李洪，王光棟，陳乙萱，鄭淋，黎其朝

（瓊海市人民醫(yī)院檢驗科，海南 瓊海571400）

全自動尿液有形成分分析儀細(xì)菌檢測對尿路感染診斷價值的探討

李洪，王光棟，陳乙萱，鄭淋，黎其朝

（瓊海市人民醫(yī)院檢驗科，海南 瓊海571400）

目的 探討UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細(xì)菌信息對臨床尿路感染（UTI）診斷的應(yīng)用價值。方法 收集216例臨床疑似尿路感染患者尿液樣本，分別采用UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀和尿液細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定，比較兩者結(jié)果。結(jié)果 216例臨床診斷為尿路感染患者的UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細(xì)菌數(shù)量檢測陽性率為38.0%（82/ 216），細(xì)菌培養(yǎng)陽性率為31.0%（67/216），兩種方法檢測結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計無顯著性差異（P＞0.05）。UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細(xì)菌檢測診斷尿路感染的敏感度為69.0%、特異性為82.9%、假陽性率為17.1%、假陰性率為31.0%、陽性預(yù)測值為73.2%、陰性預(yù)測值為79.8%、診斷符合率為77.3%。結(jié)論 UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀檢測簡易、快速，細(xì)菌檢測有助于及時輔助尿路感染臨床診斷，可作為臨床篩查的手段。

全自動有形成分分析儀UF-1000i；細(xì)菌培養(yǎng)；尿路感染；菌尿

尿路感染（UTI）是一種臨床常見病，指的是腎、尿管、膀胱、尿道上發(fā)生的非特異性炎癥，大部分是由大腸埃希菌感染引起的，細(xì)菌從外尿道口侵入，沿尿道上行，引起膀胱和腎發(fā)生感染［1］。尿路感染的診斷主要根據(jù)患者臨床癥狀和尿液檢驗結(jié)果進(jìn)行綜合判斷。尿液細(xì)菌的定量培養(yǎng)是診斷尿路感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但尿液細(xì)菌培養(yǎng)檢驗周期長，通常需要3～4d，且近年來文獻(xiàn)報道傳統(tǒng)的中段尿或?qū)Ч苣蚣訇栃月矢?，中段尿培養(yǎng)假陽性率可達(dá)61%，導(dǎo)管尿培養(yǎng)假陽性率可達(dá)38%［1，2］。因此，若過分依賴尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果，就會延誤對患者的及時治療。UF-1000i尿沉渣分析儀對尿液中的細(xì)菌進(jìn)行單獨檢測有利于尿路感染和篩查［3-5］。為快速篩查UTI并提高檢出率，本研究以細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為“金標(biāo)準(zhǔn)”，采用UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀對216例中段尿樣本進(jìn)行細(xì)菌定量檢測并評估其敏感度、特異性、假陽性率、假陰性率、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、準(zhǔn)確度，探討UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細(xì)菌檢測對尿路感染的診斷的可行性，為臨床提供快速、可靠、準(zhǔn)確的早期診斷尿路感染數(shù)據(jù)信息。

1　材料與方法

1.1一般資料選取2013年1-12月瓊海市人民醫(yī)院住院和門診216例臨床疑似尿路感染患者，其中男性84例，女性132例。

1.2泌尿系感染診療診斷標(biāo)準(zhǔn)⑴中段尿（要求尿停留在膀胱中4～6h以上）細(xì)菌定量培養(yǎng)，菌落數(shù)≥105菌落形成單位（CFU）/ml；⑵中段尿沉渣白細(xì)胞數(shù)≥5個/高倍鏡，或有尿路感染癥狀者；具備上述2項可以確診，如無2項則應(yīng)再作尿細(xì)菌計數(shù)復(fù)查，如菌落數(shù)≥105CFU/ml，且2次的細(xì)菌相同者，可以確診；⑶膀胱穿刺尿培養(yǎng)，如細(xì)菌陽性，亦可確診；⑷作尿細(xì)菌培養(yǎng)計數(shù)有困難者，可用治療前清晨清潔中段尿 （尿停留于膀胱4～6h以上）正規(guī)方法離心尿沉渣后革蘭染色找細(xì)菌，如細(xì)菌數(shù)＞1個/油鏡視野，結(jié)合臨床尿路感染癥狀，亦可確診；⑸尿細(xì)菌數(shù)在104～105CFU/ml之間者，應(yīng)復(fù)查，如仍為104～105CFU/ml，需結(jié)合臨床表現(xiàn)來診斷或作膀胱穿刺尿培養(yǎng)來確診［6］。

