李季泓

(遼寧中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院藥學部，沈陽110032)

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銀杏葉黃酮聯(lián)合奧扎格雷鈉對急性腦梗死患者血清HIF-1α、TNF-α及Caspase-3的影響

李季泓

(遼寧中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院藥學部，沈陽110032)

摘要：目的探討銀杏葉黃酮聯(lián)合奧扎格雷鈉對急性腦梗死患者血清HIF-1α、TNF-α及Caspase-3水平的影響及其意義。方法選取急性腦梗死的患者180例,隨機分為2組,各90例，對照組行常規(guī)療法治療，實驗組在對照組治療基礎上加用銀杏葉黃酮注射液，檢測2組臨床療效、神經(jīng)功能缺損評分及血清HIF-1α、TNF-α、Caspase-3水平，進而對2種療法進行對比分析。結果實驗組總有效率78.9%，明顯優(yōu)于對照組的56.7%(P<0.05)；神經(jīng)功能缺損評分明顯低于對照組(P<0.05);血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平低于對照組(P<0.05)。結論銀杏葉黃酮治療急性腦梗死,能有效改善神經(jīng)功能缺損評分,明顯改善臨床癥狀。

關鍵詞：銀杏葉黃酮；急性腦梗死；神經(jīng)功能缺損；HIF-1α；TNF-α；Caspase-3

腦梗死(CI),又稱為缺血性腦卒中(CIS)，是由于各種原因所致腦部血液供應障礙，導致局部腦組織缺血、缺氧性壞死，而引起神經(jīng)功能缺損的一類臨床綜合征[1-4]。屬中醫(yī)學“中風”范疇，治宜益氣活血、祛瘀通絡[5]。銀杏葉黃酮，亦稱銀杏葉提取物，具有增加腦血管流量、降低腦血管阻力、改善血液循環(huán)以及保護腦組織細胞的藥理作用。研究[6-7]發(fā)現(xiàn)，低氧誘導因子-1α(HIF-1α)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、血清腫瘤壞死因子(TNF-α)在急性腦梗死早期具有重要意義。本研究通過觀察急性腦梗死患者經(jīng)銀杏葉黃酮治療后其血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平的變化，以探討其治療機制。

1資料與方法

1．1一般資料選擇2014年6月—2015年2月于我院神經(jīng)內(nèi)科以急性腦梗死為診斷而收入院的患者180例，采用隨機數(shù)字表法隨機分為實驗組和對照組,各90例。均符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南》(2010年)[8]中診斷標準:1)初次發(fā)作的腦梗死患者；2)發(fā)病24 h內(nèi)接受治療；3)CT或核磁共振等影像檢查確診為急性腦梗死患者，意識清醒同意并自愿參與本實驗者。2組一般資料比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表1。

項 目實驗組對照組平均年齡/歲67.63±9.2465.41±9.07平均病程/h16.23±2.5814.91±2.07男性/n(%)58(64.4)54(60.0)女性/n(%)32(35.6)36(40.0)收縮壓/mmHg152.58±21.09156.22±20.53舒張壓/mmHg112.45±14.13116.77±13.29高血壓/n(%)12(13.3)14(15.6)冠心病/n(%)15(16.7)17(18.9)糖尿病/n(%)11(12.2)13(14.4)

1.2治療方法

1.2.1對照組嚴格按《急性腦梗死的歐洲治療指南》[9]，予以常規(guī)治療，注射用奧扎格雷鈉(海南碧凱藥業(yè)有限公司,國藥準字H20054803，批號：20100816)80 mg，250 mL氯化鈉注射液稀釋，2次/d

靜脈滴注；小牛血去蛋白提取物注射液(長春天誠藥業(yè)有限公司，國藥準字H20003820，批號：20110711)800 mg，250 mL氯化鈉注射液稀釋，1次/d靜脈滴注；阿司匹林腸溶片(江蘇恩華藥業(yè)股份有限公司，國藥準字H32026548，批號：20100820)100 mg，每晚1次口服，共治療2周。

