唐小明，王昌建，林　源，何世成，王衛(wèi)國,邱立新，魯杏華

(湖南省動物疫病預(yù)防控制中心,湖南長沙 410014)

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湖南省部分原種豬場主要繁殖障礙性疫病的調(diào)查

唐小明，王昌建*，林源，何世成，王衛(wèi)國,邱立新，魯杏華

(湖南省動物疫病預(yù)防控制中心,湖南長沙 410014)

摘要：為了解湖南省原種豬場主要繁殖障礙性病原感染情況及免疫抗體水平。從2011年開始，對我省部分原種豬場進(jìn)行采樣；每年監(jiān)測5個原種豬場，連續(xù)4年，共采血清樣品900份、扁桃體樣本888份。樣品進(jìn)行了豬瘟病毒(CSFV)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒(HP-PRRSV)、偽狂犬病病毒(PRV)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)、豬細(xì)小病毒(PPV)病原檢測。結(jié)果顯示，CSFV、PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV-2和PPV在我湖南原種豬場存在不同程度的感染，病原陽性率分別為0.12%、2.78%、0.45%、5.33%、9.02%和13.5%。血清樣品進(jìn)行了CSFV、PRRSV、PRV(gB)、PCV-2抗體檢測，合格率分別為84.9%、90.6%、93.3%合100%。各豬場根據(jù)自身情況，加大監(jiān)測力度，適時開展動物疫病凈化工作，并采取嚴(yán)格的生物安全措施，從源頭控制疫病的發(fā)生。

關(guān)鍵詞：原種豬場；主要繁殖障礙性疫?。徊≡?；抗體；監(jiān)測

豬瘟(Classical swine fever，CSF)、豬繁殖呼吸與綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)、高致病性豬繁殖呼吸與綜合征(high Porcine reproductive and respiratory syndrome,HP-PRRS)、豬偽狂犬病(Pseudorabies，PR)、豬圓環(huán)病毒病(Porcine circovirus diseases,PCVD)及細(xì)小病毒病(Porcine parvovirus infection，PPI)是種豬場主要繁殖障礙性疫病，不僅引起種豬繁殖障礙、仔豬呼吸系統(tǒng)疾病，還會引起豬體免疫抑制從而加重其他疫病的繼發(fā)感染，干擾疫病免疫效果，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，更重要的是這些疫病可通過種豬垂直傳播至下一代,造成更大范圍的感染[1-4]。不僅對保種、育種、生豬生產(chǎn)安全與供給等環(huán)節(jié)造成影響，還會給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重的中長期經(jīng)濟(jì)影響。種豬對保障我國豬肉生產(chǎn)具有非常重要的

意義，它不僅影響到商品豬的安全生產(chǎn)，而且影響到商品供給和食物鏈的其他環(huán)節(jié)。為從根本上降低種豬場自身疫病發(fā)生的風(fēng)險，積極探索從源頭控制動物疫病傳播的規(guī)律，自2011年起對湖南省內(nèi)部分原種場進(jìn)行了主要繁殖障礙性疫病的專項調(diào)查，并對不同時期采集的樣品進(jìn)行了CSFV、PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV-2和PPV病原檢測及CSFV、PRRSV、PRV(gB)、PCV-2抗體檢測?，F(xiàn)將有關(guān)情況報告如下。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1待檢樣品湖南省共有19個原種豬場，自2011年起我們每年從省內(nèi)原種場中抽取5個原種豬場進(jìn)行采樣檢測，其中保持3個場進(jìn)行持續(xù)采樣檢測(表1)。每個種豬場無菌采集40份~50份豬血清，并活體采集相對應(yīng)的扁桃體樣本。

