周 穎，安 瑩

（徐州工業(yè)職業(yè)技術學院化學工程學院，江蘇 徐州 221140）

紙杯裝奶茶外包裝中3種鄰苯二甲酸酯的測定

周 穎，安 瑩

（徐州工業(yè)職業(yè)技術學院化學工程學院，江蘇 徐州 221140）

以市售紙杯奶茶的外包裝為研究對象，采用高效液相色譜法，對其中DMP，DEP，DBP 3種鄰苯二甲酸酯進行測定。建立超聲-微波協(xié)同萃取與DAD檢測方法，采用單因素試驗確定提取條件：以甲醇為提取劑，在220w功率、料液比1：100條件下萃取7min；確定了色譜條件為：采用Venusil XBP C18（4.6*250mm，5μm）色譜柱，檢測器：DAD，檢測波長224nm，柱溫30℃；以甲醇和水為流動相，其中甲醇：水=25：75（V/V），流速1.0mL/min，進樣量10μL，采用等梯度洗脫程序，運行時間20min。結果表明，該方法準確可靠，測定值的相對標準偏差RSD（n=5）為1.8%～2.8%，其回收率在86.25%～92.5%之間，可用于紙質包裝材料中鄰苯二甲酸酯的檢測。

奶茶杯；鄰苯二甲酸類增塑劑；高效液相色譜；超聲-微波協(xié)同萃取

0 引言

鄰苯二甲酸酯，又稱為酞酸酯，縮寫為PAEs，是由鄰苯二甲酸形成的一系列酯的統(tǒng)稱，常用作塑料增塑劑，可使聚氯乙烯由硬塑膠變?yōu)橛袕椥缘乃苣z。常見的品種有：鄰苯二甲酸二辛酯（DOP）、鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸甲苯基丁酯（BBP）、鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）、鄰苯二甲酸二正辛酯（DNOP）、鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）、鄰苯二甲酸二甲酯（DMP）、鄰苯二甲酸二己酯（DHP）等[1-2]。它們普遍應用于玩具、食品包裝材料、醫(yī)用血袋和膠管、乙烯地板和壁紙、清潔劑、潤滑油、個人護理用品（如指甲油、頭發(fā)噴霧劑、香皂和洗發(fā)液）等工業(yè)產(chǎn)品中，但對人體健康有嚴重危害，如降低男性生殖能力，增大心血管疾病風險等[3]。本文以市售的品牌紙杯裝奶茶的外包裝紙杯為研究對象，建立了超聲-微波協(xié)同萃取-HPLC檢測DMP，DEP，DBP 3種鄰苯二甲酸類增塑劑的方法，同時探討最佳提取條件，旨在對食品接觸材料中鄰苯二甲酸類增塑劑的控制提供參考。

1 實驗儀器與試劑

1.1 實驗試劑

鄰苯二甲酸二甲酯（DMP）、鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP），以上標準品均為德國Dr. Ehrenstorfer Gm-bH公司生產(chǎn)，含量均在98%以上；乙腈、甲醇（色譜純）；甲醇、二氯甲烷、丙酮、正己烷（分析純）；實驗用水均為超純水。

1.2 實驗儀器

儀器：FA1204B電子天平、GZX-9023A電熱恒溫鼓風干燥箱、CW-2000超聲-微波協(xié)同萃取儀、SHB-III循環(huán)水式多用真空泵、旋轉蒸發(fā)器、KQ-300DE數(shù)控超聲波清洗器、L-2000島津高效液相色譜儀（配L-2130四元泵、L-2200自動進樣器、L-2484DAD檢測器）、P120-W超純水儀。

樣品：隨機市購4個品牌的奶茶紙杯。

2 實驗方法

2.1 標準溶液的制備

準確稱取DMP，DEP，DBP等3種標準品各0.1000克，用正己烷配制成1g/L的標準儲備液，于4℃冰箱中冷藏避光保存，備用。

2.2 標準儲備液的配制

精密移取標準儲備液5uL，10uL，20uL，40uL，80uL于10mL容量瓶中，用正己烷定容，配制成濃度為0.5g/L，1.0g/L，2.0g/L，4.0g/L，8.0g/L的標準使用液，放入4℃冰箱中冷藏避光保存，備用[4]。

