董紅敏， 李 路， 沈麗雯， 李 玉， 李慧妍， 秦 文

（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，四川雅安625014）

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川明參中蛋白與多糖的同步提取及抗氧化性測(cè)定

董紅敏， 李 路， 沈麗雯， 李 玉， 李慧妍， 秦 文*

（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，四川雅安625014）

摘要：目的 利用響應(yīng)面分析法優(yōu)化超聲波輔助同步提取川明參渣中蛋白和多糖工藝，并探究其體外抗氧化活性。方法 在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用Box-Benhnken中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)超聲輔助提取條件進(jìn)行優(yōu)化?？疾焯崛﹑H、超聲功率、超聲時(shí)間、液料比、超聲溫度對(duì)蛋白和多糖得率的影響。然后，采用DPPH法測(cè)定蛋白和多糖的抗氧化性。結(jié)果 川明參蛋白和多糖超聲波輔助同步提取的最佳條件為超聲功率225 W、超聲時(shí)間38 min、液料比20∶1、超聲溫度49℃。在此工藝條件下，川明參蛋白和多糖得率分別為（24.17±0.84）mg/g和（25.92±0.67）％。而且，川明參蛋白和不同類(lèi)型的川明參多糖均具有較強(qiáng)的抗氧化性能。結(jié)論 該方法能夠較好地預(yù)測(cè)川明參蛋白的得率，可用于指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐。

關(guān)鍵詞：川明參；蛋白；多糖；抗氧化性；響應(yīng)面分析；超聲提取

川明參是傘形科植物川明參屬植物川明參Chuanminshen violaceum Sheh et Shan的干燥根，又名明參、明沙參、土明參、沙參，是我國(guó)特有的單種屬植物，為四川道地藥材［1-2］，具有滋陰補(bǔ)肺，健脾等功效，主治熱病傷陰、肺熱咳嗽、脾虛食少、病后體弱等［2］。川明參中含有多糖、蛋白質(zhì)、香豆素、黃酮、甾醇、有機(jī)酸、酚類(lèi)等化學(xué)成分［3］，其中以多糖含有量為最高，達(dá)80％以上，具有抗突變、鎮(zhèn)咳、祛痰、免疫調(diào)節(jié)、抗疲勞以及抗病毒作用等。另外，粗蛋白含有量高達(dá)5％以上，其水解氨基酸總含有量超過(guò)3％，各類(lèi)氨基酸達(dá)13種以上，尤其是人體必需的7種氨基酸占總含有量的40％以上，可能是川明參的主要功能成分之一［4-8］，可廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥和保健食品領(lǐng)域，市場(chǎng)前景廣闊。因此，高效提取川明參蛋白和多糖具有重要意義。

目前，川明參多糖和川明參蛋白大多被單獨(dú)提取，但由于蛋白總量較低，單獨(dú)提取必然增加產(chǎn)品開(kāi)發(fā)的成本，而采用堿提法可將這兩種成分同時(shí)提取出來(lái)，并且剩余殘?jiān)钥捎糜谔崛∷苄远嗵?。因此，為綜合利用川明參資源，本實(shí)驗(yàn)以95％乙醇提取川明參后的殘?jiān)鼮樵希捎贸暡ㄝo助堿提法同步提取川明參中的蛋白和多糖，通過(guò)單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面設(shè)計(jì)，探討殘?jiān)袃烧叩淖罴殉曒o助提取工藝，并對(duì)其抗氧化性進(jìn)行初步探究，可為其提取及綜合開(kāi)發(fā)利用提供指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器 川明參（2013年春由四川閬中供銷(xiāo)社提供）；川明參渣（95％乙醇超聲提取川明參干燥粉后的殘?jiān)?/p>

