閆 婕，衛(wèi)瑩芳，龍 飛，林 波，康 敏

（成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 四川省中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室——省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地 成都 610075）

馬爾康柴胡不同藥用部位解熱、保肝作用與急性毒性研究＊

閆 婕，衛(wèi)瑩芳＊＊，龍 飛，林 波，康 敏

（成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 四川省中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室——省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地 成都 610075）

目的：本研究旨在為川產(chǎn)“竹葉柴胡”臨床用藥的安全性和有效性提供科學(xué)依據(jù)，為科學(xué)評價(jià)柴胡屬其它植物藥用價(jià)值及資源的開發(fā)和利用奠定基礎(chǔ)。方法：研究采用酵母致熱法引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)熱，測定大鼠直腸溫度。采用四氯化碳（CCl4）法制備肝損傷模型。采用試劑盒測定小鼠血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、丙二醛（MDA）含量和肝組織中谷胱甘肽（GSH）含量，結(jié)合HE染色病理組織切片鏡檢及評分分析，對馬爾康柴胡地上部分和根部進(jìn)行解熱保肝藥理作用的研究。采用最大給藥量試驗(yàn)進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)。結(jié)果：解熱試驗(yàn)中，與模型組比較，地上部分高、低劑量及地下部分高劑量組造模后2 h肛溫明顯降低，地上部分高劑量組在造模后4 h出現(xiàn)肛溫降低。保肝實(shí)驗(yàn)中，與模型組相比，馬爾康柴胡根及地上部分水提液可降低肝損傷小鼠血清GOT、GPT、MDA水平，提高肝組織GSH水平；結(jié)合病理學(xué)觀察，給藥后第2天肝損傷明顯，至給藥后第6天和第14天，肝損傷程度與對照組相比無明顯差異。最大劑量給藥時(shí)呈現(xiàn)一定程度可逆性肝臟急性毒性。結(jié)論：馬爾康柴胡根部和地上入藥部分具有與柴胡一致的解熱、保肝作用，具有藥用價(jià)值；其“量-效-毒”關(guān)系還需深入研究。

馬爾康柴胡 竹葉柴胡 解熱 保肝 急性毒性

柴胡是大宗、常用中藥材，除《中國藥典》2015年版收載“柴胡Bupleunum chinense DC.和狹葉柴胡B. scorzonerifolium Willd.的干燥根”外[1]，全國尚有20多種柴胡屬植物在不同地區(qū)作為地區(qū)習(xí)用品入藥[2]?！端拇ㄊ≈兴幉臉?biāo)準(zhǔn)》2010年版首次將地區(qū)習(xí)用品“柴胡”更名為“竹葉柴胡”，來源為竹葉柴胡B. marginatum Wall.ex DC.、馬尾柴胡B. microcephalum Diels.或馬爾康柴胡B. malconense Shan et Y. Li的干燥全草[3]。

馬爾康柴胡為野生品、資源豐富、療效確切、價(jià)格低廉、使用廣泛，但其物質(zhì)基礎(chǔ)和藥理作用研究較少。課題組前期對馬爾康柴胡不同藥用部位藥效物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行研究[4-6]，表明根主要含柴胡皂苷，地上部分主要含黃酮類成分，皂苷含量甚微。本文對其根和地上部分解熱、保肝藥效及安全性進(jìn)行研究，為西南地區(qū)習(xí)用品“竹葉柴胡”臨床用藥的安全性和有效性提供科學(xué)依據(jù)，為科學(xué)評價(jià)柴胡屬其它植物藥用價(jià)值及資源的開發(fā)和利用奠定基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 藥材

實(shí)驗(yàn)藥材采自四川省汶川縣，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)衛(wèi)瑩芳教授鑒定為馬爾康柴胡B. malconense Shan et Y. Li的干燥地上部分與根。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

清潔級SD大鼠，雌雄各半，體質(zhì)量200-220 g；清潔級昆明種小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量18-20 g。均購自由成都達(dá)碩生物科技有限公司，許可證號：SCXK（川）2008-24。