表1　2011年-2014年樣品采集數(shù)量

1.1.2病原學(xué)檢測試劑 豬瘟病毒通用型實(shí)時熒光RT-PCR檢測試劑盒(50頭份)，批號：CSF201408026P；豬圓環(huán)病毒2型實(shí)時熒光PCR檢測試劑盒(50頭份)，批號：PCV-2 201410211P；豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型實(shí)時熒光RT-PCR檢測試劑盒(50頭份)批號：PRRS20141031P；豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Nsp1594-1680變異株)實(shí)時熒光RT-PCR檢測試劑盒(50頭份)，批號：HP-PRRS20141028P；豬細(xì)小病毒實(shí)時熒光PCR檢測試劑盒(50頭份)，批號：PP20140718P；以上病原學(xué)檢測試劑盒均購自于北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司。

1.1.3血清學(xué)檢測試劑豬瘟病毒抗體ELISA試劑盒，由美國IDEXX公司生產(chǎn)，批號：E331；豬偽狂犬病毒gB抗體ELISA試劑盒，由美國IDEXX公司生產(chǎn)，批號：LK867；豬偽狂犬gE抗體ELISA試劑盒，由美國IDEXX公司生產(chǎn)，批號：BL264；豬繁殖呼吸與綜合征病毒抗體ELISA試劑盒，由法國LSI公司生產(chǎn)，批號：5-TTVETPRA-053；豬圓環(huán)病毒2型抗體ELISA試劑盒,由西班牙INGENASA公司生產(chǎn)。

1.2方法

1.2.1病原學(xué)檢測利用采集來的扁桃體樣本，搗碎提取病毒核酸，均采用實(shí)時熒光定量的方法檢測組織樣本中CSFV、PCV-2、PRRSV、HP-PRRSV、PPV的病毒核酸，體系配置、反應(yīng)條件及判定標(biāo)準(zhǔn)參照試劑盒說明書進(jìn)行；用 PRV gE基因缺失疫苗免疫的豬場，檢測PRV gE抗體，若PRV gE抗體呈陽性，則判定為PRV野毒感染，即病原學(xué)陽性，試驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.2血清學(xué)檢測 所有采集的血清樣本，利用ELISA方法檢測血清中CSFV、PRRVS、PRV、PCV抗體，操作規(guī)程及判定標(biāo)準(zhǔn)參照各試劑盒說明書進(jìn)行。由于豬繁殖呼吸與綜合征病毒、高致病性豬繁殖呼吸與綜合征病毒免疫后產(chǎn)生的是同一個豬繁殖呼吸與綜合征病毒免疫抗體，僅檢測豬繁殖呼吸與綜合征病毒抗體；在本此調(diào)查過程中，由于豬細(xì)小病毒免疫背景不清楚，未進(jìn)行豬細(xì)小病毒抗體的檢測與數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。

2結(jié)果

2.1不同年份病原學(xué)總體感染情況

在4年的監(jiān)測過程中，主要繁殖障礙性疫病病原均存在不同程度的陽性，其中CSFV、PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV-2、PPV總體陽性率分別為0.12%、2.78%、0.45%、5.33%、9.02%和13.5%。不同年份不同場的病原感染情況存在一定差別(表2和表3)。

表2　不同年份場病原學(xué)結(jié)果

表3　不同年份病原學(xué)陽性率結(jié)果

2.23個持續(xù)監(jiān)測的原種場病原學(xué)檢測

對A、B、C 3個原種場，4年均進(jìn)行采樣檢測，這3個原種場CSFV連續(xù)4年監(jiān)測結(jié)果均為陰性，PRRSV、HP-PRRSV監(jiān)測的陽性率也較低，PCV-2和PPV的感染率較高；PRV監(jiān)測過程中發(fā)現(xiàn)，其中A在2013、2014年，B場在2014年P(guān)RVgE抗體陽性率均出現(xiàn)了急劇上升。分析原因，可能與疫苗類型有關(guān)。C場PRV連續(xù)4年gE抗體結(jié)果均為陰性(表4)。

