龍　琴，肖亞雄，唐靈通，盧靈鋒

(1.四川省宜賓市第一人民醫(yī)院檢驗科　644000；2.四川省宜賓市宜賓縣人民醫(yī)院　644000)

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某品牌國產(chǎn)化學(xué)發(fā)光儀檢測降鈣素原的性能評價

龍琴1，肖亞雄1，唐靈通1，盧靈鋒2

(1.四川省宜賓市第一人民醫(yī)院檢驗科644000；2.四川省宜賓市宜賓縣人民醫(yī)院644000)

摘要:目的對某品牌國產(chǎn)化學(xué)發(fā)光儀檢測降鈣素原(PCT)的性能進行評價。方法在新產(chǎn)業(yè)MAGLUMI4000化學(xué)發(fā)光儀上檢測PCT，對其精密度、線性、攜帶污染率進行評價，并與梅里埃(mini-VIDAS)酶聯(lián)免疫熒光法檢測PCT進行相關(guān)性分析。結(jié)果化學(xué)發(fā)光法檢測PCT的低、中濃度樣本的CV批內(nèi)分別為1.56%、2.23%；CV批間分別為2.30%、3.05%。PCT在0.5～98.0 ng/mL濃度范圍內(nèi)線性良好(Y=0.997 22X+0.173 77，r2=0.998 12)。攜帶污染率為0.89%，樣本間交叉污染小。新產(chǎn)業(yè)MAGLUMI4000化學(xué)發(fā)光儀檢測系統(tǒng)與梅里埃mini VIDAS熒光免疫分析儀檢測系統(tǒng)測定PCT的結(jié)果呈明顯相關(guān)(Y=1.004X+0.005 59，r2=0.999 58)。結(jié)論新產(chǎn)業(yè)MAGLUMI4000化學(xué)發(fā)光儀檢測系統(tǒng)測定PCT的性能良好，可供臨床使用。

關(guān)鍵詞:降鈣素原；化學(xué)發(fā)光法；酶聯(lián)免疫熒光法；性能評價

降鈣素原(PCT)是降鈣素的激素原，是一種由116個氨基酸組成的糖蛋白，相對分子質(zhì)量為13×103。健康人血清PCT濃度極低(<0.05 ng/mL)，當(dāng)機體受到促炎反應(yīng)刺激，特別是細(xì)菌感染時，PCT表達(dá)普遍增加，并且從實體組織和各種類型的細(xì)胞中(如肝、腎、脂肪細(xì)胞和肌細(xì)胞等)不斷釋放入血[1]，且炎癥越重，血漿PCT濃度越高[2]。作為一種新型炎癥標(biāo)志物，PCT常用于診斷和鑒別診斷細(xì)菌性和非細(xì)菌性感染及用于感染嚴(yán)重程度的判斷[3]。目前國內(nèi)PCT檢測多采用進口試劑及配套儀器，但存在成本昂貴的問題，因而限制了該項目在基層醫(yī)院的開展。而國產(chǎn)的新產(chǎn)業(yè)PCT試劑及配套MAGLUMI4000化學(xué)發(fā)光儀檢測具有成本低，批量檢測速度快等優(yōu)點，但其檢測性能如何，目前國內(nèi)有關(guān)報道較少見，本試驗就該檢測系統(tǒng)進行相關(guān)性能評價，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料精密度試驗采用新產(chǎn)業(yè)PCT檢測試劑盒配套質(zhì)控品，其余樣本來自宜賓市第一人民醫(yī)院臨床新鮮血清樣本，無明顯溶血、脂血及黃疸。

1.2儀器與試劑PCT化學(xué)發(fā)光法測定試劑盒及配套校準(zhǔn)品、質(zhì)控品為深圳新產(chǎn)業(yè)生物工程股份有限公司生產(chǎn)(批號：068150610)，檢測儀器為新產(chǎn)業(yè)MAGLUMI4000化學(xué)發(fā)光儀及其配套試劑：底物液1+2(批號：302151120)，清洗液(批號：303151021)；PCT熒光免疫分析法測定試劑盒及配套校準(zhǔn)品、質(zhì)控品為梅里埃生產(chǎn)(批號：1004108560)，檢測儀器為梅里埃mini VIDAS熒光免疫分析儀。

1.3方法

1.3.1精密度參考美國國家臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化研究所(CLSI)的EP5-A2文件指南[4]，做精密度試驗。采用2個濃度質(zhì)控品進行檢測，每天2批，每批檢測2次，每日每批至少間隔2 h，共進行20 d，2個濃度樣本分別獲得80個測試結(jié)果。使用經(jīng)離群值檢驗合格的數(shù)據(jù)進行批內(nèi)、批間及總不精密度的計算。

1.3.2線性范圍參考CLSI的EP6-A文件[5]，將PCT的低、高值分別是0.5、98.0 ng/mL的2個樣本，按0.5∶0、0.4∶0.1、0.3∶0.2、0.2∶0.3、0.1∶0.4、0∶0.5(單位：mL)配成6個系列濃度樣本，在MAGLUMI4000化學(xué)發(fā)光儀上每個樣本重復(fù)測3次，以樣本預(yù)期值為X軸，以實測均值為Y軸繪圖。計算線性回歸方程。

1.3.3攜帶污染率選擇高值(H)和低值(L)樣本各1份，依次測高值3次(H1、H2、H3)、低值3次(L1、L2、L3)，計算攜帶污染率。攜帶污染率(%)=(L1-L3)/(H3-L3)×100。

