王麗娟　托婭

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外周血中性粒細(xì)胞CD64在細(xì)菌感染性疾病中的臨床研究新進(jìn)展

王麗娟托婭

【摘要】外周血中性粒細(xì)胞CD64用于鑒別診斷細(xì)菌感染性疾病越來(lái)越受到臨床的廣泛關(guān)注。研究表明，中性粒細(xì)胞CD64檢測(cè)不僅有助于細(xì)菌感染的早期診斷，對(duì)感染嚴(yán)重程度的評(píng)估及預(yù)后判斷也有重要意義。隨著中性粒細(xì)胞CD64檢測(cè)在臨床應(yīng)用中的不斷拓展，中性粒細(xì)胞CD64逐漸成為臨床抗生素治療效果的評(píng)估手段。本文就近年來(lái)其在細(xì)菌感染性疾病中的臨床應(yīng)用研究做一綜述。

【關(guān)鍵詞】生物標(biāo)志物；中性粒細(xì)胞CD64；流式細(xì)胞術(shù)；感染；膿毒癥

人體的免疫反應(yīng)在促炎－抗炎反應(yīng)機(jī)制之間具有高度復(fù)雜的動(dòng)態(tài)平衡關(guān)系，且涉及細(xì)胞和細(xì)胞因子。當(dāng)免疫系統(tǒng)被激活，例如細(xì)菌感染時(shí)，免疫反應(yīng)與促炎－抗炎反應(yīng)處于平衡且同步發(fā)生的狀態(tài)。在全身性炎癥反應(yīng)綜合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS），即膿毒癥時(shí)，免疫系統(tǒng)受到過(guò)度刺激導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)促炎－抗炎自穩(wěn)失衡，大量分泌的促炎性細(xì)胞因子會(huì)導(dǎo)致白細(xì)胞過(guò)度活化，釋放裂解酶和毒性自由基，造成內(nèi)皮細(xì)胞損傷，血管通透性增加，發(fā)生循環(huán)障礙，最終引起多器官功能衰竭。過(guò)度抗炎反應(yīng)會(huì)引起免疫抑制，這使得患者更容易出現(xiàn)繼發(fā)感染［1］。

SIRS不僅由感染引起，嚴(yán)重創(chuàng)傷或燒傷、手術(shù)、胰腺炎以及缺血－再灌注等多種因素也可以誘發(fā)SIRS。由細(xì)菌感染引發(fā)的SIRS患者，可能會(huì)進(jìn)一步發(fā)展為嚴(yán)重SIRS、感染性休克，最終導(dǎo)致死亡［2］。盡管抗生素的應(yīng)用已較為普遍，但SIRS患者的病死率仍然很高，有研究［3］顯示SIRS患者病死率高達(dá)50%。造成高病死率的一個(gè)主要原因是錯(cuò)過(guò)最佳的治療時(shí)機(jī)，造成了不可逆損傷。因此，對(duì)于SIRS患者，抗生素的早期治療可以增加生存機(jī)率。

目前，診斷SIRS的金標(biāo)準(zhǔn)仍然是血培養(yǎng)［4］。然而血培養(yǎng)耗時(shí)較長(zhǎng)、陽(yáng)性率較低，無(wú)法及時(shí)提供早期的診斷依據(jù)。在此期間，感染患者的病情可能迅速惡化。因此，在血培養(yǎng)結(jié)果報(bào)告之前，臨床醫(yī)生往往選擇廣譜抗生素用于治療。然而，非細(xì)菌感染的患者使用抗生素不僅會(huì)增加細(xì)菌耐藥性的出現(xiàn)，而且會(huì)產(chǎn)生昂貴的醫(yī)療費(fèi)用，增加患者的負(fù)擔(dān)。因此，臨床醫(yī)生需要一種能夠快速可靠地檢測(cè)SIRS及其相關(guān)感染的生物標(biāo)志物，用于及早判斷是否應(yīng)用抗生素治療。