牛血清蛋白（北京拜爾迪生物技術(shù)有限公司）；考馬斯亮藍(lán)G250（上海寶曼生物科技有限公司）；1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH，美國(guó)Sigma公司）。葡萄糖、石油醚、無(wú)水乙醇、濃硫酸、苯酚均為分析純（成都市科龍化工試劑廠）。

FW177中藥粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）；KQ-250DB數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；UV-3200掃描型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海美普達(dá)儀器有限公司）；Sorva1ST16高速冷凍離心機(jī)、Heto Power Dry PL3000凍干機(jī)（美國(guó)Thermo Scientific公司）；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、SHZ-III循環(huán)水真空泵（上海亞榮生化儀器廠）；101-4恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州澳華儀器有效公司）；電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 川明參蛋白與多糖提取工藝流程如下

原料預(yù)處理：將95％乙醇提取過(guò)的川明參渣用石油醚索氏回流脫脂2次，每次6 h，50℃恒溫烘干至質(zhì)量恒定，粉碎，過(guò)80目篩。

水溶性蛋白和堿溶性多糖同步提?。悍Q(chēng)取預(yù)處理的川明參粉5 g，加入一定pH和液料比的氫氧化鈉溶液，在一定超聲功率和溫度下超聲提取一定時(shí)間，將混合液用冷凍離心機(jī)離心后過(guò)濾，取上清液。往里加鹽酸溶液調(diào)pH至川明參蛋白等電點(diǎn)，離心，分別收集沉淀和清液，將前者復(fù)溶，調(diào)pH=7.0，真空冷凍干燥，即得川明參蛋白；將后者減壓濃縮至原體積的1/4，加無(wú)水乙醇至含醇量80％，4℃下靜置過(guò)夜使沉淀析出，離心，沉淀復(fù)溶，真空冷凍干燥，得川明參堿提多糖。

所得固體殘?jiān)戳弦罕?∶40，超聲功率140 W，超聲溫度70℃提取45 min［9］。提取液過(guò)濾減壓濃縮操作同上，即得川明參水提多糖。堿提多糖用蒸餾水溶解并調(diào)pH至7.0，出現(xiàn)渾濁，混合物用流動(dòng)水透析3 d，離心，分別收集沉淀與清液，前者干燥后即得堿提水不溶多糖，而后者濃縮醇沉，冷凍干燥，即得堿提水溶性多糖。

1.2.2 測(cè)定方法 多糖含有量的測(cè)定采用苯酚-硫酸法，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)來(lái)測(cè)定多糖含有量［9］；蛋白含有量的測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)染色法［10］；微量凱氏定氮法（食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定，GB5009.5-2010）測(cè)定川明參渣中總蛋白的含有量。以提取液中多糖含有量為總多糖含有量，以蛋白和多糖的純度計(jì)算粗蛋白和粗多糖中的蛋白和多糖含有量，以?xún)烧叩寐史謩e計(jì)算為粗蛋白干品中蛋白質(zhì)量和粗多糖干品中多糖質(zhì)量與原料質(zhì)量的比值（蛋白得率以mg/g計(jì)，多糖得率以％計(jì)）。

1.2.3 川明參蛋白等電點(diǎn)的確定［11］稱(chēng)取川明參粉10 g，固定其他提取條件，制備川明參蛋白提取液，離心（8 000 r/min）20 min，得上清液，取6份，每份10 mL，加鹽酸調(diào)pH=1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0，靜置30 min，再離心（8 000 r/min）20 min，測(cè)定上清液中蛋白質(zhì)的含有量，計(jì)算川明參蛋白的沉淀率，并繪制沉淀率與pH值的曲線(xiàn)圖，沉淀率最大時(shí)的pH值即為川明參蛋白的等電點(diǎn)。

1.2.4 超聲輔助提取工藝參數(shù)的單因素試驗(yàn) 精密稱(chēng)取川明參粉5.0 g，固定其他條件（pH=12.5，液料比20∶1，超聲功率200 W，超聲溫度60℃，超聲時(shí)間30 min），采用不同堿液pH、料液比、超聲功率、超聲溫度和超聲時(shí)間進(jìn)行超聲波輔助提取試驗(yàn)，依次考察各提取條件對(duì)川明參蛋白和堿溶性多糖得率的影響。

