任憶秋王 重劉承軍　王海麗

（1.東昌府區(qū)畜牧獸醫(yī)局，山東聊城 252000；

2.聊城市畜牧獸醫(yī)技術服務中心，山東聊城 252000；

3.聊城職業(yè)技術學院，山東聊城 25200）

蛋雞腫瘤病的診斷與鑒別技術概述

任憶秋1王 重1劉承軍2王海麗3*

（1.東昌府區(qū)畜牧獸醫(yī)局，山東聊城 252000；

2.聊城市畜牧獸醫(yī)技術服務中心，山東聊城 252000；

3.聊城職業(yè)技術學院，山東聊城 25200）

腫瘤性疾病是威脅養(yǎng)禽業(yè)的重要疾病，給養(yǎng)禽業(yè)造成的損失較大。本文就國內蛋雞腫瘤病的的流行情況和臨床鑒別進行了總結，為蛋雞養(yǎng)殖者提供參考。

蛋雞；腫瘤病；鑒別；概述

隨著養(yǎng)禽業(yè)規(guī)模養(yǎng)殖的不斷擴大，蛋雞腫瘤性疾病呈高發(fā)態(tài)勢，較突出病種有馬立氏克?。∕D）、淋巴白血?。ˋL）以及網狀內皮組織增生癥（RE），因免疫抑制作用危害，給蛋雞養(yǎng)殖業(yè)造成重大的損失。該疾病具有病死率較高，發(fā)病原因多，臨床癥狀復雜等特點，特別是腫瘤性疾病混合感染或繼發(fā)其他疾病，生產中往往造成更大經濟損失。

1 蛋雞腫瘤性疾病的流行情況

腫瘤病在我國蛋雞養(yǎng)殖場中均有不同程度的存在，具有野毒毒力增強、發(fā)病日齡提前、混合感染普遍等特點。

1.1 馬立氏克病

近年來，我國發(fā)生MD 免疫失敗和分離強毒力毒株的報道不斷增多，已分離出馬立克氏病超強毒。隨著生產中MDV 毒力的不斷增強，出現(xiàn)馬立克氏病超（特）超強毒亦已變?yōu)榭赡堋Ｑ芯勘砻?，MDV 毒力逐年變強與飼養(yǎng)密度過大、疫苗免疫壓力上升和非規(guī)范免疫普遍等因素有關。據(jù)報道，在一定地區(qū)對蛋雞實施低劑量MD疫苗接種的雞場過度集中，以及生物安全措施存在明顯漏洞時，MDV 的毒力逐漸變異增強，從溫和型向超（特）超強毒演變。高毒力的毒株趨向于在更短的時間內導致淋巴細胞的增生以及延長感染到排毒的時間，且部分免疫雞群仍可暴發(fā)，使用火雞皰疹病毒疫苗（HVT）的保護效果甚微。在存在免疫抑制病或管理條件差的情況下，甚至CVI988 疫苗的保護率也有所降低。需要注意的是，盡管部分接種CVI988 疫苗的蛋雞場責怨MD 腫瘤帶來的死亡率明顯增加，少數(shù)達到10%。但在這些發(fā)病雞群中，腫瘤通常發(fā)生較晚，18 ～ 24 周齡才開始出現(xiàn)，且大多數(shù)表現(xiàn)為彌漫性的小的腫瘤結節(jié)而不是大的腫瘤結節(jié)或腫瘤塊，在形態(tài)上很難與禽白血病病毒（ALV-J）和網狀內皮癥病毒（REV）的腫瘤相區(qū)別。據(jù)報道，在腫瘤發(fā)病率較高的雞場送檢的病雞中，不同致瘤病毒的共感染現(xiàn)象相當常見，單純MD 感染時腫瘤發(fā)生率小于5%，而MD 與REV 混合感染則腫瘤發(fā)生率卻大大提升，通常在8% 以上。有報道顯示，山東和河北等地腫瘤發(fā)病雞群中，有一半以上同時存在著MDV 和REV 的共感染。另外，我國最近分離到一些ALV - -J 毒株的致病力明顯增強，導致發(fā)病日齡提前，值得對該病加以關注。在我們對臨床病料的檢測實例中，多次發(fā)現(xiàn)ALV -J 與REV 存在明顯的共感染現(xiàn)象。目前，REV與其他腫瘤病毒的共感染是相當普遍的。實際上，在流行病學調查中，REV 與其他非腫瘤性病毒如雞傳染性貧血病毒（CAV）或呼腸孤病毒（REO）的共感染也非常普遍。REV感染本身固然能誘發(fā)腫瘤，但可能更重要的是，由REV 感染造成的免疫抑制會大大減低其他疫苗如MD 疫苗的免疫效果，也會加強MDV 或ALV 的致腫瘤作用。嚴重發(fā)生MD 和ALV-J亞型腫瘤的雞群都并發(fā)REV 感染，REV 在腫瘤中檢出率在30%以上，目前已接近50%?；蛟S我們會發(fā)起疑問，為什么近年來在我國雞群中有這么高的REV分離率？這確實是一個值得我們認真對待的問題。目前，由商品胚（非SPF 雞胚）制備的MD 疫苗或雞痘疫苗等活苗存在污染外源病原的現(xiàn)象，特別是一些免疫抑制性病原，如REV、ALV、CAV 等，除本身導致發(fā)病引起腫瘤外，還可造成免疫抑制，影響疫苗的免疫應答，進而出現(xiàn)免疫失敗。據(jù)報道，目前國內活苗中REV 的污染率可達38. 8%，由其所致的腫瘤情況已有多起報道。因此，一定要選擇正規(guī)生產廠家用SPF 雞胚制備的疫苗，這樣才能盡最大可能降低MD 和其他疾病的發(fā)生。

