西安市中心醫(yī)院呼吸科(西安710003)　邵景韞　劉　安　杜旭升　白　潔　陳明偉

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肺間質(zhì)纖維化患者的PAI-1、VEGF的變化*

西安市中心醫(yī)院呼吸科(西安710003)邵景韞劉安杜旭升白潔陳明偉△

摘要目的:探討纖溶酶原激活劑抑制劑-1 (PAI-1)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在肺間質(zhì)纖維化發(fā)病機(jī)制中的作用。方法：選擇肺間質(zhì)纖維化患者40例，健康人40例，采用ELISA法測(cè)定其血清及肺泡灌洗液的PAI-1、VEGF。結(jié)果：肺纖維化患者的肺泡灌洗液中的PAI-1水平為3.736±0.485μg/L，比健康人的1.245±0.126μg/L明顯增高(P<0.05)；肺纖維化患者的肺泡灌洗液中的VEGF水平為3.236±0.133μg/L，比健康人的1.545±0.231μg/L明顯增高 (P<0.05)；肺纖維化患者的血清PAI-1水平為58.486±0.148μg/L，較健康對(duì)照組的45.383±0.119μg/L明顯增高(P<0.01)；肺纖維化患者的血清VEGF水平為0.530±0.048μg/L，較健康對(duì)照組的0.423±0.069μg/L明顯增高(P<0.05)。結(jié)論:肺纖維化組PAI-1、VEGF水平明顯升高，推測(cè)其參與了肺間質(zhì)纖維化的形成。

主題詞肺纖維化/血液纖溶酶原激活物抑制物-1/代謝血管生成因子/代謝內(nèi)皮，血管

特發(fā)性肺纖維化(Idiopathic plumonary fibrosis，IPF)是臨床常見(jiàn)的一種慢性間質(zhì)性肺疾病，發(fā)病隱匿、進(jìn)展迅速、病死率高，嚴(yán)重影響患者生存質(zhì)量及預(yù)后[1]。其發(fā)病機(jī)制不明確，多種細(xì)胞因子在肺纖維化中起到關(guān)鍵性作用，如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)，纖溶酶原激活劑抑制劑-1(PAI-1)等。血管生成在肺纖維化形成中起關(guān)鍵作用，但血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因(VEGF)在肺纖維化中的研究較少。檢測(cè)肺纖維化患者的血清、肺泡灌洗液中的PAI-1、VEGF的變化，以探討其在肺纖維化發(fā)病機(jī)制中的作用。

資料與方法

1一般資料選擇2012年1月至2015年12月我院呼吸內(nèi)科IPF組患者40例，其中男26例，女14例，年齡46～73歲，平均51.5±13.6歲；病程3.0～15.0年，平均12.73.7年；IPF診斷依據(jù)IPF循證醫(yī)學(xué)診治指南[2]，結(jié)合病史、臨床表現(xiàn)、BALF、胸部HRCT及支氣管肺活檢及臨床治療等診斷。健康對(duì)照組40例，其中男30例，女10例，年齡39～70歲，平均48.5±11.4歲；18例為健康志愿者，22例有干咳、胸悶癥狀，胸部HRCT、肺功能、BALF等檢查正常，除外器質(zhì)性疾病。

2研究方法

2.1BALF及血液采集和處理：BALF操作參考美國(guó)胸科協(xié)會(huì)官方指南[3]，用Olympus電子支氣管鏡操作BALF，回收BALF無(wú)菌紗布過(guò)濾除去粘液，離心，上清-70℃儲(chǔ)存待測(cè)。清晨采集空腹靜脈血抗凝，離心，血液分離后置-70℃保存待測(cè)。研究符合西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院科研倫理要求，所有患者簽署知情同意書(shū)。

2.2PAI-1、VEGF測(cè)定：PAI-1 ELISA試劑盒購(gòu)置于北京太陽(yáng)公司，VEGF ELISA試劑盒購(gòu)置于武漢博士德公司，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定，按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

結(jié)果

1兩組BALF中PAI-1、VEGF的變化對(duì)比肺纖維化患者的肺泡灌洗液中的PAI-1 水平為3.736±0.485μg/L，比健康人的1.245±0.126μg/L明顯增高(P<0.05)；肺纖維化患者的肺泡灌洗液中的VEGF水平為3.236±0.133μg/L，比健康人的1.545±0.231μg/L明顯增高 (P<0.05)。

2兩組血清中PAI-1、VEGF的變化對(duì)比肺纖維化患者的血清PAI-1水平為58.486±0.148μg/L，較健康對(duì)照組的45.383±0.119μg/L 明顯增高(P<0.01)；肺纖維化患者的血清VEGF水平為0.530±0.048μg/L，較健康對(duì)照組的0.423±0.069μg/L明顯增高(P<0.05)。

