張靜文，岳朝陽，焦淑萍，劉愛華

(新疆林業(yè)科學(xué)院森林生態(tài)研究所，新疆 烏魯木齊 830000)

8種殺菌劑對(duì)新疆棗縮果病病原菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

張靜文，岳朝陽，焦淑萍，劉愛華

(新疆林業(yè)科學(xué)院森林生態(tài)研究所，新疆 烏魯木齊 830000)

運(yùn)用菌落生長(zhǎng)法比較8種殺菌劑單用及混合使用對(duì)4株棗縮果病病原菌的室內(nèi)毒力，為田間有效防治新疆棗縮果病提供理論依據(jù)。結(jié)果表明：8種供試藥劑使用對(duì)4株病原菌的抑制效果有一定差異，其中400 g/L氟硅唑乳油和50 %喹啉銅可濕性粉劑對(duì)4株病原菌有明顯的毒力作用，且其EC50值分別為0.47～0.56、1.24～1.63 mg/L。等量混用50 %多菌靈可濕性粉劑+80 %代森錳鋅可濕性粉劑對(duì)4株病原菌的毒力有增效作用，而75 %百菌清可濕性粉劑+70 %甲基托布津可濕性粉劑組合對(duì)病原菌的毒力則表現(xiàn)為拮抗作用。

棗縮果病；殺真菌劑；EC50；共毒系數(shù)

棗樹對(duì)土壤的適應(yīng)性較強(qiáng)，新疆宜林荒地面積又很大，發(fā)展棗樹能夠充分利用這些土地資源。截至2013年底，新疆紅棗種植面積已超過40萬公頃，占全國(guó)總面積的近三分之一，盛果期產(chǎn)量將占到全國(guó)總產(chǎn)量的50 %以上,紅棗產(chǎn)業(yè)已成為新疆南疆果農(nóng)致富增收的支柱產(chǎn)業(yè)。棗縮果病(Jujube shrink disease)是普遍發(fā)生于各大棗區(qū)的果實(shí)病害，造成棗果大面積脫落，減產(chǎn)30%～50%[1-3]?？s果病的發(fā)生與品種、氣候、土壤等諸多因素有關(guān)。隨著栽培時(shí)間的延長(zhǎng)，棗縮果病的發(fā)生呈現(xiàn)逐年加重的趨勢(shì)[4]。

自2009年棗縮果病在新疆各紅棗產(chǎn)區(qū)為害有逐年加重的趨勢(shì)，2010年通過對(duì)新疆巴州的和碩縣、若羌縣，阿克蘇地區(qū)溫宿縣、阿克蘇市，吐魯番地區(qū)吐魯番市，喀什地區(qū)伽師縣、莎車縣、葉城縣，和田地區(qū)于田縣、和田市等共計(jì)10余個(gè)棗業(yè)發(fā)展較好的縣市的部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)，采用隨機(jī)抽樣的方法對(duì)棗縮果病發(fā)生情況進(jìn)行調(diào)查，平均病果率為10.43 %。采集病果通過科赫氏法則確定了病原菌為鏈格孢(Alternariasp.)。采用菌落生長(zhǎng)法對(duì)常用的8種殺菌劑進(jìn)行了單劑和混合藥劑室內(nèi)藥效篩選，為田間防治該病害提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試菌株 紅棗縮果病病原菌(Alternariasp.)菌株A18、A19a、A20b、HT5由林科院森林生態(tài)所森保中心病理實(shí)驗(yàn)室分離保存。A18采自阿克蘇地區(qū)溫宿縣，A19a采自阿克蘇地區(qū)扎木臺(tái)，A20b采自和田地區(qū)墨玉縣，HT5采自吐魯番地區(qū)吐魯番市。

1.1.2 供試病原菌株的活化 挑取保存在PDA斜面內(nèi)的病原菌，置于PDA平板上，恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)25 ℃培養(yǎng)7 d，用直徑為6 mm的打孔器在菌落外圍打取生長(zhǎng)一致的菌餅用于菌落生長(zhǎng)法毒力測(cè)定試驗(yàn)[5-6]。

1.1.3 供試藥劑 75 %百菌清可濕性粉劑(英國(guó)茵特生物科技有限公司)，80 %代森錳鋅可濕性粉劑(河北石家莊市伊諾生化有限公司)，70 %甲基硫菌靈可濕性粉劑(重慶化學(xué)工業(yè)公司)，70 %甲基托布津可濕性粉劑(江蘇龍燈化學(xué)有限公司)，50 %多菌靈可濕性粉劑(蘇州遍凈植?？萍加邢薰?，50 % 喹啉銅可濕性粉劑(浙江海正化工股份有限公司)，400 g/L氟硅唑乳油(陜西恒潤(rùn)化學(xué)工業(yè)有限公司)，430 g/L戊唑醇乳油(陜西省亞錦集團(tuán)有限公司)。

