湯禮賓　章志福

(深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院　廣東 深圳　518109)

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Survivin、Smac/DIABLO表達水平與胎膜早破的關(guān)系分析

湯禮賓章志福

(深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院廣東 深圳518109)

【摘要】目的研究Survivin、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活劑(Smac)/DIABLO與胎膜早破的關(guān)系。方法選取深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院收治的30例胎膜早破孕婦作為觀察組，同期選取30例體檢正常的孕婦作為對照組。兩組均采集孕婦胎膜破口部位組織，采用免疫組織生化方法測定胎膜組織中Survivin及Smac/ DIABLO表達水平。結(jié)果觀察組患者胎膜組織細胞Survivin及Smac/ DIABLO蛋白陽性檢出率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論Survivin及Smac/DIABLO表達水平與孕婦胎膜早破關(guān)系密切，可以較準確地反應(yīng)胎膜早破的情況，可為臨床診斷提高依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】Survivin蛋白；半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活劑；胎膜早破

胎膜早破是臨床上較為常見的一種婦產(chǎn)科并發(fā)癥，主要是由于胎膜細胞凋亡從而降低患者的胎膜組織強度和彈性所致[1]。臨床研究表明，患者的胎膜細胞凋亡情況與Survivin及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活劑(Smac)/ DIABLO蛋白表達水平相關(guān)[2]。本研究就Survivin、Smac/ DIABLO與胎膜早破的關(guān)系進行分析，現(xiàn)報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料選取深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院2013年8月至2014年6月收治的30例胎膜早破孕婦作為觀察組，孕周為32～42周，年齡為20～35歲，單活胎。另外選取30例同期體檢正常的孕婦作為對照組，年齡為22～37歲，孕周為33～42周，單活胎。兩組研究對象年齡、孕周等基本資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2檢測方法采集胎膜破口處組織(2 cm×2 cm×0.5 cm)，采用免疫組織生化檢測方法測定胎膜組織中的Survivin以及Smac/ DIABLO蛋白水平。檢測主要試劑：TUNEL試劑盒購自美國Roche公司，兔抗人Smac多克隆抗體由北京博奧森公司提供，ABC步法試劑盒、DAB試劑盒由武漢博士德公司提供。采用TUNEL試劑盒進行胎膜凋亡細胞原位標記，檢測患者血液樣本中細胞因子的凋亡水平。將標記好的溶液作為TUNEL反應(yīng)混合物。將光鏡下觀察到的細胞核棕黃色顆粒細胞作為陽性細胞，即凋亡細胞。將每例采樣血液樣本均計數(shù)500個細胞。凋亡指數(shù)為TUNEL染色陽性檢測細胞的百分率。采用10%濃度的福爾馬林溶液對所有采樣的血液標本進行固定，用石蠟包埋，切片后制成4 mm左右的石蠟切片，然后做HE染色。采用免疫組化ABC法檢測Survivin和Smac/DIABLO在胎膜中的表達情況。以細胞核和(或)細胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃顆粒為Survivin陽性。

1.3結(jié)果評價選取5個高倍視野(×400)進行檢測，其中每個視野計數(shù)中含有100個腫瘤細胞，應(yīng)用臨床半定量積分法判斷檢測結(jié)果：陽性細胞數(shù)含量0%～5%為0分，含量6%～25%為1分，含量26%～50%為2分，含量51%～75%為3分，含量>75%為4分；陽性檢測強度以患者多數(shù)細胞的呈色反應(yīng)為準，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。2者之積為最后評分。Smac在胎膜中的表達主要在羊膜上皮細胞、絨毛膜滋養(yǎng)層細胞薄膜和胞漿，陽性細胞染色呈棕黃色，不著色為陰性。

1.4統(tǒng)計學方法采用統(tǒng)計學軟件SPSS 17.0進行數(shù)據(jù)處理。定性資料采取率表示，組間比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1Survivin蛋白陽性檢出率對照組患者胎膜組織細胞檢出Survivin蛋白陽性7例(23.33%)，觀察組檢出16例(53.33%)。觀察組患者胎膜組織細胞Survivin蛋白陽性檢出率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.2Smac/DIABLO蛋白陽性檢出率對照組患者胎膜組織細胞檢出Smac/DIABLO蛋白陽性13例(43.33%)，觀察組檢出23例(76.67%)。觀察組患者胎膜組織細胞Smac/DIABLO蛋白陽性檢出率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

