□ 魏姜勉　黃淮學院

核酸探針和PCR技術應用于食品檢驗中的作用

□ 魏姜勉黃淮學院

在國家經(jīng)濟水平和居民生活質量不斷提升的背景下，人們對于食品安全的重視程度也逐漸提升。同時，在相應的食品安全方面也得到很大發(fā)展，誕生一些新的食品安全的檢測技術。較之常規(guī)的食品安全檢測技術，新技術在時間、經(jīng)費、準確性和操作簡易度上都在很大程度上得到改善。基于此，以核酸探針和PCR技術應用于食品檢驗中的作用為中心展開細致的分析探討，旨在提供核酸探針和PCR技術應用于食品檢驗的理論參考。

核酸探針和PCR技術的原理及主要內容

核酸探針技術原理及主要內容

核酸探針技術從原理上屬于分子生物學的范疇，該技術主要是利用生物核苷酸堿基互補的原理，使用相應的基因探針和需測定的靶序列進行互補，進而檢測目標靶序列是否存在。從核酸探針技術的原理上可知，該技術的重點在核酸雜交的環(huán)節(jié)中，根據(jù)特異的堿基配對研究其過程，同時分離這些標記的特殊核酸片段，便可以實現(xiàn)檢測特定核酸探針的制作，目前該技術已在食品安全檢測上取得廣泛的應用。

PCR技術原理及主要內容

PCR技術的原理是有效地擴增體外存在的特定雙鏈DN A，故又被稱作體外基因擴增法。在檢測過程中，上首先是DN A的雙鏈在高溫條件下解鏈形成單鏈，然后再加入兩段人工合成的與雙鏈DN A兩端序列彼此互補的核苷酸片段，再重復以上程序實現(xiàn)DN A片段的擴增，實現(xiàn)DN A的大量增加，再利用電泳等技術檢測DN A，實現(xiàn)食品安全的檢測。

核酸探針技術在實際食品檢驗中的應用

每一種致病菌都具有自身的獨特的核酸片段，因此核酸探針技術對病菌的檢測精密度和敏感度很強，主要應用于多種致病菌的檢測?，F(xiàn)階段，使用較為廣泛的探針技術主要有放射性標記探針技術以及非放射性標記探針。

放射性標記探針技術

放射性標記探針技術作用物主要是放射性的同位素。目前廣泛使用的同位素有3H、32P、35S。放射性標記探針技術優(yōu)點為檢測的靈敏性高，缺點為涉及放射性的污染，同位素半衰期一般很短，在同位素衰變的過程中釋放的放射物對人體有很大的傷害，因此雖然該技術在檢測效果上十分良好，但是使用的危害性很大，不能實現(xiàn)廣泛的商業(yè)化推廣。

非放射性標記探針技術

非放射性標記探針技術在檢測中的標記物為地高辛或生物素，這兩者都屬于半抗原。生物素非放射性標記探針技術在使用中對于人體的傷害很小，但使用的環(huán)境必須為無光，生物素極易受到光照的影響，在紫外線下會出現(xiàn)分解現(xiàn)象。地高辛標記在檢靈敏度上較高，同時對人體的傷害很低，適用范圍廣，并且在特異性方面也要比生物素標記更高，因此目前使用十分廣泛。

PCR技術在實際食品檢驗中的應用

PCR技術是將雙鏈DN A轉化為單鏈，再將單鏈合成雙鏈進而實現(xiàn)DN A片段的大量復制，在食品安全的檢測上最為明顯的優(yōu)勢在于敏感度高、特異性強，目前在食品安全檢測中已取得示范廣泛的應用?，F(xiàn)階段，主要在檢測單核細胞增多癥李氏桿菌、沙門菌方面具有廣泛的應用。

單核細胞增多癥李氏桿菌應用

相關研究人員使用PCR技術擴增食品中的李氏桿菌的溶血基因，檢測時間短，同時檢測靈敏度高，在檢測樣品中只需少量的李氏桿菌存在就可以被檢測出，因此檢測效果極佳。

沙門氏菌應用

相關研究人員分局沙門菌某段克隆中具有的特異性序列設計出一對引物，進而依據(jù)這一引物可快速檢測出食品中沙門菌，檢測的特異性和敏感度高，在食品安全的檢測上期檢測準確性極佳。

PCR技術在食品安全檢測上雖有諸多的優(yōu)點，在敏感度和特異性上均有保障，有效提升著食品的質量，但是現(xiàn)階段仍存在很大的弊端。主要是該技術的操作精確性要求高，因此對于操作人員的要求很高，如果在操作中規(guī)范性不足會致使檢測結果出現(xiàn)差異，使該技術的高靈敏性反而成為一個缺點。

結語

核酸探針技術是使用十分特殊的基因探針和需測定的靶序列互補，進而實現(xiàn)被檢測靶序列生物是否存在的檢查技術。PCR技術是將雙鏈DNA轉化為單鏈，再將單鏈合成雙鏈進而實現(xiàn)DNA片段的大量復制，進而對該類DNA實現(xiàn)高敏度檢測。在現(xiàn)階段核酸探針技術主要包括放射性標記探針技術、非放射性標記探針技術兩種。核酸探針和PCR技術雖都具有一定的優(yōu)勢，但是同時也存在著一定的缺點，還需要科研人員在持續(xù)深入地研究，不斷地完善食品安全檢測技術，保障食品安全。

魏姜勉（1987-），女，漢，河南遂平人，碩士，助教。研究方向：食品、生物工程。