1.3 實(shí)驗(yàn)試劑

高活性干酵母（伊犁安琪酵母股份有限公司，批號：CL20140118），聯(lián)苯雙酯滴丸（臺(tái)州浙江萬邦藥業(yè)股份有限公司，批號：AO2130139），4%多聚甲醛組織標(biāo)本固定液（成都科龍化工試劑廠生產(chǎn)，批號：20130415）、乙醇（成都科龍化工試劑廠生產(chǎn)，批號：20130714）、二甲苯（成都科龍化工試劑廠生產(chǎn)，批號：20130318）、蘇木素染液（北京百靈威科技有限公司生產(chǎn)，批號：LM10N13）、伊紅染液（東京化成工業(yè)株式會(huì)社生產(chǎn)，批號：GL01-GMPC）、鹽酸-乙醇分化液（成都市科龍化工試劑廠生產(chǎn)，批號：20130418）、中性樹膠（上海懿洋儀器有限公司，批號：20130118）。試劑盒：GPT/GOT試劑盒（長春匯力生物技術(shù)有限公司，批號：2013034/2013018），MDA/GSH試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：20131016/20131017）。

1.4 儀器

電子肛溫計(jì)（大連歐姆龍健康醫(yī)療中國有限公司，型號：MC-246）、多功能酶標(biāo)儀（美國Thermo公司，型號：Multiskan MK3型）、超低溫冰箱（日本Sanyo公司，型號：MDF-U50V）、高速離心機(jī)（德國Heraeus公司，型號：Biofuge pico）、微型漩渦混合儀（上海瀘西分析儀器廠有限公司，型號：WH-3）、轉(zhuǎn)輪式切片機(jī)（德國Leica公司，型號：徠卡-2016）、全自動(dòng)封閉式組織脫水機(jī)/包埋機(jī)/病理組織漂烘儀（常州市中威電子儀器有限公司，型號：TSJ-Ⅱ、BMJ-Ⅲ、PHY-Ⅲ）、數(shù)碼三目攝像顯微鏡（廈門麥克奧迪實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司，型號：BA-400 Digital）等、圖像分析軟件Motic Images Advanced3.2工作站。

2 方法

藥液的制備：取藥材粉末適量，裝于圓底燒瓶，依次加入10、8倍量水回流提取2次，每次1 h。濾過，合并濾液濃縮至相應(yīng)體積，得到一定濃度（生藥g·mL-1）的水煎液。用此方法分別制備實(shí)驗(yàn)“2.1”至“2.3”中不同部位不同劑量的藥液。

2.1 采用酵母致熱法進(jìn)行大鼠解熱實(shí)驗(yàn)

將大鼠置于實(shí)驗(yàn)環(huán)境中，在固定時(shí)間將測定探頭插入大鼠直腸，每日兩次讀取測量值，使大鼠適應(yīng)肛溫測定的刺激。測量2天后，選取肛溫在正常范圍（36.6-37.8℃），溫差不超過0.5℃的合格大鼠60只，按體質(zhì)量隨機(jī)分為6組：對照組、模型組、馬爾康柴胡地下部分（bm-X）高、低劑量組，馬爾康柴胡地上部分（bm-S）的高、低劑量組，每組10只。給藥組按0.5 mL/100 g給予灌胃治療，連續(xù)灌胃3天；空白組和模型組給予相同體積的蒸餾水，早晚各測定記錄肛溫一次。第4天禁食不禁水過夜，灌胃前1、0.5 h分別測肛溫一次，灌胃給藥后立即從背部皮下注射15%安琪高活性干酵母混懸液5.0 mL·kg-1，并連續(xù)測量造模后1 h、2 h、4 h、6 h肛溫，記錄肛溫曲線。

2.2 建立急性肝損傷模型

取小鼠90只，隨機(jī)分為9組，每組10只。設(shè)空對照組、模型組、陽性藥對照組（聯(lián)苯雙酯滴丸）、bm-X和bm-S的高、中、低劑量組。分別對各組小鼠灌胃給藥或給予同體積水，灌胃劑量0.2 ml·10 g-1，每天1次，連續(xù)給藥7天。第7天給藥后開始禁食，2 h后開始造模。造模方法∶ 除對照組外, 模型組和各給藥組腹腔注射0.2% CCl4橄欖油溶液，注射劑量0.1 ml·10g-1。

2.3 保肝作用相關(guān)指標(biāo)檢測

造模16 h后摘眼球取血，收集血液至2 mL離心管內(nèi)，37℃水浴，以3 500 r·min-1的轉(zhuǎn)速分離血清。取血后迅速頸椎脫臼處死小鼠，隨即剪取肝臟小葉約0.3-0.4 g，精密稱重，使用玻璃勻漿器手動(dòng)勻漿。血清及勻漿液均置于-80℃超低溫冰箱中保存，同時(shí)剪取肝臟大葉置于4%多聚甲醛固定液中。按照試劑盒使用說明，測定血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶（Glutamic-Oxaloacetic Transaminase，GOT）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Glutamic-Pyruvic Transaminase，GPT）、丙二醛（Malonaldehyde，MDA），測定肝組織勻漿中谷胱甘肽（Glutathione，GSH）數(shù)值。每組隨機(jī)選取8只小鼠的肝組織作HE染色的病理組織切片，鏡檢，分標(biāo)本拍照并依照肝組織病理損傷程度（共分4級）進(jìn)行評分分析。