1.3.4相關(guān)性分析參考EP9-A2文件[6]，每天選擇8個新鮮患者樣本，在室內(nèi)質(zhì)控合格的情況下，2 h內(nèi)分別在新產(chǎn)業(yè)MAGLUMI4000化學(xué)發(fā)光儀和梅里埃mini VIDAS熒光免疫分析儀上測定PCT，每個樣本重復(fù)測定2次，連續(xù)5 d，以梅里埃mini VIDAS熒光免疫分析儀2次測定結(jié)果的均值為X軸，以MAGLUMI4000化學(xué)發(fā)光儀2次測定結(jié)果的均值為Y軸繪圖，進行方法比對。

2結(jié)果

2.1精密度試驗結(jié)果PCT低值樣本檢測均值為0.55 ng/mL，變異系數(shù)(CV)分別為：CV批內(nèi)=1.56%，CV批間=2.30%；PCT中值樣本檢測均值為8.30 ng/mL，CV批內(nèi)=2.23%，CV批間=3.05%；低值和中值樣本CV批內(nèi)、CV批間均符合廠家提供的標(biāo)準(zhǔn)(CV批內(nèi)≤5%，CV批間≤10%)。

2.2線性評價結(jié)果PCT的多點線性回歸方程為：Y=0.997 22X+0.173 77，r2=0.998 12。新產(chǎn)業(yè)化學(xué)發(fā)光法檢測PCT在0.5～98.0 ng/mL濃度范圍內(nèi)線性良好。

2.3攜帶污染率選擇PCT高值(H)為60.0 ng/mL和低值(L)為5.0 ng/mL的樣本進行檢測，H1～H3結(jié)果分別為61.5、59.6、60.8 ng/mL，L1～L3結(jié)果分別為5.2、5.1、4.7 ng/mL；攜帶污染率(%)=(5.2-4.7)/(60.8-4.7)×100=0.89。高值樣本對低值樣本的結(jié)果無明顯攜帶污染。

2.4相關(guān)性分析結(jié)果以梅里埃熒光免疫分析法2次測定結(jié)果均值為參比，新產(chǎn)業(yè)化學(xué)發(fā)光法2次測定結(jié)果均值為比較方法，直線回歸方程為Y=1.004X+0.005 59，r2=0.999 58，兩種方法測定相關(guān)性良好。

3討論

據(jù)WHO統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，感染是造成人類死亡最重要的因素之一，約占全球每年總體病死率的25.5%。感染性疾病在臨床主要包括細(xì)菌性和病毒性感染，傳統(tǒng)的實驗室診斷包括白細(xì)胞計數(shù)、淋巴細(xì)胞計數(shù)、CRP等炎癥指標(biāo)、胸部影像及相關(guān)病原菌培養(yǎng)，但存在不能客觀反映感染嚴(yán)重程度、敏感性不高、特異性差、陽性率低、耗時長等諸多缺點[7]，不利于疾病的早期診斷及治療干預(yù)。而PCT在感染發(fā)生3 h即可測得，6～12 h可達(dá)高峰，且?guī)缀醪皇苣I功能狀態(tài)、激素治療的影響，可反映炎癥活動情況及嚴(yán)重程度，具有更高的敏感性和特異性[8]，作為一種新型炎癥標(biāo)志物，近年來在臨床應(yīng)用十分廣泛。

目前，PCT檢測方法眾多，且多以進口試劑為主，如羅氏、西門子、生物梅里埃等，但這些試劑與所用儀器采用封閉式系統(tǒng)，即儀器與試劑必須配套使用方可保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此檢驗試劑價格昂貴，故而如果在基層醫(yī)院采用進口儀器設(shè)備進行該項目的檢測，無疑增加了醫(yī)療成本。與之相對的是，成本較低的國產(chǎn)儀器及試劑盒，但國產(chǎn)試劑盒的檢測效能需要進行驗證。本次試驗采用國產(chǎn)儀器及配套試劑進行PCT的檢測，試驗結(jié)果顯示：采用品牌為新產(chǎn)業(yè)的化學(xué)發(fā)光檢測系統(tǒng)進行PCT的檢測，其精密度良好，低值樣本的不精密度為CV批內(nèi)=1.56%，CV批間=2.30%；中值樣本為CV批內(nèi)=2.23%，CV批間=3.05%，均小于廠家提供的CV批內(nèi)≤5%，CV批間≤10%，完全符合有關(guān)規(guī)定要求。在0.5～98.0 ng/mL濃度范圍內(nèi)線性良好，Y=0.997 22X+0.173 77，r2=0.998 12，該濃度范圍為臨床患者檢測的常見范圍，可以滿足臨床診斷要求。檢測系統(tǒng)攜帶污染率為0.89%，低于3%的要求，樣本間交叉污染小，不會因為上一個較高濃度的PCT樣本，引起下一個低濃度樣本升高，因此可以滿足檢測要求；通過與靶標(biāo)儀器梅里埃mini VIDAS熒光免疫分析儀進行比較，結(jié)果呈明顯相關(guān)，Y=1.004X+0.005 59，r2=0.999 58。

綜上所述，在新產(chǎn)業(yè)MAGLUMI4000化學(xué)發(fā)光儀上檢測PCT的性能良好，不會出現(xiàn)不正確或錯誤的檢驗結(jié)果，且成本較進口試劑低廉，操作簡便，可以單個或批量檢測，每小時可完成上百個測試，完全可滿足臨床使用，對于提高臨床細(xì)菌感染的診斷水平，降低醫(yī)療成本都具有十分重要的意義。

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.14.040

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)14-1998-02

(收稿日期：2016-01-11修回日期：2016-03-20)