趙 強(qiáng) 宋 瀟

（黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院·150036）

自身抗體在系統(tǒng)性自身免疫疾病檢測(cè)中的應(yīng)用

趙 強(qiáng) 宋 瀟*

（黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院·150036）

自身抗體 系統(tǒng)性免疫疾病 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

1 系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）

SLE多發(fā)于生育年齡的女性，主要在18～45歲年齡段，男、女性比約為1:8，是一種病因尚未明確，累及多系統(tǒng)多器官的、具有多項(xiàng)自身抗體的自身免疫性疾病。疾病表現(xiàn)形式多樣性，極其容易誤診。當(dāng)患者以關(guān)節(jié)皮膚之外的癥狀就診時(shí)應(yīng)要引起足夠的重視。血清中出現(xiàn)以ANA為代表的多種自身抗體和多系統(tǒng)受累是SLE的兩個(gè)主要臨床特征。通過(guò)聯(lián)合檢測(cè)血清抗核抗體（ANA）、抗雙鏈DNA抗體、抗SM抗體、細(xì)胞核核糖核蛋白抗體、抗核小體抗體等抗體，增加臨床正確診斷。腎臟功能衰竭、感染中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷是死亡的主要因素。

1.1 抗雙鏈DNA抗體（dsDNA）

抗雙鏈DNA抗體對(duì)SLE有較高的特異性，且與SLE的活動(dòng)性，特別是狼瘡性腎炎的活動(dòng)密切相關(guān)。約有40%～75%的SLE患者抗雙鏈DNA抗體呈陽(yáng)性。

1.2 抗Sm抗體(Sm)

SM抗原出現(xiàn)在U族小分子細(xì)胞核糖核蛋白(UsnRNP)中，如U2、U4/U6和U5，在SLE特異性達(dá)98%，但敏感性較低，僅20%～30%?？筍m抗體的滴度可能與SLE的活動(dòng)有關(guān)，滴度升高可能預(yù)示著SLE的復(fù)發(fā)。

1.3 細(xì)胞核核糖核蛋白抗體（nRNP）

會(huì)議邀請(qǐng)了來(lái)自美國(guó)普渡大學(xué)教授Cliff Thomas Johnston、中國(guó)農(nóng)科院國(guó)家測(cè)土施肥中心實(shí)驗(yàn)室主任白由路、荷蘭瓦格寧根大學(xué)&研究中心教授Oene Oenema、全國(guó)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心首席專(zhuān)家高祥照、美國(guó)Agsource實(shí)驗(yàn)室代表Rob、ISO TC134第一工作組召集人劉剛、荷蘭瓦格寧根大學(xué)&研究中心教授Tomek de Ponti、荷蘭特賽爾島Hoeve Padang農(nóng)場(chǎng)第四代農(nóng)場(chǎng)主Sjoerd-Jan de Lugt等8位具有影響力的國(guó)內(nèi)外專(zhuān)家以及800多名經(jīng)銷(xiāo)商和種植大戶(hù)參會(huì)。

此復(fù)合物包括富含尿嘧啶核苷（U）的RNA及各種蛋白，如Sm蛋白、U1特異核糖核蛋白A、C和68×103蛋白，對(duì)SLE的診斷有一定意義，陽(yáng)性率45%～60%,抗Sm抗體和抗nRNP抗體常并存。被認(rèn)為是混合性結(jié)締組織疾病的診斷標(biāo)志。

1.4 抗核小體抗體

其抗原是核小體復(fù)合物，抗核小體抗體AnuA包含抗雙鏈DNA抗體和抗組蛋白抗體，在SLE的誘導(dǎo)和致病中有重要作用，為SLE的特異性抗體，陽(yáng)性率達(dá)82%～86%，特異性達(dá)98%。聯(lián)合檢測(cè)AnuA、抗雙鏈DNA抗體、抗Sm 抗體能有效提高SLE的實(shí)驗(yàn)診斷率。