2.4 采用最大給藥量試驗(yàn)進(jìn)行小鼠急性毒性

每組小鼠6只，按照7.5、15.0、45.0、75.0、120.0 g·kg-1劑量給藥（相當(dāng)于50、100、300、500、800倍成人日用劑量），觀察48 h，沒有小鼠死亡，無法計(jì)算半數(shù)致死量LD50，故按照最大給藥量方法進(jìn)行試驗(yàn)。

取90只小鼠，隨機(jī)分為3組，即對照組、bm-X組和bm-S給藥組，每組30只。實(shí)驗(yàn)前禁食不進(jìn)水過夜，給藥組分別按3.3、3.8 g·mL-1的劑量（即成人劑量的1 525倍、1 336倍），給予馬爾康柴胡根及地上部分水提取液灌胃治療，24 h內(nèi)灌胃3次，對照組給予等體積的蒸餾水。給藥后15、30 min和1、1.5、2、3、4、6、8、12、16、24 h觀察和記錄小鼠自主活動(dòng)，連續(xù)觀察14天。分別于第2天、第6天、第14天，每組處死10只小鼠，按照“2.3”項(xiàng)下的方法采集血樣及肝組織樣本，計(jì)算肝體比、測定生化指標(biāo)、觀察肝臟病理組織切片。

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS Statistics 15.0分析軟件，對各組肛溫及生化指標(biāo)數(shù)值進(jìn)行單因素方差分析，組間兩兩比較，若方差齊則采用LSD-t檢驗(yàn)，若方差不齊采用Tamhane's T2法；病理組織切片鏡檢評分針對炎性侵潤、脂肪變性、壞死、纖維化4個(gè)維度進(jìn)行加權(quán)個(gè)案分析后，采用非參數(shù)檢驗(yàn)Mann-Whitney U法。P＜0.05認(rèn)為組間差異有顯著性差異，P＜0.01認(rèn)為差異有極顯著差異。

3 結(jié)果

3.1 馬爾康柴胡對發(fā)熱大鼠肛溫的影響

與對照組相比，造模后2 h至6 h模型組肛溫明顯升高（P＜0.01）。與模型組相比，造模后2 h馬爾康柴胡地上部分高劑量組肛溫明顯降低（P＜0.01），馬爾康柴胡地上部分低劑量組、地下部分高劑量組肛溫明顯升高（P＜0.05）。造模后4 h，與模型組相比，馬爾康柴胡地上部分高劑量組明顯降低（P＜0.05）。造模后6 h，給藥各組與模型組相比肛溫?zé)o明顯差異。詳見表1。

3.2 馬爾康柴胡對急性肝損傷小鼠保肝功能的影響

3.2.1 生化指標(biāo)測試結(jié)果

與對照組相比，模型組小鼠血清GOT、GPT、MDA水平明顯升高（P＜0.01）；與模型組相比，馬爾康柴胡地上部分高劑量組和根部高劑量小鼠血清GOT、GPT、MDA水平明顯降低，肝組織GSH水平明顯升高（P＜0.05）。詳見表2。

表1 對大鼠肛溫的影響（±s，n=10）

表1 對大鼠肛溫的影響（±s，n=10）

注：與對照組相比，**P＜0.01；與模型組相比，#P＜0.05，##P＜0.01。

肛溫/℃基礎(chǔ)體溫造模后1 h造模后2 h造模后4 h造模后6 h對照組-37.43±0.25 37.45±0.26 37.42±0.24 37.43±0.21 37.45±0.28模型組-37.42±0.31 37.96±0.28 38.92±0.30**39.37±0.29**39.54±0.32**bm-X高劑量組2.50 37.41±0.27 37.74±0.25 38.19±0.29#39.12±0.25 39.41±0.25 bm-X低劑量組0.80 37.43±0.25 37.83±0.23 38.66±0.25 39.21±0.28 39.50±0.31 bm-S高劑量組2.50 37.42±0.30 37.52±0.27 37.87±0.26##38.42±0.30#39.16±0.33 bm-S低劑量組0.80 37.43±0.23 37.70±0.34 38.20±0.20#38.98±0.28 39.34±0.27組別劑量/g·kg-1