1.2.2實驗組在常規(guī)治療基礎上加用銀杏葉提取物注射液(悅康藥業(yè)集團有限公司，國藥準字H20070226，批號：20121016)20 mL，以5%葡萄糖注射液250 mL稀釋，1次/d靜脈滴注，共治療2周。

1.3觀察指標及方法觀察2組治療前后臨床療效、神經(jīng)功能缺損評分、HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平變化。血清指標采集:所有研究對象均在治療前、后，空腹8 h后從肘靜脈抽取靜脈血3 mL，置于真空采血管中，4 ℃低溫環(huán)境下靜置1 h后以3 000r/min，離心20 min，分離血清，行雙抗體夾心ELISA法檢測血清中HIF-1α、Caspase-3、TNF-α濃度水平。

1.4療效標準參照1995年全國腦血管病學術會議制定的標準判定[10]，顯效：神經(jīng)功能缺損評分減少90%以上；有效：神經(jīng)功能缺損評分減少45%～90%；進步：神經(jīng)功能缺損評分減少18%～45%；不進步：神經(jīng)功能缺損評分減少17%～0%；惡化:神經(jīng)功能缺損評分增加18%以上；死亡。神經(jīng)功能缺損評分：參照1996年全國第四屆腦血管病會議制定的評分方法進行2組神經(jīng)功能缺損評分，最低為0分，最高為45分。

2結果

2.1治療2周后2組臨床療效結果比較見表2。

表2　治療2周后2組臨床療效結果比較(n=90)　例(%)

注：與對照組比較，#P<0.05

2.22組治療前后神經(jīng)功能缺損評分比較見表3。

±s,n=90)

注：與治療前比較，#P<0.05，##P<0.01；與對照組比較，△P<0.05

2.3治療2周后2組血清各指標變化比較見表4。

3討論

急性腦梗死是一種具有高發(fā)病率、高病死率、高致殘率的臨床常見病，且由于人口老齡化的加劇、飲食結構等因素的變化，其好發(fā)人群逐漸年輕化。傳統(tǒng)

±s,n=90)

注：與治療前比較，#P<0.05，##P<0.01；與對照組比較，△P<0.05

醫(yī)學將急性腦梗死歸屬于“中風”范疇，治療當以益氣活血、祛瘀通絡為主要治療大法[11-13]。銀杏葉提取物注射液是近年來新興的藥物，提取自白果科植物白果的干燥葉，其主要有效成分為銀杏葉黃酮?，F(xiàn)在臨床主要將之應用于治療冠心病、心絞痛、腦動脈硬化以及高血壓等心腦血管疾病。據(jù)現(xiàn)有文獻報道，銀杏葉黃酮具有多種藥理作用，不僅能增加腦血流量、改善腦部組織血液循環(huán)、擴張冠狀動脈，還能抑制血小板聚集、抗衰老、提高免疫力的功能[14]。臨床雖有將銀杏葉黃酮用于治療急性腦梗死的文獻報道，但并沒有從HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等血清指標的角度進行分析研究。因此，本研究通過對急性腦梗死患者應用銀杏葉提取物注射液，進一步探究其對患者神經(jīng)功能缺損評分、HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等指標的影響，以明確其臨床療效，并得出相關結論。

本研究結果發(fā)現(xiàn)，銀杏葉黃酮能有效改善急性腦梗死患者神經(jīng)功能缺損癥狀，提高治療率。實驗組經(jīng)2周治療后，其有效率明顯優(yōu)于對照組，病死率明顯低于對照組。其原因可能是銀杏葉黃酮能有效增加受損腦部組織的血流量，改善其缺血程度，以及還能抑制血小板聚集，防治血栓形成、缺血加劇，從而降低神經(jīng)功能缺損評分，提高治療有效率，降低病死率。亦有學者研究[15]證明，銀杏葉黃酮具有降低血液黏稠度、清除自由基、改善腦功能的作用，在急性腦梗死發(fā)生早期即及時有效的清除了大量的自由基，在一定程度上防治神經(jīng)功能缺損癥狀的加劇，這一結論也可能是實驗組患者有效率、神經(jīng)功能缺損評分優(yōu)于對照組的原因。