1.3器材和試劑UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀、配套試劑及質(zhì)控品均購于日本希森美康公司；VITEK-2細(xì)菌鑒定分析儀及配套細(xì)菌鑒定卡購于法國生物梅里埃公司；血平板和麥康凱平板購于鄭州安圖公司。

1.4樣本留取使用對外陰部及尿道口周圍刺激較小的消毒液揩凈之后，自然排尿用一次性無菌帶蓋尿杯收集患者中段尿10ml，30min內(nèi)送實驗室檢查。

1.5尿細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定方法按臨床和檢驗標(biāo)準(zhǔn)化研究所（CLSI）的要求采取無菌操作，用1ul定量鉑環(huán)將特定量充分混勻的尿液涂布血平板和麥康凱平板，至于37℃溫箱內(nèi)孵育18～24h。有細(xì)菌生長的需要做涂片染色鏡檢，計數(shù)生長菌落，并對菌株進(jìn)行鑒定。無菌生長的繼續(xù)孵育24h，再做判別，細(xì)菌生長且菌落計數(shù)革蘭陽性球菌≥104CFU/ml，或革蘭陰性桿菌≥105CFU/ml，為細(xì)菌培養(yǎng)陽性。同份樣本中檢測3種或3種以上不同的雜菌，應(yīng)認(rèn)為樣本收集或處理不當(dāng)，標(biāo)本已被污染。

1.6UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀檢測儀器工作前進(jìn)行每日室內(nèi)質(zhì)控，確認(rèn)質(zhì)控結(jié)果在控后，將接種完的尿液樣本在UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀上檢測，記錄白細(xì)胞數(shù)、細(xì)菌數(shù)以及酵母樣真菌統(tǒng)計情況［7］。按照廠家提供的UTI信息標(biāo)準(zhǔn)白細(xì)胞數(shù)≥10/μl且細(xì)菌≥105個/μl為陽性判斷是否有尿路感染可能。并保存通過UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀測定具有UTI信息的樣本散點圖。

1.7統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。采用配對資料χ2檢驗。評價UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀診斷UTI的敏感度、特異性、假陽性率、假陰性率、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、準(zhǔn)確度等參數(shù)。比較UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細(xì)菌信息與尿液細(xì)菌培養(yǎng)法檢測陽性率的差異及一致性。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1陽性率比較216份尿樣本中，培養(yǎng)結(jié)果陽性為67份，陽性率為31.0%，其中革蘭球菌14例占（20.1%），革蘭陰性桿菌48例占（71.5%），以大腸埃希菌為主23例占（47.9%），真菌5例占（7.5%）。UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細(xì)菌檢測與尿細(xì)菌培養(yǎng)檢出率比較分析，如表1所示。216例臨床疑似尿路感染患者樣本檢出率分別為37.9% （82/216）和31.05%（67/216），兩種方法學(xué)陽性率間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2靈敏度、特異性統(tǒng)計臨床隨訪病例資料顯示，216例臨床疑似尿路感染患者中87例按泌尿系感染診斷標(biāo)準(zhǔn)為確診患者占40.3%（87/216）。UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細(xì)菌檢測篩查判斷UTI敏感度為69.0%、特異性為82.9%、假陽性率為17.1%、假陰性率為31.0%、陽性預(yù)測值為73.2%、陰性預(yù)測值為79.8%、診斷符合率為77.3%，與臨床診斷結(jié)果比較分析如表2所示。尿路感染臨床診斷的確診病例數(shù)高于UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀細(xì)菌檢測篩查判斷UTI的病例數(shù)。

3　討論

快速診斷UTI，對實驗室而言，必須證明正確采集的中段尿為膿尿（白細(xì)胞尿）和細(xì)菌尿，關(guān)于膿尿的判定，當(dāng)尿沉渣檢查的白細(xì)胞數(shù)≥5個/ HPF，就判定為鏡下膿尿。而細(xì)菌尿則是根據(jù)定量培養(yǎng)法加以判定，中段尿的菌量超過104～105CFU/ ml就判定為真性細(xì)菌尿。尿沉渣檢查中的“1+”（細(xì)菌數(shù)5個/HPF）相當(dāng)于定量培養(yǎng)法的104～105CFU/ ml，但定量培養(yǎng)法是以非離心尿為對象，而尿沉渣檢查是以離心尿為對象，而且菌量會受到尿比重、酸堿度、滲透壓改變以及存放時間影響，所以尿沉渣檢查中的結(jié)果并不與定量培養(yǎng)法的檢查結(jié)果相符［8-10］。應(yīng)用UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀檢測即可避免上述的干擾。其檢測原理為：采用紅光半導(dǎo)體激光，通過聚次甲基類熒光染色對細(xì)菌的進(jìn)行特異染色，在細(xì)菌單獨通道進(jìn)行高精度的細(xì)菌定量的測定的同時，還可以利用其散點圖進(jìn)行細(xì)菌信息提示。