表2 馬爾康柴胡對小鼠血清GOT、GPT、MDA和肝組織GSH的影響（±s，n=10）

表2 馬爾康柴胡對小鼠血清GOT、GPT、MDA和肝組織GSH的影響（±s，n=10）

注：與對照組相比，**P＜0.01；與模型組相比，#P＜0.05，##P＜0.01；與陽性對照組相比，△P＜0.05，△△P＜0.01。

組別劑量/g·kg-1GOT/mmol·L-1GPT/mmol·L-1MDA/nmol·ml-1GSH/mgGSH·gprot-1對照組-2.092±0.191 1.633±0.190 7.885±2.556 0.338±0.129模型組-3.579±0.369**7.749±0.639**10.880±3.714**0.230±0.181陽性對照組11.670 mg·kg-12.192±0.524##4.761±0.488## 8.363±3.399#0.617±0.335#bm-X高劑量組4.500 2.822±0.448#5.604±0.202## 7.586±2.229##1.132±0.193##△△bm-X中劑量組3.000 2.941±0.678 6.432±0.351#△ 9.290±3.174 0.894±0.432##△bm-X低劑量組1.500 3.174±0.419△7.042±0.293△△ 9.838±2.059△0.876±0.140##△bm-S高劑量組4.500 2.818±0.360#5.897±0.207## 8.075±1.274#0.831±0.271##bm-S中劑量組3.000 3.015±0.664 6.343±0.312#△10.143±1.996△0.716±0.314##bm-S低劑量組1.500 3.206±0.388△6.983±0.427△△10.758±2.711△△0.568±0.233#

3.2.2 馬爾康柴胡對急性肝損傷小鼠肝組織結(jié)構(gòu)的影響

肝組織病理切片鏡檢可見，與對照組比較，模型組可見明顯的肝細(xì)胞碎片狀、灶狀及大片溶解灶性壞死；肝細(xì)胞明顯腫脹，水腫變性，炎細(xì)胞浸潤，肝細(xì)胞細(xì)胞間界限不清，胞漿淡染，有的甚至可見細(xì)胞氣球樣變，胞漿變得較為透明，肝竇擴(kuò)張充血。壞死區(qū)域主要位于小葉周邊，提示是藥物引起的肝小葉橋接壞死，判定CCl4肝損傷模型造模成功。給藥組顯示肝細(xì)胞損傷情況與模型組一致，但與模型組相比，給藥組小鼠肝細(xì)胞壞死及水腫變性程度都較輕，肝細(xì)胞呈點(diǎn)狀、碎片狀壞死，未見大片溶解性壞死；肝細(xì)胞水腫、炎細(xì)胞浸潤，體積略增大，細(xì)胞間尚有界限，胞漿淡染。詳見圖1。

采用光鏡觀察的評分記錄進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，與模型組相比，馬爾康柴胡地下部分高劑量組和馬爾康柴胡地上部分高劑量組肝組織病理學(xué)分值明顯降低（P＜0.01），馬爾康柴胡地上部分與根均能有效抑制CCl4引起的細(xì)胞水腫變性和肝細(xì)胞壞死，具有抗CCl4肝損傷的作用，與生化指標(biāo)測試的結(jié)果一致。

3.3 急性毒性試驗(yàn)

圖1 馬爾康柴胡對肝損傷小鼠肝組織結(jié)構(gòu)的影響（HE染色，×100）

表3 急性毒性試驗(yàn)測試指標(biāo)

小鼠首次大劑量給藥15 min后，自主活動(dòng)減少，給藥4 h后出現(xiàn)腹瀉、稀便；給藥36 h自主活動(dòng)逐漸恢復(fù)，腹瀉癥狀好轉(zhuǎn)；給藥第2天，給藥組肝體比值升高，馬爾康柴胡根部給藥組GOT與GPT水平明顯升高（P＜0.05）；給藥第6天與對照組比較未見明顯差異（表3）。病理組織切片鏡檢可見，給藥組的肝臟病理改變主要為肝細(xì)胞水腫變性，未見肝細(xì)胞壞死和肝臟纖維化增生。與對照組相比，給藥組小鼠在給藥第2天可見肝細(xì)胞輕度腫脹、體積增大，炎細(xì)胞侵潤，細(xì)胞間尚有界限，胞漿淡染，地上部分給藥組還可見輕微脂肪性病變；給藥后第6天和第14天，給藥組與空白組未見明顯差異（詳見圖2）。以上急性毒性試驗(yàn)結(jié)果提示最大劑量馬爾康柴胡不同部位水提取液灌胃具有一定程度的肝臟急性毒性，停藥后1周左右可恢復(fù)正常。