本研究結果發(fā)現(xiàn)，銀杏葉黃酮能有效調節(jié)急性腦梗死患者血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等指標水平。HIF-1α是在人體缺氧的條件下而產(chǎn)生的一種轉錄調節(jié)因子，在正常氧氣充足條件下并不表達，只有當機體組織發(fā)生缺氧時，才會被誘導激活并發(fā)揮其特有的生理作用，是人體在缺氧條件下維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的主要物質。研究[16]發(fā)現(xiàn)，HIF-1α主要通過調節(jié)缺氧反應性基因表達的分子通路而發(fā)揮其生理作用，據(jù)現(xiàn)有文獻統(tǒng)計，HIF-1α的下游基因多達百余種，在缺氧發(fā)生時不僅可以促進紅細胞、血管的生成，還能調節(jié)糖代謝、維持人體微環(huán)境穩(wěn)態(tài)。但其發(fā)揮作用的具體機制目前仍未十分清楚，各家觀點亦不十分相同。在本研究中治療前2組HIF-1α水平均較高，其原因可能與腦組織突發(fā)梗死急劇缺氧、缺血促進其大量表達有關，而治療結束后實驗組明顯低于對照組，其原因可能是實驗組在應用銀杏葉黃酮后，病變部腦組織的血流量增加，其缺血、缺氧程度得到有效改善，因此血清HIF-1α水平也隨之恢復。Caspase-3是一種能夠促使細胞凋亡的蛋白酶，在急性腦梗死發(fā)生時具有促進病變區(qū)神經(jīng)元凋亡的重要作用。人體在正常生理條件下，Caspase-3以沒有活性的酶原形式存在，并不發(fā)揮其生理作用，只有被細胞開始凋亡的信號激活后，才會活化并發(fā)揮其加速誘導細胞凋亡的作用。研究發(fā)現(xiàn)，急性腦梗死患者在應用Caspase-3抑制劑后，能夠明顯減輕病變區(qū)腦組織缺血神經(jīng)元的損傷，且通過抑制Caspase-3表達亦可減輕腦缺血的損傷程度，降低致殘率。在本研究中，2組在新發(fā)病時Caspase-3皆高度表達，而治療結束后實驗組患者血清Caspase-3水平明顯低于對照組，這一結果可能與實驗組在應用銀杏葉黃酮后體內(nèi)Caspase-3表達受到相應抑制有關，結合“抑制Caspase-3表達亦可減輕腦缺血的損傷程度”的結論，本研究中實驗組療效及神經(jīng)功能缺損評分低的結果能夠得以解釋。TNF-α是一種早期炎性因子，主要由單核-巨噬細胞活化產(chǎn)生，在腦梗死急性期可加重患者腦缺血局部組織的損害，實驗組患者經(jīng)治療后其血清TNF-α水平明顯低于對照組，其原因可能與銀杏葉黃酮調節(jié)免疫的功能有關，但其具體抗炎、調節(jié)免疫的機制目前尚不十分清楚。

參考文獻：

[1]黃正安,潘祖德.舒血寧對急性腦梗死患者神經(jīng)功能恢復的影響及療效分析[J].右江醫(yī)學,2012,40(2):171-173.

[2]何權瀛,趙忠新.阻塞性睡眠呼吸暫停與卒中診治專家共識解讀[J].中國呼吸與危重監(jiān)護雜志,2014,13(5):433-439.

[3]胡玨,趙志鴻,陳海.自發(fā)性腦動脈夾層致腦梗死臨床及影像分析[J].腦與神經(jīng)疾病雜志,2012,20(6):440-443.

[4]徐瑾,李艷成,王國權,等.不同性別青年型腦梗死臨床特征分析[J].卒中與神經(jīng)疾病,2013,20(4):217-220.

[5]李蘭,陳立,韓悅,等.化瘀通腑開竅方對急性腦梗死患者血清同型半胱氨酸的影響及療效觀察[J].中國中西醫(yī)結合急救雜志,2013,20(4):220-222.

