食品微生物檢驗(yàn)內(nèi)容及檢測(cè)技術(shù)研究

劉 楊 興安盟食品藥品檢驗(yàn)所

隨著我國(guó)綜合國(guó)力的不斷發(fā)展，社會(huì)生產(chǎn)力不斷提高，人們的生活也變得越來越富裕，對(duì)美味食品的追求越來越高，在吃上投入的資金越來越多。鑒于此，一些不良商家以次充好、以假亂真，使食品安全問題頻發(fā)，嚴(yán)重影響食品市場(chǎng)的正常秩序，隨著一系列食品安全問題的發(fā)生，食品安全問題引起全社會(huì)的高度重視。為保證人民的人身安全，必須加大對(duì)食品安全檢測(cè)的檢測(cè)力度，防止食品安全問題發(fā)生，為人民群眾創(chuàng)造良好的食品市場(chǎng)環(huán)境。經(jīng)過政府和各科研單位的不懈努力，已研發(fā)出多種食品微生物檢測(cè)技術(shù)，為食品安全作出極大的貢獻(xiàn)。本文對(duì)高效液相色譜技術(shù)在快速檢測(cè)食品微生物中的應(yīng)用進(jìn)行研究，從食品微生物檢驗(yàn)內(nèi)容及檢測(cè)技術(shù)相關(guān)概述、變性高效色譜技術(shù)的原理、變性高效液相色譜技術(shù)特點(diǎn)和變性高效液相色譜技術(shù)在微生物方面的應(yīng)用4方面進(jìn)行具體的闡述。

食品微生物檢驗(yàn)內(nèi)容及檢測(cè)技術(shù)相關(guān)概述

民以食為天，隨著人們對(duì)吃的追求越來越高，市場(chǎng)上的食品變得多種多樣、讓人眼花繚亂，許多不法商販從中嗅到了巨大的“商機(jī)”，想著大發(fā)食品的不義之財(cái)，以至于很多的過期回爐食品、假冒偽劣等不安全食品流入市場(chǎng)，威脅人們的人身安全。近年來食品安全問題頻發(fā)，對(duì)人們的人身財(cái)產(chǎn)安全造成極大的危害，也釀成許多悲劇，引起社會(huì)各界的高度關(guān)注，為防止食品安全問題發(fā)生，保障人們的人身財(cái)產(chǎn)安全，社會(huì)各界對(duì)食品安全檢測(cè)技術(shù)的研究投入極大，各科研單位經(jīng)過多年努力，研究出有效的食品微生物檢驗(yàn)內(nèi)容和檢測(cè)技術(shù)。

其中，食品微生物的檢驗(yàn)內(nèi)容主要有污染程度指示菌檢驗(yàn)、致病菌檢驗(yàn)，食品微生物的檢測(cè)技術(shù)主要有分子生物學(xué)檢測(cè)、抗體檢測(cè)和免疫分析法檢測(cè)、代謝學(xué)檢測(cè)。目前我國(guó)食品微生物檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用最廣泛，同時(shí)也最便捷、準(zhǔn)確度最高的檢測(cè)技術(shù)是變性高效色譜技術(shù)，如今變性高效色譜技術(shù)已在食品微生物檢測(cè)領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用。本文以變性高效色譜技術(shù)為例，對(duì)食品微生物的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行簡(jiǎn)要分析。

變性高效色譜技術(shù)的原理

變性高效色譜技術(shù)分析原理較復(fù)雜，在高壓條件下，溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相間進(jìn)行連續(xù)多次交換，高效液相色譜技術(shù)利用溶質(zhì)在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同引起排阻作用的差別使不同溶質(zhì)得以分離，從而達(dá)到食品檢測(cè)的目的。

變性高效液相色譜技術(shù)特點(diǎn)

變性高效液相色譜技術(shù)具有自身的特點(diǎn)，具體表現(xiàn)為：第一，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度高，對(duì)于已知突變，準(zhǔn)確度大于99%，對(duì)于未知的突變，準(zhǔn)確度大于96%；第二，變性高效液相色譜技術(shù)的檢測(cè)能夠準(zhǔn)確可靠地檢測(cè)低水平的突變，靈敏度非常高，能夠?qū)κ称窐悠分兄辽?/20的基因型進(jìn)行檢測(cè)；第三，能夠分析異質(zhì)性的樣本從而檢測(cè)混合樣品；第四，由于該技術(shù)使用儀器進(jìn)行自動(dòng)化操作，因此操作容易；第五，檢測(cè)過程中消耗品價(jià)格便宜，同時(shí)檢測(cè)速度快，質(zhì)量高，因此性價(jià)比非常高。

另外，變性高效液相色譜技術(shù)與其他技術(shù)如單鏈構(gòu)象多態(tài)性和變形梯度凝膠電泳法相比，具有很多優(yōu)勢(shì)，它能夠進(jìn)行自動(dòng)化控制，屬于一種新型基因突變篩查技術(shù)，除PCR外，無需購(gòu)買特殊試劑，也不需進(jìn)行PCR引物修飾或者進(jìn)行其他處理等，因此方便使用。

變性高效液相色譜技術(shù)在食品微生物方面的應(yīng)用

在農(nóng)產(chǎn)品微生物領(lǐng)域中的應(yīng)用

隨著市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)的日益激烈，農(nóng)作物生產(chǎn)者為提高農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量而大量使用藥物，生產(chǎn)出的食品帶有藥性，導(dǎo)致耐藥性的微生物就相應(yīng)出現(xiàn)，對(duì)人體造成極大危害。由于缺乏快速準(zhǔn)確識(shí)別致病微生物的有效檢測(cè)技術(shù)和有效臨床手段，因此抗微生物治療遇到很大困難。而變性高效液相色譜術(shù)在微生物耐藥基因突變檢測(cè)中得到廣泛應(yīng)用，能對(duì)耐藥性相關(guān)的基因突變進(jìn)行檢測(cè)，且可靠性較高，為臨床快速檢測(cè)未知致病細(xì)菌奠定一定的基礎(chǔ)。

在混合微生物樣品的分離鑒定中的應(yīng)用

食品中含有多種微生物，因此在檢測(cè)和檢定的工作中常涉及對(duì)混合樣品中微生物的檢測(cè)。對(duì)于那些含有多種混合的微生物的食品，在檢測(cè)的過程要中要對(duì)所有的微生物進(jìn)行檢測(cè)，因此需要易操作且快速的變性高效液相色譜技術(shù)。通過變性高效液相色譜技術(shù)對(duì)DNA序列差異的特性結(jié)合細(xì)菌進(jìn)行檢測(cè)，然后在屬和種的水平上鑒定細(xì)菌，對(duì)于難以鑒定的還需利用DNA靶點(diǎn)進(jìn)行具體分析，由于細(xì)菌種類不同，會(huì)顯示出特異的DHPLC峰型，準(zhǔn)確地分離和鑒定食品中的微生物。變性高效液相色譜技術(shù)不僅能夠應(yīng)用于食物中的微生物檢定，在食物中真菌、寄生蟲和病毒等的檢驗(yàn)過程中也發(fā)揮著非常重要的作用，可通過識(shí)別微生物和抗藥基因突變保證食品的安全性。與傳統(tǒng)的食品微生物檢驗(yàn)技術(shù)相比，變性高效液相色譜技術(shù)具有很多優(yōu)勢(shì)，可彌補(bǔ)傳統(tǒng)僅依靠表型進(jìn)行識(shí)別的不足，可靠地從菌株水平來識(shí)別微生物，且檢驗(yàn)檢定的準(zhǔn)確度高，應(yīng)用前景非常好。