圖2 肝損傷小鼠急性毒性試驗(yàn)肝臟組織病理學(xué)觀察（HE染色，×100）

4 討論

干酵母致熱為常用動(dòng)物發(fā)熱模型，致熱原理是由注射部位的局部潰爛引發(fā)的劇烈炎癥反應(yīng)導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)熱，適用于考察清熱藥的解熱作用[7,8]。馬爾康柴胡地上部分及根部提取物均可明顯降低干酵母導(dǎo)致的大鼠體溫升高，具有一定解熱作用，其作用機(jī)制可能與抑制炎癥反應(yīng)有關(guān)。

CCl4所致肝損傷模型是藥物性肝損傷的經(jīng)典模型，其代謝過程中產(chǎn)生的自由基，可引起細(xì)胞膜和細(xì)胞器膜的不飽和脂肪酸過氧化，從而改變膜的流動(dòng)性和通透性，導(dǎo)致細(xì)胞死亡[9,10]。GOT、GPT是反映肝功能受損的常用指標(biāo)，MDA反應(yīng)機(jī)體脂質(zhì)過氧化的程度，可間接反映細(xì)胞損傷的程度；GSH可消除人體自由基，提高免疫力，是衡量機(jī)體抗氧化能力的重要指標(biāo)[11,12]。馬爾康柴胡地上部分與根部提取物能降低肝損傷后血清GOT、GTP、MDA水平，增加肝組織GSH水平；提示馬爾康柴胡不同部位水提取液對CCl4致小鼠肝損傷具有保護(hù)作用，病理組織切片進(jìn)一步驗(yàn)證了該結(jié)果。其保肝機(jī)制可能與提高機(jī)體清除自由基能力與抗脂質(zhì)過氧化能力有關(guān)。

最大劑量給藥時(shí)有一定程度可逆的肝臟急性毒性，后期應(yīng)對馬爾康柴胡的長期毒性、安全劑量及“量-效-毒”關(guān)系進(jìn)行深入研究[13,14]。

5 小結(jié)

馬爾康柴胡全草入藥，藥用部位及物質(zhì)基礎(chǔ)均與藥典所述品種不同，本研究對根部與地上部分分別進(jìn)行柴胡的傳統(tǒng)功效相關(guān)的藥理學(xué)研究，認(rèn)為不同部位均具有解熱、保肝作用，明確了四川地區(qū)習(xí)用品“竹葉柴胡”的藥用價(jià)值，為全草入藥的合理性提供科學(xué)依據(jù)，也為科學(xué)地評價(jià)柴胡屬其它植物藥用價(jià)值和西南地區(qū)柴胡資源的開發(fā)和利用奠定基礎(chǔ)[15]。

1 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(一部).北京:中國醫(yī)藥科技出版社, 2010: 263-264.

2 潘勝利,順慶生,柏巧明,等.中國藥用柴胡原色圖志.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社, 2002: 9.

3 四川省食品藥品監(jiān)督管理局.四川省中藥材標(biāo)準(zhǔn).成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社, 2010: 250-253.

4 馬逾英,衛(wèi)瑩芳,萬德光.川產(chǎn)柴胡地上部分的理化鑒定.成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 1999, 22(12): 30-31.

5 閆婕,衛(wèi)瑩芳,古銳,等. HPLC測定4種川產(chǎn)柴胡地上與地下部分柴胡皂苷a,c,d的含量.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2014, 20(13): 73-76.

6 閆婕,衛(wèi)瑩芳,古銳.應(yīng)用自動(dòng)質(zhì)譜退卷積定性系統(tǒng)(AMDIS)和保留指數(shù)分析馬爾康柴胡地上、地下部分與北柴胡揮發(fā)油的成分差異.中國中藥雜志, 2014, 39(6): 1048-1053.

7 劉學(xué)偉,曹敏,劉樹民.龍膽堿的解熱作用及機(jī)制研究.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2011, 17(24): 128-131.

8 陳健,常秀娟,陳春苗,等.熱毒寧注射液解熱鎮(zhèn)痛作用研究.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化, 2014, 16(9): 1912-1915.