2.3血清學(xué)監(jiān)測

共對900份樣品進(jìn)行了豬瘟、豬繁殖呼吸與綜合征、豬偽狂犬病病毒免疫抗體(gB)監(jiān)測，抗體合格率分別為84.9%、90.6%、93.3%，具有良好的抗體保護(hù)水平；700份樣品進(jìn)行了豬圓環(huán)病毒抗體(IGg)監(jiān)測，抗體合格率為100.0%，見表5。

表4　3個原種豬場連續(xù)4年的病原監(jiān)測結(jié)果

表5　不同年份原種豬場免疫抗體監(jiān)測結(jié)果

3討論

豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬病、豬圓環(huán)病毒病及細(xì)小病毒病是危害種豬場主要繁殖障礙性疫病，是危害養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重要動物疫病，給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1,3,5]。有研究表明，母豬持續(xù)帶毒感染是當(dāng)前種豬面臨的重要問題，帶毒母豬將繁殖障礙性疫病病毒經(jīng)胎盤垂直傳播給胚胎，即可引起嚴(yán)重流產(chǎn)和弱死胎，又使帶毒母豬卵巢等生殖器官產(chǎn)生器質(zhì)性病變，導(dǎo)致繁殖障礙[6-8]；在新生仔豬方面，經(jīng)帶毒母豬先天感染導(dǎo)致死亡和免疫耐受是目前仔豬死亡主要原因之一[9]。

從本次共調(diào)查了湖南省11個原種豬場(其中A、B、C場每年監(jiān)測只計算為3個場)，共采集血清900份、扁桃體樣本888份。監(jiān)測到豬瘟野毒1份，經(jīng)典藍(lán)耳病病毒54份，高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒13份，偽狂犬gE抗體陽性45份，豬圓環(huán)病毒2型80份，豬細(xì)小病毒120份，陽性率為別為0.12%、2.78%、0.45%、5.33%、9.02%、13.5%。監(jiān)測結(jié)果顯示,這6種主要繁殖障礙性疫病在我省原種豬場種存在不同程度的感染,其中PCV-2及PPV感染較為嚴(yán)重，場陽性率均在70%以上。在高密度的免疫狀況下，母豬發(fā)病死亡的可能性不大，但可通過種豬垂直傳播至下一代，造成更大范圍的污染，各豬場應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)實(shí)際及臨床表現(xiàn)，制定相應(yīng)的病原學(xué)監(jiān)測計劃，對于病原學(xué)陽性豬進(jìn)行嚴(yán)格隔離淘汰，優(yōu)化種豬群，確保種豬群的健康狀況，切實(shí)提高種豬的生產(chǎn)性能。

主要繁殖障礙性疫病主要的控制措施是合理選擇疫苗免疫，進(jìn)行預(yù)防性免疫。本次采集的900份血清樣品，進(jìn)行了豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、偽狂犬，抗體合格率分別為84.9%、90.6%、93.3%,700份血清樣品進(jìn)行了圓環(huán)病毒抗體檢測，抗體合格率為100%。結(jié)果顯示,湖南省原種豬場主要繁殖障礙性疫病中，豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、偽狂犬、圓環(huán)病毒免疫狀況良好，抗體保護(hù)水平高，抗體合格率均在84%以上，免疫效果確實(shí)。但個別豬場在某個時期內(nèi)某種疫病免疫抗體水平較低，感染疫病的風(fēng)險較大。各豬場應(yīng)加強(qiáng)血清抗體監(jiān)測，根據(jù)檢測結(jié)果，制定合理的免疫程序，并對所使用疫苗進(jìn)行評估，選擇高質(zhì)量疫苗；對抗體水平較差的某種疫病，采取措施進(jìn)行補(bǔ)免。本次調(diào)查，由于豬細(xì)小病毒免疫背景不清楚，未對其進(jìn)行抗體檢測和結(jié)果的統(tǒng)計分析，但豬細(xì)小病毒免疫接種仍值得高度重視。