1　中性粒細(xì)胞CD64的生物學(xué)特性

中性粒細(xì)胞CD64是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一項(xiàng)針對(duì)細(xì)菌感染的特異性指標(biāo)。CD64是免疫球蛋白超家族成員IgG Fc受體之一，又稱FcγRⅠ，是唯一的高親和力受體，可以結(jié)合單體的IgG1和IgG3。主要表達(dá)于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及樹(shù)突狀細(xì)胞表面，其表達(dá)受細(xì)胞因子的調(diào)控，對(duì)體液免疫和細(xì)胞免疫有重要的調(diào)節(jié)作用。正常情況下，外周血中性粒細(xì)胞表面CD64呈低水平表達(dá)，當(dāng)受到細(xì)菌細(xì)胞壁成分脂多糖的刺激后（即發(fā)生感染時(shí)），4－6 h之內(nèi)外周血中性粒細(xì)胞CD64在促炎細(xì)胞因子的作用下會(huì)明顯升高，可高達(dá)10倍以上，因此可作為細(xì)菌感染的早期檢測(cè)指標(biāo)［5－8］。

2　中性粒細(xì)胞CD64的檢測(cè)方法

流式細(xì)胞儀是目前檢測(cè)中性粒細(xì)胞CD64的首選方法。早期的研究者采用密度梯度離心法分離細(xì)胞后通過(guò)間接免疫熒光法檢測(cè)CD64的表達(dá)。如今，幾乎所有的研究者均采用直接免疫熒光法檢測(cè)全血中性粒細(xì)胞CD64的熒光強(qiáng)度，少數(shù)研究者直接用熒光強(qiáng)度的百分比進(jìn)行比較，或根據(jù)其淋巴細(xì)胞CD64的熒光強(qiáng)度進(jìn)行計(jì)算，從而得出中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)的大小。

3　中性粒細(xì)胞CD64的臨床診斷效能

3.1中性粒細(xì)胞CD64對(duì)于成人SIRS的診斷效能Wang等［9］進(jìn)行了一項(xiàng)薈萃分析，通過(guò)檢索PubMed、EMBASE、ISI、Web of Knowledge等數(shù)據(jù)庫(kù)，選取了符合納入標(biāo)準(zhǔn)的8項(xiàng)研究共1986例患者，最后進(jìn)行分析歸納、總結(jié)得出中性粒細(xì)胞CD64的表達(dá)對(duì)于細(xì)菌感染的早期診斷是很有價(jià)值的生物標(biāo)志物。在成年SIRS患者的診斷中，其敏感性和特異性分別為76%和85%。陽(yáng)性似然比、陰性似然比和診斷比值比分別為8.15、0.16和60.41，受試者工作特征曲線下面積為0.95。由此得出CD64表達(dá)可作為SIRS早期診斷有效的生物標(biāo)志物，但檢測(cè)結(jié)果不能單獨(dú)作為診斷指標(biāo)，而應(yīng)結(jié)合病史、體格檢查及其他檢查結(jié)果綜合判斷。

Livaditi等［10］選取47例成人重癥SIRS患者進(jìn)行前瞻性研究，測(cè)定其中性粒細(xì)胞CD64（同時(shí)還測(cè)定了其他臨床常用的生物標(biāo)志物）在SIRS發(fā)病24 h內(nèi)的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，與健康對(duì)照組比較，CD64表達(dá)水平明顯升高，且隨著其嚴(yán)重程度的增加而不斷上升。受試者工作特征曲線分析顯示其具有較高的靈敏度和特異性。此外，CD64表達(dá)增加與28 d病死率顯著相關(guān)，說(shuō)明中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)能夠可靠地評(píng)估病程階段，以及疾病嚴(yán)重程度，預(yù)測(cè)SIRS的28 d病死率。