2.3 樣品前處理

將奶茶杯樣品粉碎至0.02g，稱取樣品0.500g（精確至1mg），置于50mL錐形瓶中，按照一定料液比準確加入提取劑，利用超聲-微波協(xié)同儀在一定微波功率下萃取一定時間，經(jīng)過濾、濃縮后，取上清液經(jīng)注射器過濾（0.45μm有機型濾膜），待上機測定。

2.4 色譜條件

采用Venusil XBP C18（4.6*250mm，5μm）色譜柱，檢測器：DAD，檢測波長224nm，柱溫30℃；以甲醇和水為流動相，其中甲醇：水=25：75（V/V），流速1.0mL/min，進樣量10μL，采用等梯度洗脫程序，運行時間20min[5]。

3 實驗結果與討論

3.1 最大吸收波長的確定

分別對3種鄰苯二甲酸酯標準品在190～400nm之間進行紫外全波長范圍掃描，發(fā)現(xiàn)3種鄰苯二甲酸酯類光譜圖很相似，均在224nm處有最大吸收值，故選擇的檢測波長為224nm。

3.2 色譜柱的確定

選用XBP C18（4.6×250mm，5μm）液相色譜柱和ASB C18（4.6×150mm，5μm）液相色譜柱，在2.4條件下進行檢測，通過液相色譜圖比較兩種色譜柱，發(fā)現(xiàn)XBP C18（4.6×250mm，5μm）色譜柱峰形較好，且使用范圍更廣，故選用XBP C18（4.6×250mm，5μm）色譜柱。

3.3 流動相的確定

選用XBP C18（4.6×250mm，5μm）色譜柱，分別以乙腈-水和甲醇-水為流動相在3.4色譜條件下進行試驗，通過液相色譜圖比較兩種色譜柱，兩者峰形相似，且均可將3種標準品較好地分離，考慮到乙腈毒性大于甲醇，故選取甲醇-水作為流動相。圖1為3種鄰苯二甲酸酯標準溶液色譜圖，3種物質的出峰時間分別為：4.65 min，9.19 min，15.45min。

圖1 3種鄰苯二甲酸酯標準溶液色譜

3.4 提取劑的確定

精確稱取5份0.5g樣品，按照2.3中的方法分別用50mL甲醇、正己烷、乙腈、二氯甲烷、丙酮在200W功率下超聲-微波協(xié)同提取6min，提取液進液相色譜儀檢測。結果表明，提取劑種類對3種PAEs的總峰面積大小影響較大，5種提取劑中，甲醇和乙腈提取效果較好?？紤]到試劑毒性問題，試驗選用毒性相對較小的甲醇做提取劑。

3.5 提取時間的選擇

精確稱取5份0.5g樣品，按照2.3中的方法，以50ml甲醇為提取劑，在220w功率下，采用超聲-微波協(xié)同法分別提取5min，6min，7min，8min，9min，提取液進液相色譜儀檢測。結果表明，隨著提取時間的延長，3種PAEs的總峰面積逐漸增大，在7min以后，增大趨勢不太明顯，故選取7min為最佳提取時間。

3.6 提取功率的選擇

精確稱取5份0.5g樣品，按照2.3中的方法，以50ml甲醇為提取劑，分別選取200W，210W，220W，230W，240W 5個功率進行超聲微波協(xié)同萃取，提取時間均為7min。結果表明：隨著提取功率的增大，3種PAEs的總峰面積逐漸增大，在220W達到最大值，故確定最佳提取功率為220W。

3.7 料液比的選擇

精確稱取5份0.5g樣品，按照2.3中的方法，分別按照料液比1∶80，1∶90，1∶100，1∶110，1∶120加入甲醇提取劑，在220W功率下，超聲-微波協(xié)同提取7min，提取液進液相色譜儀檢測。結果表明：隨著料液比的增大，3種PAEs的總峰面積迅速增大，當料液比大于1∶100時，總峰面積略微下降，故選擇1∶100為最佳料液比。

3.8 方法的線性范圍及檢測限

按2.2配制3種PAEs的系列標準溶液，并按照2.4進行測定，并繪制標準曲線，得到的線性回歸方程、線性相關系數(shù)、線性范圍、檢測限如表1所示。

表1 方法的線性范圍及檢測限

3.9 精密度與回收率試驗

準確移取濃度為2mg/L的DMP，DEP，DBP混合標準溶液10μL在2.4色譜條件下連續(xù)進樣5次，測定結果的相對標準偏差RSD在1.8%～2.8%范圍內，符合常規(guī)檢測要求。