9 林興,黃權(quán)芳,張士軍,等.山芝麻對CCl4誘導(dǎo)小鼠肝損傷的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的影響.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2010, 16(10): 147-149.

10 王憲齡,李偉,劉方洲,等.柴胡黃芩配伍對CCl4所致小鼠急性肝損傷的研究.中藥藥理與臨床, 2005, 21(6): 11-13.

11 閆冰,蔡秀江,姚衛(wèi)峰,等.二至丸保肝活性成分群對CCl4致小鼠急性肝損傷保護(hù)作用研究.中國中藥雜志, 2012, 37(9): 1303-1306.

12 李霞,門九章,梁銳,等.雄芍湯保肝降酶及抗氧化有效部位的研究.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化, 2014, 16(4): 774-779.

13 孫蓉,黃幼異,黃偉,等.基于能量代謝機(jī)制的柴胡總皂苷對小鼠肝毒性“量-時(shí)-毒”關(guān)系研究.中藥藥理與臨床, 2012, 28(4): 60-62.

14 黃偉,趙燕,孫蓉.基于柴胡皂苷類成分的保肝作用與肝毒性研究進(jìn)展.中國藥物警戒, 2011, 8(1): 38-41.

15 閆婕.馬爾康柴胡不同部位藥用價(jià)值評價(jià)研究.成都:成都中醫(yī)藥大學(xué)博士學(xué)位論文, 2014: 10-14.

Antipyretic and Hepatoprotective Effects and Acute Toxicity of the Roots and Acrial Part of Bupleunum Malconense

Yan Jie, Wei Yingfang, Long Fei, Lin Bo, Kang Min
(The Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine, Key Laboratory of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources in Sichuan Province--Key Laboratory Breeding Base of Co-Founded by Sichuan Province and MOST, Pharmacy College, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, China)

This study aimed to provide a scientific basis on the safety and efficacy of Bupleuri Herba in Sichuan for clinical use, and lay a fundation for its development and utilization and the evaluation of medicinal value of other plants belonging to Bupleuri. The febril rats were induced by yeast, and core temperature was tested. Hepatic injury model was established using CCl4injection. Enzyme standard instrument was used for detecting the indexes of liver function, including serum glutamic-oxaloacetic transaminase (GOT), glutamic-pyruvic transaminase (GPT) and malondialdehyde (MDA) and glutathione (GSH) from liver tissue. Combining with microscopic observation of liver tissue sections stained by HE staining and the related analysis, antipyretic and hepatoprotective effects of the roots and acrial part of B. malconense were explored. At last, acute toxicity test was also adopted. It was found that the core temperature of rats in the high- and low-dose B. malconense (acrial part) groups and in the high-dose B. malconense (roots) group significantly reduced 2 h after modeling, compared with the model group. 4 h after modeling, the core temperature of rats in the high-dose B. malconense (acrial part) group was also higher than that in the model group. Serum GOT, GPT and MDA levels and hepatic GSH level of hepatic injury rats increased, treated with water extracts of the roots and acrial parts of B. malconense. Morphologic observation showed that hepatic injury occurred on the 2ndday of administration, while the situation of hepatic injury presented undifferentiated compared with that in the control group on the 6thand 14thday of administration. In addition, there was a reversible liver acute toxicity in maximum doses. According to these results, it was demonstrated that the pharmacological effects of B. malconense was consistent with the traditional efficacy of Radix Bupleuri, presenting its medicinal value. However, its “dose-effect-toxicity” relationship still needs to be explored profoundly.

Bupleunum malconense, Bupleuri Herba, antipyresis, hepatoprotection, acute toxicity

10.11842/wst.2016.08.021

R285

A

（責(zé)任編輯：朱黎婷，責(zé)任譯審：朱黎婷）

2016-04-18

修回日期：2016-05-20

＊ 國家自然科學(xué)基金委青年科學(xué)基金項(xiàng)目（81503200）：基于肝細(xì)胞色素P450酶表達(dá)調(diào)控的竹葉柴胡“疏肝解郁”物質(zhì)基礎(chǔ)及機(jī)理研究，負(fù)責(zé)人：閆婕；成都中醫(yī)藥大學(xué)校級項(xiàng)目（030029056）：不同產(chǎn)地“竹葉柴胡”的品質(zhì)評價(jià)研究，負(fù)責(zé)人：閆婕。

＊＊ 通訊作者：衛(wèi)瑩芳，教授、博士生導(dǎo)師，主要研究方向：中藥品種、質(zhì)量及資源研究。