1.5 抗核糖體P蛋白

抗核糖體P蛋白主要識(shí)別60S核糖體上3個(gè)磷蛋白亞單位P0、P1和P2，抗核糖體P蛋白抗體幾乎只對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）特異，為SLE的標(biāo)志性抗體。其與狼瘡腎炎相關(guān)很普遍，與無(wú)腎炎等狼瘡患者相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，抗核糖體P蛋白抗體滴度升高合并有抗ds-DNA抗體在有腎炎的患者中尤為顯著?？购颂求wP蛋白抗體的效價(jià)升高在SLE相關(guān)慢性活動(dòng)性肝炎中高度特異性，區(qū)別于抗平滑肌抗體陽(yáng)性，先天性慢性自身免疫活動(dòng)性肝炎。在其它自身免疫病患者中很少發(fā)現(xiàn)抗核糖體P蛋白抗體滴度的升高。該抗體對(duì)抗雙鏈DNA抗體或抗Sm抗體陰性的SLE患者診斷具有參考意義，并且與SLE的精神癥狀有關(guān)，在SLE的陽(yáng)性率約為20%～30 %。

1.6 抗增殖細(xì)胞核抗原抗體（PCNA）

由Miyachi等人在1978年在SLE患者的血清中首次發(fā)現(xiàn)并命名，可能與系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)生彌散性增殖性腎小球腎炎相關(guān)，其靶抗原為DNA聚合酶輔助蛋白，可能在控制細(xì)胞周期中起關(guān)鍵作用。增殖細(xì)胞核抗原是一種參與真核細(xì)胞DNA復(fù)制的蛋白質(zhì)，由3個(gè)相同亞基組成的環(huán)狀三聚體。以后的研究發(fā)現(xiàn)PCNA與細(xì)胞DNA合成關(guān)系密切，是SLE的高度特異性抗體，可作為SLE的標(biāo)志性抗體，其陽(yáng)性率為1%～5%。

2 干燥綜合征（SS）

是一個(gè)主要累及外分泌腺體的慢性炎癥性自身免疫病。由于其免疫性炎癥反應(yīng)主要表現(xiàn)在外分泌腺體的上皮細(xì)胞，故又名自身免疫性外分泌腺體上皮細(xì)胞炎或自身免疫性外分泌病。臨床除有唾液腺和淚腺受損功能下降而出現(xiàn)口干、眼干外，尚有其他外分泌腺及腺體外其他器官受累而出現(xiàn)多系統(tǒng)損害的癥狀。其血清中存在多種自身抗體和高免疫球蛋白。原發(fā)性干燥綜合征女性多見(jiàn)，男、女性比為1:9～1:20，在老年人群中患病率為3%～4%。

2.1 抗SSA抗體

見(jiàn)于原發(fā)性干燥綜合征、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫病。其靶抗原Ro/SSA是與4種富含尿嘧啶的核糖核酸(hy1、hy3、hy4、hy5)密切相關(guān)的核糖核酸蛋白?？筍SA/Ro抗體在干燥綜合征和SLE具有極高的特異性，尤其是抗Ro抗體與60×103Ro蛋白和52×103Ro蛋白的免疫反應(yīng)，分別用于辨別SLE和原發(fā)性干燥綜合征，抗Ro52抗體與抗Ro60抗體相比，對(duì)原發(fā)性干燥綜合征具有更高的特異性，超過(guò)60%的原發(fā)性干燥綜合征患者中可單獨(dú)檢測(cè)到Ro52自身抗體。

2.2 抗SS-B抗體

1969年Clark等首次報(bào)道了自SLE患者檢出自身抗體抗Ro，5年后相繼報(bào)道了抗La；1975年Alspaugh報(bào)道了干燥綜合征患者體內(nèi)可檢出抗SS-A和抗SS-B。1979年，兩個(gè)實(shí)驗(yàn)通過(guò)交換抗原和血清證實(shí)Ro就是SS-A，而La就是SS-B，SS-B/La幾乎僅見(jiàn)于干燥綜合征和SLE，在干燥綜合征中常與抗SS-A/Ro抗體同時(shí)出現(xiàn)。