1.2.5 響應(yīng)面試驗(yàn) 在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，根據(jù)Box-Behnken設(shè)計(jì)原理，采用四因素三水平，選擇超聲功率、超聲時(shí)間、液料比和超聲溫度為自變量，以蛋白得率（Y1）和多糖得率（Y2）為響應(yīng)值，對(duì)超聲波輔助同步提取川明參蛋白和堿溶性多糖的工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。響應(yīng)曲面因素與水平表見(jiàn)表1。

表1　響應(yīng)面分析因素與水平

1.2.6 清除DPPH自由基能力的測(cè)定 取不同質(zhì)量濃度的待測(cè)樣品溶液2.0 mL和0.2 mmo1/L DPPH-乙醇溶液2.0 mL，充分混勻，避光反應(yīng)30 min，95％乙醇調(diào)零，于波長(zhǎng)517 nm處測(cè)定吸光度。對(duì)照組用95％乙醇2.0 mL代替DPPH溶液，空白組為DPPH溶液2.0 mL與蒸餾水（95％乙醇）2.0 mL混合，以BHT為陽(yáng)性對(duì)照，計(jì)算DPPH自由基清除率［12］，計(jì)算公式如下。反應(yīng)體系吸光度

注：I表示清除率；Ai為樣品組吸光度；Aj為對(duì)照組吸光度；Ao為空白組吸光度。

1.2.7 總還原能力的測(cè)定 采用鐵離子還原能力測(cè)定法［12］，分別往不同質(zhì)量濃度的樣品溶液中加入pH=6.6的磷酸鹽緩沖液（0.2 mo1/L）2.5 mL和1％鐵氰化鉀（K3Fe ［CN］6）溶液2.5 mL，迅速混勻，50℃水浴反應(yīng)20 min，立即冷卻后加入10％三氯乙酸（TCA）溶液2.5 mL，混勻后6 000 r/min離心10 min，取上清液2.5 mL，加蒸餾水2.5 mL和0.1％三氯化鐵（FeC13）溶液0.5 mL，混勻，反應(yīng)10 min，測(cè)定其在700 nm波長(zhǎng)處的吸光度。吸光度越高，還原能力越強(qiáng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 川明參蛋白等電點(diǎn)（圖1） 由圖可知，川明參蛋白的沉淀率隨著pH值的升高，呈先上升后下降的趨勢(shì)，在pH=2.0時(shí)沉淀率最大，即川明參蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)為2.0。在等電點(diǎn)沉淀蛋白后，離心去上清液，沉淀即為純化的川明參蛋白。因此，選擇pH=2.0作為沉淀川明參蛋白等電點(diǎn)。越低，說(shuō)明清除DPPH自由基能力越強(qiáng)。

圖1　川明參蛋白等電點(diǎn)

2.2 超聲波輔助提取單因素試驗(yàn)

2.2.1 提取劑pH對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響 不同pH對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響結(jié)果見(jiàn)圖2。pH在10～12之間時(shí)，蛋白和多糖的得率增加顯著，隨后多糖得率略有下降，而蛋白得率在pH=12.5時(shí)達(dá)到最大，之后得率變化不明顯。由于川明參中多糖含有量較高，蛋白含有量較低，故為提高蛋白得率，后續(xù)試驗(yàn)選擇pH=12.5來(lái)進(jìn)一步優(yōu)化提取條件。

