doxycycline,had high sensitivity to amoxicillin/clavulanate acid,amikacin and imipenem.

Key words: ：Salmonella；drug resistance；drug sensitivity test

文章編號(hào):1007-5038(2016)03-0131-03

中圖分類(lèi)號(hào):S852.612;S858.31

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B

作者簡(jiǎn)介：廖聰(1994-)，女，湖北十堰人，本科，研究方向?yàn)閯?dòng)物藥理學(xué)與毒理學(xué)。 *通訊作者

基金項(xiàng)目：東北林業(yè)大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(201410225173)；黑龍江省博士后科研啟動(dòng)金(LBH-Q14002);中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)(2572015CA21)；黑龍江省教育廳科學(xué)技術(shù)研究(指導(dǎo))項(xiàng)目(12543010)

收稿日期：2015-07-22