朱曉博，孔朝輝，范小玲，張祥生，丁德剛

(河南省人民醫(yī)院，鄭州430030)

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·臨床研究·

血清CYFRA21-1與浸潤性膀胱尿路上皮細(xì)胞癌預(yù)后的關(guān)系

朱曉博，孔朝輝，范小玲，張祥生，丁德剛

(河南省人民醫(yī)院，鄭州430030)

摘要：目的探討細(xì)胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)與浸潤性膀胱尿路上皮細(xì)胞癌預(yù)后的關(guān)系。方法 47例浸潤性膀胱尿路上皮細(xì)胞癌患者中，初發(fā)腫瘤36例、復(fù)發(fā)腫瘤11例，臨床分期：T2期34例，T3期9例，T4a期4例。病理分級：G1級9例，G2級22例，G3級16例。采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)檢測術(shù)前血清CYFRA21-1水平，以3.5 μg/L為臨界值將上述患者分為高表達(dá)組與低表達(dá)組，繪制Kaplan-Meier生存曲線，并進(jìn)行比較。采用χ2檢驗分析CYFRA21-1表達(dá)與浸潤性膀胱尿路上皮細(xì)胞癌患者臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果血清CYFRA21-1在T3~4a期中高表達(dá)的比例明顯高于T2期，CYFRA21-1在復(fù)發(fā)膀胱癌中高表達(dá)的比例明顯高于初發(fā)膀胱癌(P均<0.05)。而CYFRA21-1表達(dá)的高低與膀胱癌患者的年齡、性別、病理分級等指標(biāo)無關(guān)。CYFRA21-1高表達(dá)組膀胱癌患者的平均生存時間、術(shù)后3年生存率、術(shù)后5年生存率均明顯低于CYFRA21-1低表達(dá)組(P均<0.05)。 結(jié)論 檢測治療前血清CYFRA21-1水平有助于浸潤性膀胱尿路上皮細(xì)胞癌預(yù)后的判斷。

關(guān)鍵詞：膀胱尿路上皮細(xì)胞腫瘤；細(xì)胞角蛋白19片段；預(yù)后

膀胱癌是泌尿系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，以尿路上皮細(xì)胞癌最常見，約占膀胱癌的90%以上[1]。腫瘤標(biāo)記物在泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤中應(yīng)用較為廣泛，如前列腺特異性抗原在前列腺癌以及甲胎蛋白、β-人絨毛膜促性腺激素在睪丸腫瘤中已廣泛用于疾病預(yù)后的評估。目前膀胱癌仍缺乏一個有效的預(yù)后判斷指標(biāo)。本研究隨訪了本院泌尿外科收治的47例浸潤性膀胱尿路上皮細(xì)胞癌患者，對術(shù)前患者血清細(xì)胞角蛋白(CK)19片段(CYFRA21-1)水平與預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行了探討。

1資料與方法

1.1臨床資料收集隨訪2001年5月～2012年11月本院收治的浸潤性膀胱尿路上皮細(xì)胞癌患者47例，男28例、女19例，年齡43～72歲、中位年齡59歲。初發(fā)腫瘤36例、復(fù)發(fā)腫瘤11例，均經(jīng)CT和膀胱鏡活檢確診。47例患者均行回腸膀胱術(shù)，術(shù)后對患者進(jìn)行臨床分期及病理分級，臨床分期：T234例，T39例，T4a4例。病理分級：G1(高分化) 9例，G2(中分化) 22例，G3(低分化) 16例。