圖2　pH對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響

2.2.2 超聲功率對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響 不同超聲功率對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響結(jié)果見(jiàn)圖3。隨著超聲功率的增加，川明參蛋白和多糖的得率逐漸增加，當(dāng)功率分別達(dá)到200 W和225 W時(shí)，兩者得率達(dá)到最大值，隨后開(kāi)始下降，其原因可能是隨著超聲功率增大，空化作用加強(qiáng)，超聲波對(duì)細(xì)胞壁的破碎作用增強(qiáng)，兩者的溶出速率加快，得率升高。但功率過(guò)大時(shí)，空化作用及其伴隨的機(jī)械效應(yīng)會(huì)破壞兩者的結(jié)構(gòu)，影響得率［13］。因此，超聲功率以175～225 W為宜。

圖3　超聲功率對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響

2.2.3 超聲時(shí)間對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響 不同超聲時(shí)間對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響結(jié)果見(jiàn)圖4。在10～30 min時(shí)，蛋白和多糖的得率隨著超聲時(shí)間的增加而明顯提高，隨后呈下降趨勢(shì)，其原因可能是隨著時(shí)間增加，在超聲波作用下川明參的細(xì)胞破碎度逐漸增大，兩者溶出量逐漸增加，得率提高。但超聲波作用時(shí)間過(guò)長(zhǎng)時(shí)，其機(jī)械剪切作用同樣會(huì)破壞兩者的結(jié)構(gòu)，影響得率［14 -15］。因此，超聲波作用時(shí)間以30 min為宜。

圖4　超聲時(shí)間對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響

2.2.4 液料比對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響 不同液料比對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響結(jié)果見(jiàn)圖5。液料比為20∶1時(shí)，川明參蛋白和多糖得率均達(dá)到最大值，隨后明顯下降，隨著液料比的增加，固相與液相間濃度差提高，有利于兩者充分溶出［15-16］。當(dāng)液料比達(dá)到一定程度后，在超聲波功率和時(shí)間恒定的情況下，其增加會(huì)使超聲波空化作用相對(duì)降低，從而使得率下降。另外，液料比過(guò)大使得濃縮時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，導(dǎo)致能耗提高。綜合各方面因素，料液比應(yīng)不大于20∶1。

圖5　料液比對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響

2.2.5 超聲溫度對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響 不同超聲溫度對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響結(jié)果見(jiàn)圖6。隨著溫度升高，川明參蛋白和多糖的得率均呈先升高后下降的趨勢(shì)，可能是因?yàn)榈蜏貢r(shí)，超聲波未能使細(xì)胞徹底破碎，而隨著溫度的升高，超聲波與溫度的協(xié)同作用進(jìn)一步破壞了細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而使兩者充分釋放。但溫度過(guò)高時(shí)，這種作用也會(huì)引起蛋白的變性和多糖的分解［17］。綜合考慮，超聲溫度應(yīng)控制在40～60℃之間。

圖6　超聲溫度對(duì)川明參蛋白和多糖得率的影響

2.3 響應(yīng)面分析法對(duì)超聲波輔助提取工藝的優(yōu)化

2.3.1 二次響應(yīng)面回歸模型的建立與分析 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見(jiàn)表2。應(yīng)用Design Expert 8.0.5b數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)表2實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行多元回歸擬合，得超聲輔助提取川明參蛋白得率（Y1）和多糖得率（Y2）對(duì)超聲功率（X1）、超聲時(shí)間（X2）、液料比（X3）與溫度（X4）的二次多項(xiàng)式回歸模型分別為Y1=23.14 +1.87X1+0.60X2+ 0.65X3-1.52X4-0.21X1X2-0.80X1X3+0.24X1X4+ 0.35X2X3-0.46X2X4-0.10X3X4-1.20X21-0.62X22-1.54X23-2.09X24；Y2=25.26 +1.78X1+0.49X2+0.81X3-0.34X4-0.045X1X2-0.91X1X3+0.86X1X4+0.175X2X3-0.37X2X4+0.1X3X4-1.34 X21-0.068X22-0.94X23-1.13X24