2 診斷方法

對于單一、典型的病例，根據(jù)病理組織切片，結合流行病學特點可對MD 和AL 作出初步鑒別診斷。通常情況下，MD 腫瘤以大小和形態(tài)不一的T 淋巴細胞瘤為主，發(fā)病高峰在3 月齡以下，雞只出現(xiàn)虹膜炎、四肢麻痹、坐骨神經或臂神經腫脹等癥狀。ALV的A、B、C 和D 亞型可引發(fā)經典的白血病腫瘤，主要為形態(tài)大小均一的B 淋巴細胞瘤；J 亞型主要導致骨髓樣細胞瘤，發(fā)病高峰在4～5 月齡以后。需要注意的是，REV 既能誘發(fā)在宏觀上和微觀上都與MD腫瘤相似的T 細胞淋巴瘤，又可導致與AL 的B 淋巴細胞瘤和骨髓樣細胞瘤相似的復雜形態(tài)的腫瘤，臨床上很難將其與MD 和AL 相區(qū)分，也使得基于臨床癥狀的診斷非常不確實。目前，國內外專家已形成共識，即靠單一的病理學檢查已很難對家禽腫瘤病作出正確的鑒別診斷，需要依靠綜合應用不同的實驗室檢測方法進行確診?？捎糜谠\斷腫瘤病的方法很多，例如常規(guī)病理切片、聚合酶鏈式反應（PCR）、免疫組化法、核酸探針技術等。常規(guī)病理切片是用H. E 染色組織切片，鏡下觀察腫瘤組織的細胞類型，確定是T 淋巴細胞、B 淋巴細胞、骨髓樣瘤細胞還是網狀內皮細胞等。目前，免疫組織化學已被引入腫瘤病的檢測，該法需要使用單克隆抗體，將固定的組織切片用病毒特異性抗體免疫染色。例如單抗做免疫組化學染色可檢測MD 轉化細胞上表達的MDV 抗原，能排除ALV 或REV，對MD腫瘤具有診斷意義。近年來，人們對MDV、ALV 和REV 的檢測還采用了PCR 法，與傳統(tǒng)的診斷方法相比，PCR 技術具有快速、敏感、特異的特點。對腫瘤組織提取DNA，分別用相應的特異性核酸引物做PCR 擴增，即可確定雞群中存在哪一種或哪幾種病原感染。此外，核酸探針檢測也可用于疾病的診斷，通過提取腫瘤組織DNA，分別用不同病毒特異性核酸探針作斑點分子雜交，以確定雞群中存在哪一種或哪幾種病原感染。

［1］ 韋平，何秀苗，王桂軍，等.雞腫瘤病快速鑒別診斷技術的建立［J］.揚州大學學報：農業(yè)與生命科學版，2002，23（2）：1-5.