1.2 試驗(yàn)方法

分別將各種單用或配對(duì)等量混用的殺菌劑用無菌水稀釋成母液，將滅菌的PDA培養(yǎng)基冷卻到55 ℃，根據(jù)不同濃度所需劑量，用移液槍將母液移入培養(yǎng)基中充分搖勻，倒入滅菌培養(yǎng)皿制成含藥平板。每種藥劑每個(gè)質(zhì)量濃度設(shè)置3次重復(fù)，以加無菌水的PDA培養(yǎng)基作空白對(duì)照。用直徑為6 mm的打孔器打取生長(zhǎng)一致的菌餅，置于含藥平板中央，恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)25 ℃培養(yǎng)，7 d后采用十字交叉法測(cè)量每個(gè)處理的菌落直徑，計(jì)算抑菌率。

將抑菌率換成機(jī)率值，質(zhì)量濃度轉(zhuǎn)換成質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)。以質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)為自變量x，以機(jī)率值為變量y，并通過求出質(zhì)量濃度與抑菌率間回歸系數(shù)b，相關(guān)系數(shù)r和常數(shù)項(xiàng)a，建立毒力回歸方程y=a+bx[7-8]，算出單劑和混合藥劑的抑制中濃度EC50。比較分析不同殺菌劑和混合藥劑對(duì)供試病原菌株的抑菌效果。

1.3 計(jì)算方法

1.3.1 抑制中濃度EC50的計(jì)算[9]以ln(濃度) 為自變量(x), 抑制百分率機(jī)率值為因變量用最小二乘法進(jìn)行直線回歸，得到回歸方程，通過回歸方程算出抑制中濃度(EC50)。

抑制百分率(%)=

1.3.2 毒力指數(shù)的計(jì)算[10-11]根據(jù)孫云沛(1950)提出的方法，選定試驗(yàn)中的一種農(nóng)藥為標(biāo)準(zhǔn),計(jì)算出其余農(nóng)藥單用或混用的毒力指數(shù)(設(shè)其標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥的毒力指數(shù)為100 ，毒力指數(shù)越大毒力越強(qiáng)，反之亦然。

1.3.3 混劑共毒系數(shù)的計(jì)算

混劑理論毒力指數(shù)=∑混劑中單劑量的毒力指數(shù)×單劑在混劑中含量的百分率

共毒系數(shù)>100 為增效作用；等于100為相加作用；<100為領(lǐng)頑作用。

2 結(jié)果與分析

2.1 單劑藥劑對(duì)病原菌絲生長(zhǎng)的影響

從表1可以看出，8種供試藥劑對(duì)棗縮果病病原菌的抑制效果有一定差異。在測(cè)試濃度下氟硅唑、喹啉銅、代森錳鋅、戊唑醇對(duì)病原菌有明顯的抑制作用， 其中氟硅唑的EC50值小于1 mg/L、喹啉銅的EC50值均小于2 mg/L；代森錳鋅和戊唑醇的EC50值均小于100 mg/L。百菌清、多菌靈、甲基硫菌靈、甲基托布津的EC50值均大于100 mg/L。

表1 供試藥劑對(duì)棗縮果病菌菌絲生長(zhǎng)的影響

續(xù)表1 Continued table 1

藥劑Fungicide名稱制劑用量(mg/L)Uselevel抑菌率(%)Inhibitionrate毒力回歸方程(y=)Toxicregressionequation相關(guān)系數(shù)Correlationcoefficient抑制中濃度(mg/L)EC50A18A19aA20bHT5A18A19aA20bHT5A18A19aA20bHT5A18A19aA20bHT58041.8041.4741.9341.3714052.2352.2352.9350.9320056.1359.4759.2758.1026062.7062.3761.6361.87標(biāo)準(zhǔn)差14.7812.3011.8812.93甲基硫菌靈5020.5317.5717.6725.430.245x+9.1960.194x+7.490.248x+4.590.235x+13.510.9930.9970.9940.992166.64217.86183.71155.3910036.1026.0730.0038.1715046.0337.7741.5747.8020055.2745.2350.5758.3325072.4056.5769.5074.10標(biāo)準(zhǔn)差19.5615.3919.7818.65甲基托布津20020.7321.7318.8722.400.123x+3.20.127x+4.140.116x+2.180.131x+4.0260.990.9930.9650.995422.77417.98440.17406.0225027.5326.9329.0329.9730035.4034.3733.8734.1735040.6341.8038.2341.5740045.3346.2743.3049.57標(biāo)準(zhǔn)差9.9010.159.3410.47多菌靈10033.4330.4335.2032.370.099x+25.980.117x+22.630.084x+28.110.124x+21.320.9630.9450.9700.985240.99234.02258.47231.2915043.5744.5342.9342.3020046.2746.7043.8744.6725052.4353.2050.8053.7030053.9355.3752.4357.70標(biāo)準(zhǔn)差8.199.816.909.97喹啉銅1.040.5737.4336.2043.670.525x+4.440.829x+10.10.747x+9.9730.680x+20.490.9950.9960.9890.9961.431.531.631.241.551.1347.7044.9358.73264.6762.9359.2071.072.574.4772.2068.8382.233.091.4090.1785.4393.63標(biāo)準(zhǔn)差19.8420.6619.4519.55氟硅唑0.444.0343.8040.4348.770.38x+20.930.306x+20.60.866x+20.440.505x+27.140.9860.9840.9950.9940.560.560.610.470.650.6750.7350.0056.500.860.4760.5757.6066.431.074.5775.8769.5377.031.284.4784.3079.3389.00標(biāo)準(zhǔn)差16.6816.9115.4216.02戊唑醇1035.9335.9335.9340.531.556x+22.761.416x+24.711.388x+23.661.187x+32.060.9710.9670.9210.95317.4717.8418.9715.001548.4047.5341.7352.502056.0055.3759.6757.702560.2362.5756.5364.973068.9363.8363.2364.60標(biāo)準(zhǔn)差12.4911.5711.9110.11