1.2外周血CYFRA21-1水平的檢測采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)。術(shù)前采集患者空腹靜脈血2 mL，用15% K2EDTA 20 μL抗凝，置于專用塑料試管中，3 000 r/min離心分離血漿，置-20 ℃保存，檢測時37 ℃溶解。CYFRA21-1試劑盒購自瑞士羅氏公司，檢測儀器為羅氏公司Elecsys2010儀器，所有操作均按說明書進(jìn)行。根據(jù)受試者工作特征(ROC)曲線，以3.5 μg/L為臨界值將上述患者分為高表達(dá)組25例與低表達(dá)組22例。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料以頻數(shù)或百分比表示，采用χ2檢驗分析CYFRA21-1表達(dá)與浸潤性膀胱癌患者臨床病理特征的關(guān)系，采用終止點(diǎn)法及用完全數(shù)據(jù)和截尾數(shù)據(jù)表示每例患者隨訪結(jié)果，生存曲線采用Kaplan-Meier法繪制、比較采用Log-rank檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1CYFRA21-1表達(dá)與浸潤性膀胱尿路上皮細(xì)胞癌患者臨床病理特征的關(guān)系見表1。術(shù)后隨訪15~ 126個月、中位隨訪時間74個月。死亡23 例(48.9%)、死亡時間為術(shù)后15~124個月。CYFRA21-1在T3~4a期中高表達(dá)的比例為69.2%(9/13)，明顯高于T2期的32.3%(11/34)(P<0.05)。CYFRA21-1在復(fù)發(fā)性浸潤性膀胱尿路上皮細(xì)胞癌中高表達(dá)的比例為72.7%(8/11)，明顯高于初發(fā)性[47.2%(17/36)](P<0.05)。CYFRA21-1表達(dá)的高低與浸潤性膀胱尿路上皮細(xì)胞癌患者的年齡、性別、病理分級無關(guān)(P均>0.05)。

表1　CYFRA21-1表達(dá)與浸潤性膀胱尿路上皮細(xì)胞癌患者

2.2血清CYFRA21-1表達(dá)與膀胱癌患者生存時間的關(guān)系CYFRA21-1高表達(dá)的膀胱癌患者的平均生存時間為56.4個月，95%CI43.0~69.7；明顯低于CYFRA21-1低表達(dá)的膀胱癌患者的平均生存時間82.2個月，95%CI66.7~ 97.6(P<0.05)。

2.3血清CYFRA21-1高、低表達(dá)的膀胱癌患者的生存曲線比較CYFRA21-1高表達(dá)的膀胱癌患者術(shù)后3年生存率(56.1%)、5年生存率(45.6%)均明顯低于CYFRA21-1低表達(dá)的膀胱癌患者術(shù)后3年生存率(79.3%)、5年生存率(66.7%)(P均<0.05)。見圖1。

圖1　CYFRA21-1高、低表達(dá)的膀胱癌患者的生存曲線

3討論

CYFRA21-1 是一種新型的腫瘤標(biāo)志物，其為CK-19 的全長片段，屬于CK大家族，CK是存在于所有上皮細(xì)胞中的細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋白，角蛋白水平可敏感地反映細(xì)胞分化或腫瘤發(fā)生。CK-19為角蛋白的一個亞基，分子量為40 kD，其可溶性片段上的兩個抗原決定簇可特異性地與兩個單克隆抗體BM19-21、KS19-1相結(jié)合，稱之為CYFRA21-1，主要分布在鱗狀上皮和單層上皮細(xì)胞中。正常情況下，CYFRA21-1以寡聚物形式存在，含量極低。在惡性上皮細(xì)胞腫瘤中，當(dāng)細(xì)胞死亡時，激活的蛋白酶加速了細(xì)胞的降解，使得大量的可溶性CK-19 片段釋放出來，造成血液中的可溶性CK-19 片段濃度升高，而CYFRA21-1的濃度可反映CK-19的濃度[2，3]。血清CYFRA21-1在多種腫瘤中有明顯升高，可以通過免疫分析方法進(jìn)行定量，臨床上通常用于肺癌[4]、卵巢癌[5]、食管癌[6]等惡性腫瘤的診斷及療效觀察。

