秦　麗，汪延明

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CD47在惡性腫瘤中的表達及相關(guān)問題研究現(xiàn)狀

秦麗，汪延明*

CD47是一種廣泛表達于細胞膜表面的免疫球蛋白樣蛋白質(zhì)，它與信號調(diào)節(jié)蛋白α（SIRPα）相結(jié)合，逃避巨噬細胞的吞噬。近年發(fā)現(xiàn)大部分腫瘤細胞CD47呈高表達狀態(tài)，使腫瘤細胞得以逃避巨噬細胞的吞噬作用。故本文就CD47的功能、CD47在各系統(tǒng)惡性腫瘤中的研究現(xiàn)狀進行綜述。

CD47；信號調(diào)節(jié)蛋白α（SIRPα）；惡性腫瘤

QIN Li①， WANG Yan-ming.①Liaoning Medical University，Jinzhou，Liaoning 121001，China

［Abstract］CD47 is a kind of immunoglobulin-like proteins which is widely expressed on the surface of cell membrane，and combined with the signal regulated protein alpha（SIRP）to escape the phagocytosis of macrophages.In recent years，the most of tumor cells have been found to be highly expressed with CD47，so that the tumor cells can escape the phagocytosis of macrophages.In this paper，the current research status of the function of CD47 and CD47 in the malignant tumor of each system is reviewed.

［Key words］CD47；SIRPα；Malignant tumor

CD47是一種廣泛表達于細胞膜表面的免疫球蛋白樣蛋白質(zhì)。它與表達于巨噬細胞表面的配體信號調(diào)節(jié)蛋白α（SIRPα）相結(jié)合，逃避巨噬細胞的吞噬。近年發(fā)現(xiàn)大部分腫瘤細胞CD47呈高表達狀態(tài)，腫瘤細胞表面CD47與SIRPα結(jié)合，發(fā)出“別吃我”的抑制抗性信號，使腫瘤細胞得以逃避巨噬細胞的吞噬作用，進而抑制固有免疫系統(tǒng)［1］。在治療上，抗CD47抗體通過阻止CD47與SIRPα結(jié)合或與CD47-SIRPα復(fù)合體結(jié)合從而促進腫瘤細胞被吞噬和清除。近年來，大量的研究表明，應(yīng)用抗CD47單克隆抗體對抑制腫瘤的生長和預(yù)防各種類型的癌癥轉(zhuǎn)移作用明顯。

1　CD47與血液系統(tǒng)腫瘤

1.1白血病Jaiswal等［2］報道，無論在髓系還是粒系白血病干細胞中CD47的表達水平較正常的造血干細胞明顯增加，且與生存呈負相關(guān)。CD47在急性淋巴細胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）中高表達，在mRNA水平CD47在T細胞ALL中的表達顯著高于B細胞ALL，而在蛋白水平兩者表達無明顯差別［3］。在鼠患人AML和ALL的動物模型，應(yīng)用抗人CD47單克隆抗體，能夠清除小鼠體內(nèi)的白血病細胞，且治療后的小鼠能長期保持無白血病細胞生存狀態(tài)［4，5］。最近研究發(fā)現(xiàn)在急性單核細胞的白血病中，抗CD47單克隆抗體和阿糖胞苷聯(lián)合成為急性單核細胞的白血病的靶向治療的新選擇［6］。

1.2淋巴瘤研究發(fā)現(xiàn)在多種B細胞非霍奇金淋巴瘤（non-hodgkin lymphoma，NHL）中CD47表達均明顯高于正常組織，且CD47高表達多預(yù)示NHL預(yù)后不良。在淋巴瘤小鼠模型中，應(yīng)用抗CD47抗體可以阻止淋巴瘤細胞的擴散并延長生存期［1］。研究發(fā)現(xiàn)，抗CD47抗體可誘導(dǎo)多種惡性淋巴瘤細胞系的凋亡。其作用機制不是直接殺傷NHL細胞，而是通過巨噬細胞的吞噬作用。在體外，敲除CD47和應(yīng)用抗CD47抗體促進巨噬細胞的吞噬活性；在體內(nèi)，抗CD47抗體抑制淋巴瘤小鼠模型腹水形成和器官侵犯［7］。在淋巴瘤細胞的小鼠模型中，抗CD47抗體與抗CD20抗體聯(lián)合應(yīng)用能夠延長小鼠的生存時間［5］。

1．3多發(fā)性骨髓瘤CD47表達上調(diào)同樣見于多發(fā)性骨髓瘤細胞，其表達水平隨疾病的進展而增高［8］。有研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠骨髓瘤模型中，CD47敲除組小鼠與野生型對照組小鼠，其腫瘤骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生率要低［9］?？笴D47抗體通過影響CD47信號通路誘導(dǎo)骨髓瘤細胞凋亡，可延長荷瘤小鼠的生存期［10］。Kim等［11］研究發(fā)現(xiàn)，抗CD47抗體能夠延緩患者骨髓瘤細胞的生長，減輕骨質(zhì)吸收。總之，抗體通過阻斷CD47，促進骨髓瘤細胞的吞噬，抑制骨髓瘤細胞的生長。