從連續(xù)監(jiān)測的3個原種場來看，豬瘟病毒抗原均為陰性，且免疫抗體合格率很高。豬繁殖與呼吸綜合征病原檢測結(jié)果顯示，3個原種豬場均存在藍(lán)耳病經(jīng)典毒株陽性，個體陽性率在2%左右，2個豬場連續(xù)監(jiān)測，豬繁殖與呼吸綜合征變異株均為陰性，僅1個豬場存在變異株感染；1個豬場連續(xù)4年偽狂犬gE抗體均為陰性，2個場2012年以前gE抗體陰性，近年來抗體急劇上升，達(dá)到了90%左右，這可能與更換疫苗類型有關(guān)。具體原因正在進(jìn)一步調(diào)查中。連續(xù)監(jiān)測過程我們發(fā)現(xiàn)，這3個豬場的豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、偽狂犬病病原陽性率均較低，為這3種疫病凈化工作提供了良好的條件，豬場方面可依據(jù)生產(chǎn)實(shí)際情況，制定相應(yīng)的監(jiān)測計劃和凈化方案，并采取嚴(yán)格的生物安全措施，逐步使豬群得到凈化。為我省的動物疫病凈化工作提供依據(jù)和技術(shù)支持。

4防控建議

(1)各原種豬場根據(jù)自身生產(chǎn)實(shí)際，加強(qiáng)疫苗免疫，合理選擇優(yōu)質(zhì)疫苗，根據(jù)監(jiān)測結(jié)果，制定合理的免疫程序，避免各種疫苗免疫之間的相互干擾，確保免疫效果確實(shí)。對于病原學(xué)陽性率較低病種，慎重使用活疫苗進(jìn)行免疫。

(2)加大監(jiān)測力度，提高監(jiān)測水平，尤其是病原學(xué)監(jiān)測水平。 對于病原學(xué)陽性豬只，應(yīng)嚴(yán)格實(shí)行淘汰，并擴(kuò)大監(jiān)測面及監(jiān)測頻率，不斷發(fā)現(xiàn)問題，千方百計提高豬群健康水平[10-11]。

(3)采取高水平的生物安全措施，包括嚴(yán)格的消毒與隔離以及病死動物的無害化處理。抓住機(jī)遇，加快推進(jìn)動物疫病凈化工作，為湖南全省乃至全國提供優(yōu)質(zhì)種豬。

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動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2016,37(2):120-124ProgressinVeterinaryMedicine

Investigation on Primary Reproductive Disturbance Diseases in Partial Pig Breeding Farms of Hunan Province

TANG Xiao-ming,WANG Chang-jian,LIN Yuan,HE Shi-cheng,WANG Wei-guo,QIU Li-xin,LU Xing-hua

(HunanAnimalDiseaseePreventionandControlCenter,Changsha,Hunan,410014,China)

Abstract:In order to understand the infection of the primary eproductive disturbance diseases and the immune effects in pig breeding farms in Hunan province, since 2011, sampling in part of pig breeding farms in Hunan province. Surveille five pig breeding farms each year for the four year in a row, sampling 900 serum samples and 888 tonsil samples. Detect the antigen of CSFV, PRRSV,HP-PRRSV,PRV,PCV-2,PPV. The result showed that positive rate of antigen were 0.12%，2.78%，0.45%，5.33%，9.02%，13.5%.The positive rate of CSF, PRRS,PR,PC, antibody were 84.9%，90.6%，93.3%，100%.The pig breeding farms should depending on its own situation， Increase the intensity of monitoring，developing animal disease cleanup and adopt strict biosecurity measures control the disease at source.

Key words:breeding pig farm;Primary reproductive disturbance disease;antigen;antibody;surveillance

文章編號:1007-5038(2016)02-0116-04

中圖分類號:S858.28

文獻(xiàn)標(biāo)識碼:B

作者簡介：唐小明(1978-)，男，湖南邵陽人，碩士，主要從事動物疫病防控研究。 *通訊作者

收稿日期：2015-05-13