然后，對(duì)回歸模型分別進(jìn)行方差分析，結(jié)果見(jiàn)表3，回歸系數(shù)顯著性檢驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。

表2　響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

表3　回歸模型方差分析

由表3可知，Y1和Y2兩個(gè)數(shù)學(xué)模型P＜0.000 1，表明二次回歸方程模型極顯著，模型的相關(guān)系數(shù)R2分別為0.943 6和0.991 0，接近1，模型修正R2（分別為0.887 2 和0.982 1）與預(yù)測(cè)R2（分別為0.702 9和0.951 3）均相差不大，表明兩模型實(shí)際值與預(yù)測(cè)值擬合均較好，且失擬項(xiàng)P分別為0.151 3和0.072 9，大于0.05，失擬項(xiàng)不顯著，實(shí)驗(yàn)誤差較小。因此，兩模型可用于對(duì)川明參蛋白和多糖的超聲提取工藝進(jìn)行分析和預(yù)測(cè)。

由表4可知，Y1模型一次項(xiàng)X1、X3、X4，二次項(xiàng)X21、X23、X24對(duì)響應(yīng)值Y1影響都極顯著（P＜0.01）；一次項(xiàng)X2、交互項(xiàng)X1X3和二次項(xiàng)X22對(duì)Y1影響顯著（P＜0.05）；Y2模型一次項(xiàng)X1、X2、X3、X4，交互項(xiàng)X1X3、X1X4、X2X4，二次項(xiàng)X21、X23、X24對(duì)響應(yīng)值Y2影響都極顯著（P＜0.01）。根據(jù)F值大小，可知各因素對(duì)川明參蛋白得率的影響的程度依次是超聲功率（X1）＞超聲溫度（X4）＞液料比（X3）＞超聲時(shí)間（X2），對(duì)川明參多糖得率的影響的程度依次是超聲功率（X1）＞液料比（X3）＞超聲時(shí)間（X2）＞超聲溫度（X4）。

表4　回歸系數(shù)的顯著性檢驗(yàn)

2.3.2 川明參蛋白和多糖同步超聲提取條件的確定 運(yùn)用Design Expert8.0.5b數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件，可以預(yù)測(cè)出蛋白和多糖得率兩個(gè)響應(yīng)值均達(dá)到最大時(shí)各因素的最佳值。結(jié)果，得到最佳超聲輔助提取工藝條件組合為超聲功率219.38 W，超聲時(shí)間37.75 min，液料比19.75∶1，超聲溫度48.5℃?？紤]到實(shí)際操作的可行性，將超聲輔助提取工藝條件修正為超聲功率225 W、超聲時(shí)間38 min、液料比20∶1、超聲溫度49℃。采用上述優(yōu)化條件進(jìn)行3次驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，川明參蛋白和多糖的平均得率分別為（24.17± 0.84）mg/g和（25.92±0.67）％，兩者與預(yù)測(cè)值基本吻合，表明該模型能較好的預(yù)測(cè)川明參蛋白和多糖的得率，可用于指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐。

經(jīng)微量凱氏定氮法測(cè)得川明參渣中總蛋白含有量為（4.24±0.27）％，所得可溶性蛋白占總蛋白的57％，表明該實(shí)驗(yàn)條件下，川明參蛋白的提取率為57％。在最佳提取條件下，采用苯酚-硫酸法測(cè)定所得提取液中總多糖含有量為（32.19±2.13）％，川明參多糖的提取率為80.65％。

2.4 川明參蛋白和不同類(lèi)型川明參多糖的抗氧化活性 由圖7可知，川明參蛋白和不同類(lèi)型川明參多糖都具有清除DPPH自由基的活性，隨著質(zhì)量濃度的增大，清除DPPH自由基的能力也隨之增強(qiáng)，兩者呈正相關(guān)關(guān)系。當(dāng)質(zhì)量濃度為2.0 mg/mL時(shí)，川明參蛋白、堿提水不溶性多糖、堿提水溶性多糖和水提多糖的清除率分別為75.86％、71.88％、65.03％和60.46％，均表現(xiàn)出良好的清除DPPH自由基能力，IC50分別為0.564、0.516、0.598、0.779 mg/mL，即不同類(lèi)型川明參多糖清除DPPH自由基的能力的大小順序?yàn)閴A提水不溶性多糖＞堿提水溶性多糖＞水提多糖。