本實驗對216例臨床疑似尿路感染患者樣本經(jīng)UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀檢測存在細(xì)菌陽性共82例，陽性率為37.9%（82/216），尿細(xì)菌定量培養(yǎng)陽性共67例，陽性率為31.0%（67/ 216）這與樊云蓉等［11］及丁志祥等報告結(jié)果一致［12］，UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀檢測結(jié)果高于定量培養(yǎng)法，這是由于UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀計數(shù)尿液中所有的細(xì)菌，而不考慮其活性［13，14］，而在尿細(xì)菌定量培養(yǎng)中則只有活細(xì)菌才能在血平板和麥康凱培養(yǎng)基介質(zhì)上形成菌落，還有可能多重因素導(dǎo)致某些活菌在以上培養(yǎng)基中處于靜止?fàn)顟B(tài)，或由于使用了偏性厭氧菌和陰道加德納菌等的培養(yǎng)基中不發(fā)育的菌種而呈陰性，其中有60例與UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀檢測的結(jié)果一致。臨床確診尿路感染87例患者，其真陽性樣本為60例，診斷敏感度為69.0%，真陰性樣本107例，診斷特異性為82.9%，假陽性樣本為22例，假陽性率17.1%，假陰性樣本為27例，假陰性率31.0%。另一方面，因為本次探討依據(jù)臨床病例但沒有調(diào)查是否使用了抗菌藥、是否有基礎(chǔ)疾患等臨床背景問題，所以也要考慮抗菌藥的影響等問題。導(dǎo)致尿細(xì)菌定量培養(yǎng)出現(xiàn)假陰性［15］。本次探討中，一些誤差產(chǎn)生的真正原因仍然懸而未決，必須另外使用其他確認(rèn)細(xì)菌存在的程序，如上所述尿液沉渣革蘭染色 （因其省去了培養(yǎng)程序并能快速確認(rèn)病原體存在與否）等。對于患者樣品而言，規(guī)范無菌的新鮮尿液樣品采集。臨床信息如治療史對抗生素治療產(chǎn)生的偏倚相當(dāng)重要。因此當(dāng)細(xì)菌培養(yǎng)陰性時并不能完全否定UTI的診斷，需要其他診斷方式如尿沉渣白細(xì)胞計數(shù)等參數(shù)并結(jié)合臨床綜合分析。

綜上所述、在臨床工作中用UF-1000i全自動尿液有形成分分析儀開展UTI細(xì)菌信息檢測可對泌尿系統(tǒng)感染患者提供快速、準(zhǔn)確、可靠的實驗室診斷數(shù)據(jù)，對臨床的治療、病情監(jiān)測、預(yù)后具有重要價值。

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To explore the appilication value of bacteria detection in the diagnosis of urinary tract infection by using the fully auto-mated urine particle analyzer UF-1000i

LI Hong，WANG Guangdong，CHEN Yixuan，ZHENG Lin，LI Qichao.Department of Laboratory Medicine，Qionghai City People's Hospital，Qionghai Hainan 571400，China.

Objective To study the application value of bacteria detection in the diagnosis of urinary tract infection（UTI）by using the fully automated urine particle analyzer UF-1000i.Methods A total of 216 urine samples from the patients with clinical suspected urinary tract infection were analyzed by the fully automated urine particle analyzer UF-1000i and proceeded with the bacteria culture and identification at the same time.According to the guidelines for the diagnosis of urinary tract infection，the sensitivity，false positive rate，false negative rate，positive predictive value，negative predictive value and accuracy of the diagnosis of urinary tract infections were calculated respectively.And the results derived from fully automated urine particle analyzer UF-1000i and the urine bacteria culture were compared.Results The positive rate of bacteria detection with the fully automated urine particle analyzer UF-1000i and bacteria culture was 37.9%（82/216），31.0%（67/216）respectively（P＜0.01）.The sensitivity，specificity，false positive rate，false negative rate，positive predictive value，negative predictive value and accuracy for screening urinary tract infection with the fully automated urine particle analyzer UF-1000i were 69.0%，77.3%，82.9%，17.1%，31.0%，73.2%and 79.8%，respectively.ConclusionsThe detection of bacteria with the fully automated urine particle analyzer UF-1000i is helpful for screening early urinary tract infection.

UF-1000i；Bacterial culture；Urinary tract infection；Bacteruria

R446.12

A

1674-1129（2016）04-0455-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.04.014

李洪，男，1974年11月生，本科，學(xué)士學(xué)位，主管技師，研究方向：臨床檢驗基礎(chǔ)，腫瘤標(biāo)志物。

（2016-05-18；

2016-06-30）