3 多發(fā)性肌炎(PM)和皮肌炎(DM)

多發(fā)性肌炎是一組病因不清，主要臨床表現(xiàn)以對(duì)稱(chēng)性四肢近端、頸肌、咽部肌肉無(wú)力，肌肉壓痛，血清酶增高為特征的彌漫性肌肉炎癥性疾病。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為本病與自身免疫紊亂有關(guān)。也有部分學(xué)者認(rèn)為與病毒感染或遺傳因素有關(guān)。多為亞急性起病，任何年齡均可發(fā)病，中年以上多見(jiàn)，女性略多。部分病者病前有惡性腫瘤，約20%病者合并紅斑狼瘡、硬皮病、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、干燥綜合征等其他自身性疾病。由于受累范圍不同，伴發(fā)病差異較大，因而本病臨床表現(xiàn)多樣。通常本病在數(shù)周至數(shù)月內(nèi)達(dá)高峰，全身肌肉無(wú)力，嚴(yán)重者呼吸肌無(wú)力，危及生命。因此，及早診斷和治療十分重要。只要及時(shí)應(yīng)用激素或免疫抑制劑治療，單純多發(fā)性肌炎可望預(yù)后良好，伴發(fā)惡性腫瘤和多種結(jié)締組織病者，預(yù)后較差。

皮肌炎為一具有皮炎和肌炎的自身免疫性疾病，只有肌炎的病例稱(chēng)多發(fā)性肌炎。皮肌炎可單獨(dú)存在或與系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、類(lèi)風(fēng)濕等其他自身免疫性疾病重疊存在?；颊哐锌捎锌筆M-1、抗Jo-1，抗Mi-2等多種特殊抗體。40歲以上患者20～30%合并惡性腫瘤，用自身瘤體浸出液皮內(nèi)試驗(yàn)可呈陽(yáng)性反應(yīng)，治療或摘除腫瘤后，癥狀緩解，說(shuō)明自身瘤組織抗原參與了發(fā)病過(guò)程。

3.1 抗Jo-1抗體

1980年Nishikai等首次報(bào)道了在原發(fā)性多發(fā)性肌炎（PM）患者血清中發(fā)現(xiàn)了抗Jo-1抗體?？笿o-1抗體又稱(chēng)抗PL-1抗體，其靶抗原為組氨酰tRNA合成酶，是一種細(xì)胞質(zhì)磷酸蛋白，在胞質(zhì)中以小分子核糖核蛋白（scRNA）形式出現(xiàn)。此抗體在ANA抗體中較為獨(dú)特，位于胞漿?？笿o-1抗體尤其見(jiàn)于自發(fā)性炎性肌炎，其檢出率在原發(fā)性多肌炎（PM）為33%，原發(fā)性皮肌炎（DM）為25%，超過(guò)70%抗Jo-1抗體陽(yáng)性的患者出現(xiàn)纖維化肺泡炎，因此抗Jo-1抗體被認(rèn)為是肺病相關(guān)肌炎的標(biāo)志性抗體，常與合并肺間質(zhì)纖維化有關(guān)。

3.2 抗Mi-2抗體

1976年Reichlin和Mattioli首先在1例叫Mi的DM患者血清中，發(fā)現(xiàn)了一種與小牛胸腺細(xì)胞核鹽水提取物有沉淀反應(yīng)的新的抗核抗體，命名為抗Mi抗體，1980年Nishikai等將它們命名為抗Mi-1抗體和抗Mi-2抗體，其中抗Mi-2抗體屬肌炎特異性抗體，其靶抗原位于細(xì)胞核核質(zhì)內(nèi)，是相對(duì)分子質(zhì)量為(30～220)×103的5種蛋白質(zhì)代表，不含任何核酸成份，對(duì)肌炎的診斷具有重要意義，可以在10%～15%的急性皮肌炎患者中檢測(cè)到，診斷特異性大于96%。