另外，川明參蛋白和多糖還均表現(xiàn)出一定的還原能力和明顯的量效關(guān)系，吸光度越大，還原能力越強(qiáng)，抗氧化性越好。由圖8可知，川明參蛋白和多糖的還原能力隨著質(zhì)量濃度的增加而增加，其還原能力強(qiáng)弱依次為蛋白＞堿提水不溶性多糖＞堿提水溶性多糖＞水提多糖。

圖7　川明參蛋白和川明參多糖對(duì)DPPH自由基的清除作用

圖8　川明參蛋白和不同類(lèi)型多糖的總還原力

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)旨在以95％乙醇提取川明參有效成分后的殘?jiān)鼮樵希捎脡A溶酸沉和水提醇沉相結(jié)合的方法同步提取川明參蛋白和多糖，通過(guò)單因素和響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化超聲輔助提取工藝，所得最佳工藝參數(shù)為超聲功率225 W、超聲時(shí)間38 min、液料比20∶1、超聲溫度49℃。在此工藝條件下，川明參蛋白和多糖得率分別為（24.17±0.84）mg/g和（25.92±0.67）％。通過(guò)方差分析，確定各因素對(duì)得率的影響程度，其中超聲功率、超聲功率和液料比的交互作用對(duì)蛋白和多糖得率的影響均較大。該方法有效避免了由于川明參蛋白總含有量相對(duì)較低而導(dǎo)致單獨(dú)提取成本較高的問(wèn)題，可提高原料利用率，大大降低了成本，而且工藝操作簡(jiǎn)單方便，提取時(shí)間短，得率高，有利于川明參資源的綜合利用，為其多糖和蛋白的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供參考。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，許多疾病與體內(nèi)自由基引發(fā)的氧化損傷有關(guān)，而天然抗氧化劑以其安全高效的特點(diǎn)正引起廣大學(xué)者的關(guān)注。川明參作為一種傳統(tǒng)中藥，具有免疫調(diào)節(jié)、抗突變、抗病毒等功效，并含有大量多糖和蛋白，但迄今為止，有關(guān)川明參多糖和蛋白抗氧化活性方面的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)DPPH法對(duì)川明參蛋白和多糖的抗氧化能力進(jìn)行初步測(cè)定，結(jié)果顯示兩者對(duì)DPPH自由基均有明顯的清除作用，并且具有一定的還原能力，川明參蛋白、堿提水不溶性多糖、堿提水溶性多糖和水提多糖清除DPPH自由基的IC50值分別為0.564、0.516、0.598、0.779 mg/mL，表明川明參蛋白和多糖具有較強(qiáng)的抗氧化能力。本實(shí)驗(yàn)為川明參蛋白和多糖作為天然抗氧化功能因子提供了理論依據(jù)，為其下一步活性研究與開(kāi)發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

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*通信作者：秦 文（1967—），女，教授，主要從事農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)后處理與品質(zhì)控制研究。Te1：13981616637，E-mai1：qinwen1967@ a1iyun.com.cn

作者簡(jiǎn)介：董紅敏（1989—），女，碩士生，主要從事農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)后處理與品質(zhì)控制研究。Te1：18227550988

收稿日期：2014-08-14

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.01.051

中圖分類(lèi)號(hào)：R284.2

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號(hào)：1001-1528（2016）01-0207-06

網(wǎng)絡(luò)出版日期：2014-10-31

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detai1/31.1368.R.20141031.1314.001.htm1