CYFRA21-1在膀胱癌中應(yīng)用的報道較少。Pariente等[7]通過檢測尿液中CYFRA21-1的濃度, 證實CYFRA21-1是一個可靠的診斷膀胱癌的腫瘤標(biāo)記物，靈敏度和特異度分別為96.9%和67.5%。并發(fā)現(xiàn)膀胱癌患者尿中CYFRA21-1水平明顯高于良性前列腺增生、尿路結(jié)石和腎功能衰竭患者，且與腫瘤體積相關(guān)，但與尿路感染患者間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義。Snchez-Carbayo等[8]研究證實，尿中CYFRA21-1的總體靈敏度為83.8%，在pTa期、pT1期、pT2期、pT3~pT4其靈敏度分別為75.0%、86.8%、72.2%和100%。Washino等[9]檢測85例膀胱尿路上皮細(xì)胞癌患者外周血中CEA、CA19-9及CYFRA21-1水平時發(fā)現(xiàn)，腫瘤分期和分級越高，血清CYFRA21-1水平越高。Andreadis等[10]研究發(fā)現(xiàn)，CYFRA21-1水平與膀胱腫瘤分化沒有相關(guān)性，但與膀胱癌的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，并可用于評估膀胱癌化療的治療反應(yīng)。國內(nèi)目前僅見研究尿液中CYFRA21-1水平與膀胱癌關(guān)系的報道[11]，尚無檢測膀胱尿路上皮細(xì)胞癌患者外周血中CYFRA21-1水平的相關(guān)研究。

目前主要有病理分期、病理分級、有無淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、外科手術(shù)方式、術(shù)中輸血等與膀胱癌預(yù)后相關(guān)[12,13]。然而，所有這些都是術(shù)后因素，不能在治療前對膀胱癌的預(yù)后進(jìn)行預(yù)測。近年來，文獻(xiàn)報道[14~18]通過檢測尿中ImmunoCyt、尿核基質(zhì)蛋白22、膀胱腫瘤抗原、透明質(zhì)酸和透明質(zhì)酸酶、端粒酶、生存蛋白、熒光原位雜交、DNA微衛(wèi)星分析、生存素等進(jìn)行膀胱癌的診斷和預(yù)后評價，但尿液檢測易受尿路感染的干擾。Suyama等[19]報道，目前可靠的術(shù)前預(yù)測上尿路尿路上皮細(xì)胞癌預(yù)后的指標(biāo)為血清CRP。然而，炎癥、感染、急性心肌梗死、惡性腫瘤時，CRP亦會升高，特異性相對較低。我們采用電化學(xué)發(fā)光法對47例浸潤性膀胱尿路上皮細(xì)胞癌患者術(shù)前血清CYFRA21-1水平進(jìn)行檢測，術(shù)后隨訪15~ 126個月，發(fā)現(xiàn)術(shù)前血清CYFRA21-1水平與腫瘤臨床分期、病理分級、腫瘤是否復(fù)發(fā)有關(guān)，長期隨訪結(jié)果證實CYFRA21-1高表達(dá)的膀胱癌患者的平均生存時間、術(shù)后3年生存率、術(shù)后5年生存率均明顯低于CYFRA21-1低表達(dá)組。因此，檢測血清CYFRA21-1水平可用于術(shù)前評估膀胱尿路上皮細(xì)胞癌的預(yù)后，特別對于不能耐受或不愿接受手術(shù)的患者尤有意義。本組病例數(shù)相對較少，尚需進(jìn)一步進(jìn)行較大的病例隊列研究證實。同時，相對尿脫落細(xì)胞學(xué)、膀胱鏡等檢測手段，血清CYFRA21-1檢測特異性有待提高，尚需不斷探索，找到更多的具有更高敏感性和特異性的腫瘤標(biāo)志物，聯(lián)合進(jìn)行膀胱癌術(shù)前預(yù)后的評判。

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本刊2015年第55卷第5期《乳腺癌組織中E-cadherin和CD105的表達(dá)》第一作者陳謙的單位僅為徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院。特此更正。

本刊編輯部

(收稿日期：2015-10-11)

中圖分類號：R737.1

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)01-0042-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.01.015

通信作者：孔朝輝(E-mail：249813503@qq.com)

基金項目：河南省科技攻關(guān)計劃項目(112102310232)。