3.3 抗PM-Scl抗體

1977年Wolfe等在PM/DM及肌炎與系統(tǒng)性硬化相重疊的患者血清中首先報(bào)道了抗PM-1抗體。此抗體因多見(jiàn)于PM 患者而得名，但后來(lái)研究發(fā)現(xiàn)該抗體更多見(jiàn)于PM 和硬皮病(Scl)相重疊的患者中，故又稱(chēng)為抗PM-Scl抗體。該抗體在多肌炎與硬化癥的重疊綜合征中的陽(yáng)性率為50%，也可僅出現(xiàn)在多肌炎患者中，陽(yáng)性率為8%，彌散性硬化癥中的陽(yáng)性率為2%～5%。

4 系統(tǒng)性硬化

是一種原因不明的臨床上以局限性或彌漫性皮膚增厚和纖維化為特征的結(jié)締組織病。除皮膚受累外，它也可影響內(nèi)臟（心、肺和消化道等器官）。本病作為一種自身免疫病，往往伴抗核抗體、抗著絲點(diǎn)抗體、抗Scl-70等自身抗體。本病相對(duì)較少見(jiàn)，尚無(wú)國(guó)人的確切患病率資料。本病女性多見(jiàn)，發(fā)病率約為男性的4倍，兒童相對(duì)少見(jiàn)。

4.1 抗著絲點(diǎn)抗體（CENP）

其抗原位于著絲點(diǎn)內(nèi)外層，但不包括DNA，其3個(gè)主要抗原為CENP-A蛋白(19 ×103)、CENP-B蛋白（80×103）和CENP-C蛋白（140×103），其中CENP-B抗原在診斷中起主要作用。主要出現(xiàn)在系統(tǒng)性硬化癥（PSS）中，尤其是CREST綜合征(系統(tǒng)性硬化癥的變異型，臨床表現(xiàn)為軟組織鈣化、雷諾現(xiàn)象、食道功能障礙、指端硬化、毛細(xì)血管擴(kuò)張)，其檢出率為50%～70%，對(duì)PSS的預(yù)后較好，出現(xiàn)此抗體時(shí)，在CREST綜合征患者中極少觀察到心、肺、腎的病變，有助于硬皮病的診斷和分類(lèi)，也可見(jiàn)于原發(fā)性膽汁性肝硬化。

4.2 抗Scl-70抗體

Scl-70抗原是細(xì)胞核內(nèi)的堿性核蛋白，因其主要見(jiàn)于硬皮病，相應(yīng)抗原相對(duì)分子質(zhì)量為70×103，故取名為抗Scl-70抗體。首先在皮膚彌漫型多發(fā)性系統(tǒng)性硬化癥患者血清中發(fā)現(xiàn)抗Scl-70抗體。被認(rèn)為是系統(tǒng)性硬化癥的標(biāo)志性抗體，特異性達(dá)100 %。抗Scl-70抗體陽(yáng)性表明病情進(jìn)展較迅速，皮膚病變往往彌散廣泛，易發(fā)生肺間質(zhì)纖維化和指骨末端吸收。

5 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，系統(tǒng)性自身免疫性疾病是由于人體免疫功能紊亂，使得人體對(duì)自己的組織和細(xì)胞產(chǎn)生了免疫反應(yīng)，其重要標(biāo)志之一是形成了自身抗體。所以，自身抗體的檢測(cè)是輔助診斷系統(tǒng)性自身免疫性疾病的重要手段。隨著研究的不斷深入、免疫學(xué)等學(xué)科的迅速發(fā)展以及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)的更新，系統(tǒng)性自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制將逐步被揭示，將來(lái)還會(huì)發(fā)現(xiàn)更多的血清標(biāo)志物與自身免疫性疾病發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，從而為其靶向治療提供新的幫助，這也將是今后免疫學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究的新熱點(diǎn)。

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（2016-01-25 收稿）

* 黑龍江省皮膚病防治研究所·150001