2.2 共毒系數(shù)的比較

從表2～5可以看出，對(duì)4種菌株具有較強(qiáng)增效作用的混劑為多菌靈+代森錳鋅，其共毒系數(shù)最高，其次為多菌靈+甲基硫菌靈。百菌清+甲基托布津共毒系數(shù)小于100，說明混劑有拮抗作用。多菌靈+代森錳鋅對(duì)于4株菌株的增效作用不同，對(duì)A18的毒力指數(shù)最高，對(duì)A19a的毒力指數(shù)最低。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)采用菌落生長(zhǎng)速率抑制法對(duì)8 種常見殺菌劑進(jìn)行抑菌篩選，初步得到了能夠明顯抑制棗縮果病病原菌的4種藥劑：氟硅唑、喹啉銅、多菌靈+代森錳鋅，2種單劑和1種混劑對(duì)4株病原菌菌絲生長(zhǎng)抑制效果均較好；其次為代森錳鋅和戊唑醇；最差的百菌清和甲基托布津，百菌清+甲基托布津混劑有拮抗作用，混用后毒力下降。嚴(yán)清平等對(duì)5種鏈格孢屬植物病菌室內(nèi)殺菌劑的敏感性的比較顯示喹啉銅抑菌活性較好[12]，本試驗(yàn)中喹啉銅也表現(xiàn)出較好的抑菌效果。國(guó)內(nèi)有報(bào)道指出，運(yùn)用代森錳鋅來防治鏈鉻孢菌，并取得了非常好的效果，目前已被廣泛用于防治鏈鉻孢菌引起的多種植物病害[13]；王坦等報(bào)道將代森錳鋅與其它藥劑混配可提高對(duì)A.Alternata的防治效果[14]。本試驗(yàn)中多菌靈+代森錳鋅，其共毒系數(shù)最高，能有效的抑制棗縮果病病原菌的生長(zhǎng)。

表2 A18菌株混合菌劑毒力測(cè)定

表3 A19a菌株混合菌劑毒力測(cè)定

表4 A20b菌株混合菌劑毒力測(cè)定

表5 HT5菌株混合菌劑毒力測(cè)定

供試藥劑低毒、高效、低殘留，使用安全，室內(nèi)殺菌劑毒力測(cè)定效果雖然能看出各種藥劑對(duì)各菌菌絲生長(zhǎng)抑制的作用，因?yàn)楹芏嘁蛩氐挠绊?，室?nèi)毒力測(cè)定只是為紅棗縮果病的防治提供了一項(xiàng)客觀的參考指標(biāo)，還需進(jìn)一步的田間防治效果來進(jìn)行驗(yàn)證。

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(責(zé)任編輯 陳 虹)

Toxicity Test of Eight Kinds of Fungicides toAlternariasp.in Xinjiang

ZHANG Jing-wen, YUE Chao-yang, JIAO Shu-ping, LIU A-hua

(Institute of Forest Ecosystem, Xinjiang Academy of Forestry Sciences,Xinjiang Urumqi 830000, China)

Using mycelium growth method, the comparisons of the toxicities of 8 fungicides by alone or mixed with an equal amount toAlternariasp.were studied to provide a theoretical basis for controlling the jujube shrink disease in Xinjiang. The results showed that the inhibitory effect of eight kinds of drug used for the test on four pathogens had some diffferences, of which there were significantly effective on the virulence of 4 pathogens by the treatment of flusilazole 400 g/L EC and oxine-copper 50 % WP, and theirEC50values were 0.47-0.56, 1.24-1.63 mg/L. The toxicity for 4 pathogens by balanced mix 50 % carbendazim WP + 80 % mancozeb WP was obviously enhanced. However, the toxicity for 4 pathogens by balanced mix 75 % chlorothalonil WP + 70 % thiophanate-methyl WP was declined.

Jujube shrink disease(Alternariasp.)；Fungicide；EC50；Simplified drawing

1001-4829(2016)10-2392-05

10.16213/j.cnki.scjas.2016.10.026

2015-11-11

自治區(qū)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金項(xiàng)目“殺菌劑對(duì)不同棗產(chǎn)區(qū)棗縮果病菌毒力測(cè)定”；新疆維吾爾自治區(qū)科技重大專項(xiàng)(201130102-3)；新疆維吾爾自治區(qū)科技計(jì)劃國(guó)際合作項(xiàng)目(20126003)

張靜文(1983-)，女，新疆五家渠人，助理研究員，研究方向：森林病理學(xué)，E-mail:zjia1116@126.com。

S436.6

A