Icardi等［11］曾對(duì)109例患者進(jìn)行了為期2個(gè)多月的監(jiān)測(cè)，同時(shí)檢測(cè)外周血中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)并進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。研究發(fā)現(xiàn)，CD64指數(shù)的預(yù)測(cè)值≤1.19時(shí)血培養(yǎng)結(jié)果陰性；CD64指數(shù)的預(yù)測(cè)值＞1.19時(shí)血培養(yǎng)和／或其最終的臨床診斷結(jié)果陽(yáng)性。CD64診斷的敏感性和特異性分別為94.6%和88.7%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為89.8%和94%。這進(jìn)一步證明了CD64對(duì)于細(xì)菌感染的早期診斷價(jià)值。Cid等［6］在最近的一項(xiàng)薈萃分析中指出，CD64作為SIRS的診斷標(biāo)志物其敏感性為79%，特異性達(dá)91%。

雖然大多數(shù)研究都是在較小的患者群體中進(jìn)行，且研究方法尚需進(jìn)一步完善，但研究結(jié)果還是比較一致的。幾乎所有相關(guān)研究均得出如下結(jié)論，CD64的表達(dá)對(duì)于細(xì)菌感染具有相對(duì)特異性，可將其應(yīng)用于SIRS的診斷中。

3.2中性粒細(xì)胞CD64對(duì)于新生兒及兒童SIRS的診斷效能新生兒SIRS在某些方面不同于成人SIRS，臨床癥狀通常比成人更輕，特異性不明顯，臨床評(píng)分系統(tǒng)無(wú)明顯的優(yōu)勢(shì)，傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)診斷性能差［12，13］。因此，將中性粒細(xì)胞CD64作為新生兒及兒童SIRS診斷的生物標(biāo)志物單獨(dú)討論是必要的。據(jù)報(bào)道［14，15］，健康新生兒中性粒細(xì)胞CD64較成年人有較高的表達(dá)水平，這可能會(huì)影響檢測(cè)的診斷效能。

邵潔等［16］對(duì)89例疑似SIRS患兒進(jìn)行研究，根據(jù)其臨床表現(xiàn)、血培養(yǎng)及5項(xiàng)非特異性指標(biāo)［白細(xì)胞（white blood cell，WBC）、血小板、血漿C反應(yīng)蛋白（C reactive protein，CRP）、微量血沉、未成熟中性粒細(xì)胞與中性粒細(xì)胞總數(shù)比值］，分為SIRS組和非SIRS感染組，同時(shí)設(shè)對(duì)照組，采用流式細(xì)胞儀對(duì)所有患兒的外周血中性粒細(xì)胞CD64的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，中性粒細(xì)胞CD64對(duì)兒童SIRS診斷的敏感性為97.4%，特異性為84.0%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為82.6%，陰性預(yù)測(cè)值為97.6%。CD64檢測(cè)的陽(yáng)性率為62.9%，高于血培養(yǎng)和5項(xiàng)非特異性指標(biāo)的陽(yáng)性率。由此可見(jiàn)，外周血中性粒細(xì)胞CD64測(cè)定可作為新生兒SIRS早期診斷的指標(biāo)，并可以判斷療效。

Streimish等［17］對(duì)中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)在新生兒SIRS診斷價(jià)值的研究顯示，對(duì)于早發(fā)性SIRS，當(dāng)CD64指數(shù)的cutoff值為2.38時(shí)，其敏感性、特異性和陰性預(yù)測(cè)值分別為100%，68%和100%；對(duì)于遲發(fā)性SIRS，當(dāng)CD64指數(shù)的cutoff值為3.62時(shí)，其敏感性、特異性和陰性預(yù)測(cè)值分別為75%，77%和96%。說(shuō)明中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)可作為診斷新生兒SIRS的一項(xiàng)有價(jià)值的生物標(biāo)志物。

Gámez－Díaz等［18］進(jìn)行的一項(xiàng)大樣本的研究顯示，成人、新生兒及兒童的CD64指數(shù)的敏感性與特異性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明中性粒細(xì)胞CD64作為一項(xiàng)診斷SIRS的生物標(biāo)志物，在成人、新生兒及兒童中均適用。