討論

肺間質(zhì)纖維化是一種原因不明的慢性間質(zhì)性肺疾病中常見(jiàn)代表性疾病，呈進(jìn)行性發(fā)展，致呼吸衰竭死亡，其發(fā)病機(jī)制不明確，無(wú)有效治療手段，預(yù)后差[4]。研究肺纖維化中的各種細(xì)胞因子的作用，對(duì)其發(fā)病機(jī)制及診治有應(yīng)用價(jià)值。

PAI為絲氨酸蛋白水解酶抑制劑，是組織型和尿激酶型纖溶酶原激活物的抑制因子。PAI-1缺失減輕肺纖維化主要通過(guò)纖溶酶的纖溶作用。氣管內(nèi)滴入PAI-1siRNA減少纖維化肺組織膠原沉積[5]，PAl-1促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖和膠原合成[6]，促進(jìn)肺纖維化的發(fā)生、發(fā)展。PAI可調(diào)節(jié)體內(nèi)白細(xì)胞、纖維母細(xì)胞的粘附、移行，與TGF-β、TNF-α、PDGF相互作用，促進(jìn)肺纖維化發(fā)展。PAI-1缺失減輕肺纖維化主要通過(guò)纖溶酶的纖溶作用。Eitzan發(fā)現(xiàn)PAI-1缺陷的小鼠氣管內(nèi)灌注博萊霉素，肺纖維化減低。氣管內(nèi)滴注重組uPA可減輕肺纖維化程度，使纖溶活性升高，膠原減少。Eitzman等用BLM致肺纖維化的轉(zhuǎn)基因大鼠模型證實(shí)了肺纖維化的程度與PAI-1的基因表達(dá)呈明顯正相關(guān)，本研究表明，肺纖維化患者的血清、BALF中的PAI-1水平比健康人明顯增高，表明存在纖溶抑制活性增強(qiáng)，PAI-1參與肺纖維化。

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascularendothelialgrowthfactor，VEGF) 是最主要的血管生成因子，能夠促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂、增殖，促進(jìn)新的血管生成，以增加血管通透性、維持血管完整性，參與肺纖維化的形成。健康人VEGF主要在肺內(nèi)合成，在肺內(nèi)可由上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺間質(zhì)細(xì)胞分泌。大鼠肺纖維化中VEGF增高，肺纖維化肺泡炎期VEGF的陽(yáng)性表達(dá)與血管密度的增致加一。VEGF有抗凋亡作用，是維持內(nèi)皮細(xì)胞存活的重要因子，損傷的血管內(nèi)皮促進(jìn)VEGF合成和釋放增加，低氧可誘導(dǎo)VEGF的表達(dá)，肺纖維化中高水平的VEGF可能是對(duì)低氧的反應(yīng)。VEGF通過(guò)上調(diào)TGF-β1表達(dá)促進(jìn)支氣管周圍纖維化，在肺纖維化形成中過(guò)度表達(dá)，通過(guò)促進(jìn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)肺纖維化。

本研究發(fā)現(xiàn)：肺纖維化組血清、肺泡灌洗液中的PAI-1、VEGF明顯高于健康對(duì)照組。說(shuō)明PAI-1、VEGF參與了肺纖維化的形成，抗VEGF、PAI-1可能成為治療肺纖維化的新途徑。

參考文獻(xiàn)

[1]高 麗，代華平.特發(fā)性肺纖維化診治進(jìn)展[J].內(nèi)科急危重癥雜志2015，2l(5)：327-329.

[2]ATS/ERS/JRS/ALAT Committee on Idiopathic Pulmonary Fibrosis.An official ATS/ERS/JRS/ALAT statement:idiopathic pulmonary fibrosis:evidence-based guidelines for diagnosis and management[J].Am J Respir Crit Care Med,2011,183(6):788-824.

[3]美國(guó)胸科協(xié)會(huì)官方指南·支氣管肺泡灌洗液的細(xì)胞學(xué)分析在間質(zhì)性肺疾病中的臨床應(yīng)用(摘譯本)[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2012,35(9):650-654.

[4]Jordan RC,Erin EM.Recent evidence for pharmacological treatment of idiopathic pulmonary fibrosis[J].Annals of Pharmacotherapy,2014,48(12):1611-1619.

[5]Zhang YP,Li WB,Wang WL,etal.siRNA against plasminogen activator inhibitor-1 ameliorates bleomycin-induced lung fibrosis in rats[J].Acta Pharmacol Sin，2012，33(7)：897-908.

[6]張彥萍,王衛(wèi)麗,劉建,等.纖維溶解酶原激活物抑制劑-1對(duì)大鼠胚肺成纖維細(xì)胞的影響[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2011,34(7):500-503.

(收稿：2016-03-28)

通訊作者：△西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸科

【中圖分類號(hào)】R563

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.08.007

*陜西省科技研究發(fā)展計(jì)劃(2014KCT-23)

陜西省西安市科技計(jì)劃項(xiàng)目[SF1316(1)]