2　CD47與生殖系統(tǒng)腫瘤

2.1卵巢癌CD47在腫瘤組織及交界性腫瘤中表達明顯高于卵巢良性腫瘤及正常卵巢組織，高表達CD47是卵巢癌預(yù)后不良的獨立危險因素［12］。在很早以前就發(fā)現(xiàn)卵巢癌細胞CD47表達增高，雖然后來發(fā)現(xiàn)CD47在卵巢癌中不具備特異性，不再作為卵巢癌的標記物［13］。但隨著研究的深入，Hongrapipat等［14］在卵巢癌OVCAR-3細胞系中加入化療藥物，其作用機制是使藥物與抗CD47抗體Fab’結(jié)合，結(jié)果顯示提高了化療藥物對腫瘤細胞的生物識別效率，為靶向治療奠定了基礎(chǔ)。

2.2乳腺癌Manna等［15］研究表明，CD47在乳腺癌MCF-7、AU-565、HBL-100和MDA-MB-231細胞系中高表達，應(yīng)用抗CD47單克隆抗體能夠誘導(dǎo)四個乳腺癌細胞系的凋亡。Nagahara等［16］研究顯示乳腺癌患者骨髓及外周血細胞CD47表達均上調(diào)。后有研究對乳腺癌患者骨髓和外周血中CD47和SIRPα在mRNA水平的表達進行檢測，骨髓中CD47高表達是一種獨立的不利預(yù)后因素，骨髓中CD47水平高的患者預(yù)后明顯比CD47水平低的患者差，而外周血中CD47水平與預(yù)后無相關(guān)性。

3　CD47與消化系統(tǒng)腫瘤

3.1胃癌Yoshida等［17］發(fā)現(xiàn)，CD47在胃癌中表達同樣是不良因素。通過對術(shù)后標本進行免疫組織化學(xué)表達的研究。篩選熒光標記的CD47和CD44（已知胃癌干細胞標記）表達陽性的胃癌細胞系MKN45和MKN74，進行體外增殖、集落形成能力和體內(nèi)成瘤性的研究。應(yīng)用抗CD47單克隆抗體，腹腔注入MKN45細胞株的免疫缺陷的小鼠得以生存。115例免疫組織化學(xué)的臨床標本顯示CD47在57例中高表達，其高表達是一個獨立的不良預(yù)后因素。大約90%的MKN45和MKN74細胞表達CD47和CD44。CD47hi胃癌細胞表現(xiàn)出顯著的比CD47lo更高的增殖和集落形成能力，CD44hi和CD47hi表現(xiàn)出更高的體外增殖和體內(nèi)致瘤性。抑制CD47顯著增強體外吞噬癌細胞和延長腹腔轉(zhuǎn)移小鼠的生存期。

3.2結(jié)腸癌Zhang等［18］發(fā)現(xiàn)，在結(jié)腸癌組織中CD47的表達比正常組織明顯增高，此外，在mRNA水平CD47的表達顯著增高，相當(dāng)于正常組的1.9倍。同時結(jié)腸癌組織中高水平的腫瘤相關(guān)巨噬細胞（TAMs）浸潤，導(dǎo)致癌癥患者預(yù)后較差。將M1型和M2型巨噬細胞與人結(jié)腸癌SW480細胞株共培養(yǎng)的情況下，M2型巨噬細胞比M1型巨噬細胞遷移速度快。類似地，巨噬細胞能夠誘導(dǎo)SW480細胞遷移和CD47的表達?？笴D47抗體顯著降低M2型巨噬細胞對SW480細胞的遷移作用。這一效應(yīng)主要通過阻斷CD47與巨噬細胞表面信號調(diào)節(jié)蛋白SIRPα的結(jié)合。以上研究結(jié)果揭示了CD47高表達與巨噬細胞浸潤共同構(gòu)成的腫瘤微環(huán)境促進結(jié)腸癌細胞的遷移和隨后的轉(zhuǎn)移。針對CD47的阻斷抗體可能成為結(jié)腸癌患者的新的治療方法。

3.3肝癌David等［19］報道，在肝癌化療抗性中，發(fā)現(xiàn)CD47表達上調(diào)。CD47優(yōu)先表達于肝腫瘤干細胞中。敲除CD47能夠抑制腫瘤干細胞的增殖、轉(zhuǎn)移等特性。CD47+的肝細胞癌HCC細胞能夠隱藏組織蛋白酶S，組織蛋白酶S通過CTSS/PAR2通路控制肝腫瘤干細胞。抑制CD47能夠抑制體內(nèi)肝細胞癌的增長，通過封鎖CTSS/PAR2信號產(chǎn)生了化療增敏效應(yīng)。