4　中性粒細(xì)胞CD64在鑒別診斷中的價(jià)值

多項(xiàng)研究［5，8，19，20］均證明中性粒細(xì)胞CD64對(duì)于鑒別診斷細(xì)菌感染與病毒、真菌及支原體等非細(xì)菌感染性疾病具有較高的敏感性和特異性。章洪院等［21］回顧性分析了64例能找到病原學(xué)依據(jù)的社區(qū)獲得性肺炎患者，其中細(xì)菌性肺炎患者30例，肺炎支原體肺炎患者34例，同時(shí)選擇30例健康者為對(duì)照組，測(cè)定CD64、降鈣素原、超敏CRP及WBC。得出細(xì)菌性肺炎組CD64、降鈣素原、超敏CRP及WBC的檢測(cè)結(jié)果均高于肺炎支原體肺炎組及對(duì)照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。孫麗等［22］進(jìn)行了相同的研究，得出CD64診斷細(xì)菌性肺炎的敏感性為84%，特異性為91%，CRP診斷細(xì)菌性肺炎的敏感性為89%，特異性為78%，說(shuō)明CD64可作為細(xì)菌性感染和非細(xì)菌性感染鑒別診斷的指標(biāo)。

盧小嵐等［23］將61例感染發(fā)熱患者以白細(xì)胞分類(lèi)和病原體分離培養(yǎng)結(jié)果為依據(jù)分為細(xì)菌感染組32例和病毒感染組29例，隨機(jī)選擇同期的健康體檢者29例作為正常對(duì)照組；采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血中性粒細(xì)胞CD64的熒光強(qiáng)度并計(jì)算CD64指數(shù)，細(xì)菌感染組CD64指數(shù)為（4.33±2.24），明顯高于病毒感染組（2.83±1.36）和正常對(duì)照組（1.96±0.24）。

5　中性粒細(xì)胞CD64對(duì)病情嚴(yán)重程度及預(yù)后判斷的價(jià)值

所起鳳等［24］對(duì)103例重癥感染患者的研究顯示，SIRS患者的CD64指數(shù)最高，且明顯高于局部細(xì)菌感染患者，對(duì)細(xì)菌感染患者行抗生素治療后，CD64指數(shù)明顯低于治療前，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。馮萍、蔡鵬威等［8，25］多位研究者也做過(guò)類(lèi)似的研究，證明CD64不僅可作為細(xì)菌感染患者的早期診斷指標(biāo)，對(duì)于其病情嚴(yán)重程度及預(yù)后判斷也是可靠的指標(biāo)。

6　展望

在目前發(fā)現(xiàn)的診斷細(xì)菌性感染的眾多生物標(biāo)志物中，中性粒細(xì)胞CD64是一個(gè)比較新穎且可靠的生物標(biāo)志物。中性粒細(xì)胞CD64的檢測(cè)有助于細(xì)菌感染的早期診斷、鑒別診斷、疾病嚴(yán)重程度的評(píng)估以及預(yù)后判斷。中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)水平可幫助臨床排除及初步判斷不明原因發(fā)熱患者感染的病原體種類(lèi)，且較細(xì)菌感染檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)—細(xì)菌培養(yǎng)可有效縮短檢測(cè)時(shí)間，并指導(dǎo)臨床合理使用抗生素，降低因抗生素的不合理使用而導(dǎo)致的細(xì)菌耐藥性及多重耐藥菌株的出現(xiàn)。加之采用先進(jìn)的流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)技術(shù)，可保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，相信隨著對(duì)中性粒細(xì)胞CD64研究的不斷完善，其終將成為臨床上更加方便而準(zhǔn)確的診斷細(xì)菌感染性疾病的生物標(biāo)志物。

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（本文編輯：李霦）

綜述

收稿日期：（2015－12－29）

doi：10.3969／j.issn.1674－7151.2016.01.013

通訊作者：托婭，E－mail：antuoya＠163.com

基金項(xiàng)目：內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學(xué)基金（2014MS0854）；內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院重大科研項(xiàng)目（NYFY－ZD2012015）
作者單位：010050呼和浩特市，內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科