3討論

胎膜早破是婦產(chǎn)科臨床較常見的一種妊娠期并發(fā)癥[3]。該病病情復(fù)雜兇險，其確切致病機制尚未明確。臨床主要表現(xiàn)為突發(fā)性陰道排液、臍帶脫垂及宮內(nèi)感染等嚴重癥狀，極有可能導(dǎo)致早產(chǎn)，增加新生兒死亡的風險。同時，胎膜早破也會威脅到產(chǎn)婦的生命健康與安全。有研究數(shù)據(jù)表明，胎膜早破并發(fā)癥的發(fā)生與患者胎膜細胞凋亡有關(guān)[4]。Survivin是凋亡抑制蛋白家族中的一種，具有抑制細胞凋亡及調(diào)節(jié)細胞周期的雙重功能。Survivin主要表達于胚胎和發(fā)育的胎兒內(nèi)部組織中。目前研究數(shù)據(jù)表明，Survivin在多種腫瘤中的高表達與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移均密切相關(guān)[5]。但是，Survivin與胎膜早破的關(guān)系研究相對較少。Smac/DIABLO是一種新近發(fā)現(xiàn)的線粒體膜間蛋白，是Caspase的線粒體激活因子。Smac/DIABLO通過解除凋亡抑制蛋白對Caspase 3、7和9的抑制作用而發(fā)揮促凋亡作用。目前已有實驗證實抑制Smac/DIABLO的表達可減少細胞凋亡，但僅從蛋白角度進行研究，未直接檢測胎膜早破患者及正常孕婦胎膜組織中細胞凋亡的情況。目前Survivin與Smac/DIABLO這對抑制細胞凋亡和促進細胞凋亡的蛋白在胎膜早破患者胎膜組織中的表達與細胞凋亡是否具有一致性有待檢驗。

本研究結(jié)果顯示，兩組患者檢測結(jié)果都發(fā)現(xiàn)了Survivin與Smac/DIABLO的表達，觀察組患者Survivin蛋白表達水平高于對照組(P<0.05)，說明Survivin蛋白表達水平與孕婦胎膜早破關(guān)系密切，可以較準確地反應(yīng)患者胎膜的狀況。觀察組胎膜組織Smac/DIABLO表達水平顯著高于對照組(P<0.05)，說明胎膜組織Smac/DIABLO表達水平與孕婦胎膜早破有關(guān)，具有較高的診斷價值。

綜上所述，Survivin、Smac/DIABLO與孕婦胎膜早破的關(guān)系密切，可以較準確地反應(yīng)胎膜早破的情況，可為臨床診斷提高依據(jù)。

參考文獻

[1]李穎,胡瓊,王凱,等.細胞色素C、Smac與胎膜早破相關(guān)性的研究[J].遵義醫(yī)學院學報,2011,34(6):591-594.

[2]王春妍,楊向東,胡東勝.大承氣湯對急性肝衰竭大鼠肝組織Smac、細胞色素C及Caspase-3表達的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志,2015,30(4):1249-1252.

[3]趙媛媛,王妙英,焦朋增,等.孕產(chǎn)婦血清中Toll-4、MMP-9、sICAM-1水平與早產(chǎn)和未足月胎膜早破的相關(guān)性研究[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2015,24(26):2930-2932.

[4]張閣.胎膜早破孕婦血清CRP和白介素-1與胎膜早破相關(guān)性分析[J].臨床醫(yī)學工程,2015,22(6):757-758.

[5]王妙英,焦朋增,趙媛媛.蛋白酶、IL-8與未足月胎膜早破合并絨毛膜羊膜炎及妊娠結(jié)局的關(guān)系[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2015,24(20):2188-2190,2206.

(收稿日期：2015-12-08)

【中圖分類號】R 714.43+3

doi:10.3969/j.issn.1004-437X.2016.04.023