選取不含DMP，DEP，DBP的紙樣進行加標回收試驗，稱取2組粉碎后的樣品各0.5g，加入2個不同濃度的標準溶液，每個濃度做3個平行樣，按2.3方法進行樣品處理，在2.4條件下測定，結果顯示：DMP，DEP，DBP標準品加標回收率在86.25%～92.5%范圍內，符合常規(guī)檢測要求。

3.10 樣品含量測定

取不同品牌的奶茶紙杯樣品各4種，檢測其中3種鄰苯二甲酸酯含量，結果如表2所示，與GB9685-2008食品容器、包裝材料用添加劑使用衛(wèi)生標準相對照[6]，均符合要求。

表2 樣品中3種鄰苯二甲酸酯含量 （mg/kg）

4 結語

本文通過試驗優(yōu)化了超聲-微波協(xié)同萃取紙質包材中鄰苯二甲酸酯的提取條件，即以甲醇為提取劑，選用1：100的料液比，在220W功率下，提取7min，提取效果最好；建立了液相色譜法測定紙質包材中塑化劑的檢測條件為：采用XBPC18（4.6×250mm，5μm）液相色譜柱，設定檢測波長為224nm，柱溫為30℃；以甲醇和水為流動相，其中甲醇：水=25：75（V/V），流速1.0mL/min，進樣量10μL，采用等梯度洗脫程序，運行時間20min。該法準確可靠，測定值的相對標準偏差RSD（n=5）為1.8%～2.8%，加標回收率在86.25%～92.5%之間，符合常規(guī)檢測要求，可用于紙質包裝材料中鄰苯二甲酸酯的檢測。

[1]周益奇，王子健.污水中6種鄰苯二甲酸酯的測定[J].分析測試學報，2009，28（12）：1419-1423.

[2]李天寶，劉煒，王春利，等. 鄰苯二甲酸酯類增塑劑提取技術研究進展[J].化學分析計量，2015，24（4）：99-102.

[3]劉延莉，黎繼烈，李忠海，等.紙質食品包裝材料的研究現(xiàn)狀[J].包裝工程，2010，31（7）：108-133.

[5]楊博鋒，湯志旭，高昕，等.高效液譜法測定紙制食品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的遷移量[J].分析測試學報，2012，31（10）：1272-1276.

Determination of three kinds of phthalates in paper packaging cups of milky tea

Zhou Ying, An Ying
(Xuzhou College of Industrial Technology, School of Chemical Engineering, Xuzhou, 221140, China)

The outer paper packaging cups of commercial milky tea were considered as the research subject, from which three kinds of phthalates DMP, DEP, DBP were determined, using high performance liquid chromatography. The methods of ultrasonicmicrowave synergistic extraction and DAD detection were established, and single factor experiments were used to determine the extraction conditions： using methanol as extraction agent, power：220W, material-to-liquid ratio：1：100, extraction time：7min. The chromatographic conditions were as follow：using Venusil XBP C18 （4.6*250mm, 5 m）column, detector：DAD , the detection wavelength：224nm, the column temperature：30℃; using methanol and water as mobile phase： methanol：water =25：75（V/V）, fl ow rate：1.0mL/min, sample volume：10 L, using gradient elution procedure, operation time：20min. The results indicated that：the method was accurate and reliable, the relative standard deviation RSD （n=6）of the estimated values were among 1.8% to 2.8%, the recoveries were among 86.25% to 92.5%, and it can be used for detection of phthalic acid esters in paper packaging materials.

milky tea cups; phthalates; HPLC; ultrasonic-microwave synergistic extraction

徐州工業(yè)職業(yè)技術學院院級課題；項目名稱：食品及包裝材料中鄰苯二甲酸脂類塑化劑分析方法的研究，項目編號：2055088679990901。

周穎（1983— ），女，漢族，陜西漢中人，講師；研究方向：食品分析與檢測方向的研究。安瑩（1981— ），女，滿族，黑龍江齊齊哈爾人，副教授；研究方向：食品安全方向的研究 。