[6]TAWAKOL A, SINGH P, MOJENA M, et al. HIF-1偽 and PFKFB3 Mediate a Tight Relationship Between Proinflammatory Activation and Anerobic Metabolism in Atherosclerotic Macrophages[J]. Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology, 2015, 35(6): 1463-1471.

[7]ALBRECHT M, ZITTA K, BEIN B, et al. Remote ischemic preconditioning regulates HIF-1偽 levels,apoptosis and inflammation in heart tissue of cardiosurgical patients:a pilot experimental study[J]. Basic Research in Cardiology, 2013, 108(1): 1-13.

[8]孫世光.中國急性缺血性腦卒中診治指南2010[J].中國臨床醫(yī)生,2011,43(3):67-73.

[9]王桂紅,王擁軍.急性腦梗死的歐洲治療指南[J].國外醫(yī)學(腦血管疾病分冊),2001,9(2):101-103.

[10]全國第四屆腦血管病學術會議.各類腦血管疾病診斷要點[J]. 中華神經(jīng)科雜志, 1996, 29(6): 379-380.

[11]楚海波,董華麗,廉全榮,等.參芎葡萄糖注射液與依達拉奉治療急性腦梗死54例療效觀察[J].中國實用神經(jīng)疾病雜志,2012,15(15):36.

[12]郭文超,潘速躍.不同亞型急性腦梗死出血轉化的發(fā)生及相關危險因素分析[J].中國臨床解剖學雜志,2013,31(4):480-483.

[13]杜笑,張秋娟,張紅智,等.中西醫(yī)結合綜合方案治療急性腦梗死的預后評價[J].江蘇大學學報(醫(yī)學版),2012,22(6):523-526.

[14]劉穎.銀杏葉制劑的藥理作用及臨床研究概述[J].中醫(yī)藥信息,2011,28(4):145-146.

[15]侯晞,梁楓,李愛劍,等.銀杏葉提取物聯(lián)合依達拉奉對氣虛血瘀型腦缺血再灌注損傷大鼠腦組織NO及NOS表達的影響[J].蚌埠醫(yī)學院學報,2011,36(7):673-676.

[16]BHANDARI T, OLSON J, JOHNSON R S, et al. HIF-1偽 influences myeloid cell antigen presentation and response to subcutaneous OVA vaccination[J]. Journal of Molecular Medicine, 2013, 91(10): 1199-1205.

Ginkgo biloba flavonoids combined with ozagrel in acute cerebral infarction patients of serum HIF-1α, TNF-α and Caspase-3

LI Jihong

(Department of pharmacy, Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Shenyang 110032,China)

Abstract：ObjectiveTo investigate the ginkgo biloba flavonoids combined with ozagrel in acute cerebral infarction patients of serumHIF-1α,TNF-α and Caspase-3.MethodsThe 180 acute cerebral infarction patients were selected and divided into control group treated by clinical routine therapy and experiment group treated by ginkgo biloba flavone injection,the clinical efficacy of the two groups of patients,neurological impairment score and serumHIF-1α,TNF-α and Caspase-3 level.The clinical effect were compared by SPSS 17.0.ResultsCompared with control group,the efficiency were higher(P<0.05).Compared with control group,the neurologic impairment score were lower(P<0.05).Compared with control group,the serum HIF-1α,TNF-α and Caspase-3 level were lower(P<0.05).ConclusionFlavonoids from the leaves of Ginkgo biloba on acute cerebral infarction patients better clinical curative effect,and can effectively improve symptoms in patients with neurological deficit,for the clinical treatment of cerebral infarction with important significance.

Keywords：Ginkgo biloba flavone;acute cerebral infarction;neurological function defect;HIF-1α;TNF-α;Caspase-3

(收稿日期:2015-06-10)

文章編號：2095-6258(2016)01-0091-04

中圖分類號：R255.2

文獻標志碼：A

作者簡介：李季泓(1970-),女,大學本科,副主任藥師,主要從事藥物提取與分離研究。

基金項目：“十一五”國家科技支撐計劃(2007BA120B076)。

DOI:10.13463/j.cnki.cczyy.2016.01.029