3.4胰腺癌Cioffi等［20］發(fā)現(xiàn)，CD47高表達于胰腺導(dǎo)管腺癌的腫瘤干細胞CSC，不表達于其他胰腺良性細胞中。抑制CD47能夠有效地增強巨噬細胞對胰腺癌腫瘤干細胞的吞噬作用。更有趣的是，在巨噬細胞缺失的情況下長期抑制CD47能夠誘導(dǎo)腫瘤細胞的凋亡。在異體移植模型中，僅僅抑制CD47沒有導(dǎo)致相關(guān)腫瘤的增長放緩，但添加吉西他濱或紫杉醇能夠?qū)е鲁掷m(xù)腫瘤退化和預(yù)防停藥后疾病復(fù)發(fā)。

4　CD47與泌尿系統(tǒng)腫瘤

4.1膀胱癌膀胱癌的腫瘤起始細胞（T-IC）中其亞群CD44陽性細胞群，在體內(nèi)試驗中可以形成移植瘤，具有較強的增殖能力。在CD44陽性細胞亞群中發(fā)現(xiàn)CD47同樣呈高表達。在鼠患人膀胱癌移植模型，CD44和CD47主要高表達于腫瘤外周的細胞，而腫瘤內(nèi)部的細胞主要呈低表達。研究證實在膀胱癌細胞中CD47的表達比例高達80%。在體外試驗中，在膀胱癌細胞與巨噬細胞共培養(yǎng)的情況下，加入抗CD47單克隆抗體，使膀胱癌細胞得以被巨噬細胞吞噬和清除［21，22］。

4.2腎癌CD47同樣在腎癌中高表達，其可以作為腫瘤診斷及判斷預(yù)后的一個較客觀的指標。國內(nèi)學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)CD47在腎癌組織中，mRNA和蛋白表達量明顯高于正常腎組織。腎細胞癌RCC組織中CD47陽性表達與腫瘤分化程度、TNM分期和腫瘤直徑有關(guān)。Willingham等［23］研究結(jié)果表明CD47在多種實體腫瘤中高表達均與生存期有關(guān)，CD47在mRNA水平的高表達提示腫瘤預(yù)后不良，腎細胞癌CD47高表達組患者生存時間較低表達組明顯縮短。

5　CD47與神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤

Boukhari等［24］發(fā)現(xiàn)，激活CD47能夠誘發(fā)人腦星形細胞瘤細胞的增殖。表觀遺傳UHRF1（ubiquitin-like containing PHD and RING Finger 1）在各種癌癥中過表達并沉默抑癌基因p16的表達，從而促進細胞的增殖。使用抗體阻斷人腦星形細胞瘤細胞株U87和CCF-STTG1細胞中的CD47導(dǎo)致UHRF1表達下調(diào)，并伴有抑癌基因p16表達上調(diào)，使癌細胞增殖能力下降?？傊?，目前的研究結(jié)果表明，CD47的激活能增加UHRF1的表達，CD47通過UHRF1調(diào)節(jié)表觀遺傳代碼。這可能是一個細胞增殖和轉(zhuǎn)移的新通路。

6　CD47與運動系統(tǒng)腫瘤

其中代表性的是骨肉瘤。Xu等［25］發(fā)現(xiàn)CD47在骨肉瘤細胞mRNA及蛋白質(zhì)水平均呈高表達。另外絕大多數(shù)的CD44+骨肉瘤干細胞表達CD47雖然比例不同（從80%到99%不等），也成高表達狀態(tài)。高CD47mRNA表達水平能縮短腫瘤患者的無進展和整體的生存期。用特定的Abs封閉CD47能夠抑制骨肉瘤細胞的侵襲能力，進一步抑制自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的KRIB骨肉瘤細胞。封閉CD47能增加巨噬細胞對骨肉瘤細胞的吞噬作用。

總之，CD47廣泛高表達于人類惡性腫瘤，并與腫瘤患者的不良預(yù)后相關(guān)。在體外，利用抗體阻斷CD47與SIRPα結(jié)合，可促進巨噬細胞對腫瘤細胞的吞噬作用，并誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡。在體內(nèi)，利用抗體阻斷CD47可抑制腫瘤生長，已經(jīng)在多個小鼠模型中取得顯著成效。盡管目前仍并不完全清楚潛在的分子機制，但是大量研究表明，CD47在不久的將來可以作為腫瘤治療的新靶點，在攻克惡性腫瘤的治療過程中提供全新的手段。

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［本文編輯：韓仲琪］

The current research on the expression of CD47 in malignant tumor and its relevant issues

R73

A

10.14172/j.issn1671-4008.2016.07.033

121001遼寧錦州，遼寧醫(yī)學(xué)院（秦麗）；250031山東濟南，濟南軍區(qū)總醫(yī)院（汪延明）

汪延明，Email：ymwang64@163.com